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siRNA沉默β-catenin基因?qū)ξ赴┘?xì)胞hTERT影響的研究

發(fā)布時(shí)間:2019-11-13 12:18
【摘要】:目的:探討RNA干擾技術(shù)靶向沉默β-catenin基因后對(duì)胃癌AGS細(xì)胞增殖、分裂周期和COX-2以及hTERT的影響。方法:利用RNA干擾技術(shù)將特異性β-catenin小干擾RNA序列轉(zhuǎn)染至胃癌AGS細(xì)胞以沉默其基因表達(dá),將實(shí)驗(yàn)設(shè)置為三組,設(shè)置實(shí)驗(yàn)組為轉(zhuǎn)染siRNA-β-catenin的胃癌AGS細(xì)胞,陰性對(duì)照組為轉(zhuǎn)染siRNA-control的胃癌AGS細(xì)胞,Blank組為未轉(zhuǎn)染的正常AGS細(xì)胞。使用熒光顯微鏡檢測(cè)熒光標(biāo)記片段的轉(zhuǎn)染效率,應(yīng)用熒光定量-PCR檢測(cè)靶向沉默β-catenin基因的表達(dá)和沉默效率,以及hTERT和COX-2基因的表達(dá)水平;蛋白免疫印記法檢測(cè)β-catenin、hTERT和COX-2在蛋白水平的表達(dá);MTT法檢測(cè)各組細(xì)胞增殖,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)分析各組細(xì)胞周期。結(jié)果:轉(zhuǎn)染siRNA特異性片段靶向沉默β-catenin基因可明顯下調(diào)β-catenin的表達(dá)量(1.764±0.045 vs 1.00±0.043),實(shí)驗(yàn)組與陰性對(duì)照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);hTERT mRNA的表達(dá)水平與陰性對(duì)照組比較明顯抑制(2.37±0.022 vs 1.00±0.030),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);Wnt/β-catenin信號(hào)通路下游靶基因COX-2 mRNA的表達(dá)水平下調(diào)(1.84±0.057 vs 1.00±0.038),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。沉默β-catenin基因后β-catenin, hTERT和COX-2蛋白相對(duì)表達(dá)量受到抑制,實(shí)驗(yàn)組對(duì)比于陰性對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。MTT法檢測(cè)細(xì)胞在轉(zhuǎn)染后第3天增殖能力明顯下降(P0.05);流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)沉默β-catenin基因72小時(shí)后可抑制細(xì)胞周期,相比于陰性對(duì)照組實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞周期的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:抑制β-catenin基因后能降低胃癌AGS細(xì)胞的增殖能力,阻斷細(xì)胞周期和降低COX-2的表達(dá),β-catenin基因有望成為胃癌治療新靶點(diǎn);Wnt/β-catenin信號(hào)通路可能參與hTERT的調(diào)控,并通過(guò)hTERT及端粒酶發(fā)揮某些生物學(xué)功能。
【圖文】:

細(xì)胞轉(zhuǎn)染


結(jié)果當(dāng)設(shè)置siRNA:Transfec化nReagent為4:邋3、轉(zhuǎn)染化時(shí)后可在巧逡逑光顯微鏡下觀察到細(xì)胞內(nèi)siRNA攜帶的巧光片段,與相同視野下轉(zhuǎn)換至普通顯逡逑微鏡所觀察到的活細(xì)胞計(jì)數(shù)對(duì)比,轉(zhuǎn)染效率可達(dá)80%W上(詳見(jiàn)圖3.1)。逡逑IB逡逑普通顯岕鏡黃光顯微鏡逡逑圖3.1邋AGS細(xì)胞轉(zhuǎn)染后檢測(cè)(200X)逡逑Fig.3.1邋Detection邋of邋AGS邋cells邋比ansfected邋(200邋X)逡逑3.2沉默目-catenin基因?qū)ξ赴粒牵蛹?xì)胞增殖能力的影響逡逑運(yùn)用脅Ai技術(shù){南虺聊穡悖幔簦澹睿椋罨蠔,MTT法检诧傖果盘蕬至x希觧,A-P-catenin組細(xì)胞的增殖能力明顯降低,與siRNA-control姐相比在生長(zhǎng)第逡逑3天后增殖能力有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(0.49±0.025vs0.65±0.037);而siRNA-control狙逡逑與Blank組相比,細(xì)胞增殖能力無(wú)思著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(化65±0.037邋vs邋0.6化化023)逡逑(詳見(jiàn)圖3.2)。逡逑17逡逑

轉(zhuǎn)染,胃癌細(xì)胞,周期分布,統(tǒng)計(jì)學(xué)


siRNA-control邋組邋Gi邋期(56.23%±1.53%)相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;而邋siRNA-control邋組逡逑Gi期(56.23%±1.53%)與Blank組細(xì)胞Gi期(55.52%±1.52%)相比無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差逡逑異(詳見(jiàn)圖3.3)。逡逑i邋.邋B邋I邋ir邋j邋W逡逑LLULLL逡逑Blank邐siRNA-conlrol邐siRNA-p-caleiiiii逡逑圖3.3轉(zhuǎn)染后檢測(cè)S細(xì)細(xì)胞的周期分布,,上圖分別代表了邋Blank細(xì)、siRNA-control組和逡逑siRNA-P-catenin組3組細(xì)胞的周期分布情況逡逑Fig.3.3邋Detection邋of邋three邋groups邋of邋cell邋cycle邋after邋化ansfected
【學(xué)位授予單位】:蘭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類(lèi)號(hào)】:R735.2

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4 ;Simultaneous inhibition of both hTERT and AR gene expression in LNCaP cells using single shRNA vector[A];第十五屆全國(guó)泌尿外科學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2008年

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8 ;Tumor therapeutic effect of hTERT targeted lentivirus,monitored by whole-body noninvasive imaging[A];第九次全國(guó)消化系統(tǒng)疾病學(xué)術(shù)會(huì)議專(zhuān)題報(bào)告論文集[C];2009年

9 張鵬輝;姜習(xí)新;涂植光;;hTERT/U6嵌合啟動(dòng)子對(duì)肝癌細(xì)胞的靶向作用分析[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國(guó)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議資料匯編[C];2008年

10 ;The Effects of Tankyrase1、hTERT Transfection on Corpus Cavernosum Smooth Muscle Cell[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第八次全國(guó)男科學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2007年

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本文編號(hào):2560302

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