【摘要】：研究背景及目的:膽囊癌是一種原發(fā)于膽囊的惡性腫瘤,早期診斷困難,手術(shù)根治性切除率低,同時對化療藥物相對不敏感,預(yù)后差,術(shù)后易復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移。因此研究出針對膽囊癌治療的新手段尤為重要。楊梅素是從楊梅科屬植物的葉、皮及根中提取出來的一種黃酮類化合物,臨床上可用于消炎、抗氧化、止痛、降低血糖和保護肝臟等多種治療。近年來,各種研究表明藥物楊梅素在抗癌方面也有明顯的效果。因此,本研究目的是探討楊梅素體外對膽囊癌NOZ細胞的凋亡效應(yīng)及其作用機制,為膽囊癌化療提供新的途徑。方法:本研究是通過體外細胞實驗完成的。設(shè)實驗組(加楊梅素)及對照組(未加楊梅素)進行比較。通過CCK8實驗及單克隆實驗觀察楊梅素對膽囊癌NOZ細胞的增殖抑制作用;利用流式細胞儀分析楊梅素對膽囊癌NOZ細胞凋亡的影響;采用Western blot實驗檢測楊梅素作用前后線粒體調(diào)往途徑中相關(guān)蛋白的表達情況。結(jié)果:1.楊梅素可明顯抑制膽囊癌NOZ細胞的增殖及克隆能力。隨著楊梅素作用濃度的增加及孵育時間的延長,其殺傷細胞的能力顯著增加。2.楊梅素可誘導(dǎo)膽囊癌NOZ細胞發(fā)生凋亡。與對照組比較,實驗組細胞凋亡率明顯上升,且其晚期凋亡率的上升更加顯著。3.楊梅素通過調(diào)控Bax、Cytc、PARP及Bcl-2蛋白的表達來誘導(dǎo)膽囊癌NOZ細胞凋亡程序的運行。結(jié)論:1.楊梅素對膽囊癌NOZ細胞有明顯的抑制效果,具有劑量、時間依賴性。2.隨著楊梅素濃度增加,膽囊癌NOZ細胞凋亡率明顯增加,同時其晚期凋亡率上升更加顯著。3.楊梅素誘導(dǎo)膽囊癌NOZ細胞凋亡的機制可能與Bcl-2家族介導(dǎo)的線粒體凋亡途徑有關(guān),但其具體機制還需進一步探討。本研究旨在為膽囊癌深入全面的研究提供參考,以及為膽囊癌藥物化療提供新的方向。
【圖文】：

素對膽囊癌 NOZ 細胞生長抑制的影響：實驗將 6 個濃度的楊梅素（10、20、40、60、80、100 umol/L）加胞中，，分別記錄 24、48、72h 三個時間點細胞增殖的情況，通過度楊梅素三個時間點對細胞增殖的影響（圖 1），結(jié)果發(fā)現(xiàn)：1）當(dāng)mol/L 以下時，該藥對膽囊癌 NOZ 細胞無明顯抑制效果；2）當(dāng)楊mol/L 時，該藥對膽囊癌 NOZ 細胞的抑制效果超過了 80%，且存楊梅素濃度也不能再明顯提升其抑制效果；3）當(dāng)楊梅素濃度在 2 之間時，該藥對膽囊癌 NOZ 細胞有明顯的抑制效果，且呈現(xiàn)劑量素作用濃度相同時，細胞培養(yǎng)時間越長，該藥對細胞抑制效果越性。通過細胞生長抑制曲線顯示：24、48、72h 三個時間點 IC50（為 50、45、38umol/L，于是選擇最適濃度 40 umol/L 及最有效濃度完成后續(xù)實驗；選擇較為穩(wěn)定的 48h 這個點作為最佳研究時間。

山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文在不同濃度的楊梅素（40、80umol/L）作用于膽囊癌 NOZ 細胞 48h 后置于光鏡下進行觀察(圖 2)。圖中顯示：相對于對照組而言，實驗組細胞數(shù)目減少，且楊梅素濃度越大細胞數(shù)目減少越明顯，提示楊梅素對細胞造成了破壞，猜測其可能誘導(dǎo)細胞發(fā)生了凋亡。
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R735.8

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

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2 韓超;王健東;;非編碼微小RNA在膽囊癌中的表達及功能[J];中華消化外科雜志;2015年10期

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4 張秀娟;侯U

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