【摘要】：目的:從Notch1信號通路探討姜黃素對結(jié)腸癌SW480細胞株增殖的影響。方法:1.利用二步法免疫組織化學方法檢測人結(jié)直腸癌組織病理切片中Notch1信號通路中Notch 1 intracellular domain蛋白(NICD1蛋白)表達的情況,判斷Notch 1 intracellular domain蛋白陽性顆粒表達與人結(jié)直腸癌的關(guān)系,從而推測Notch1信號通路與結(jié)直腸癌的關(guān)系。2.利用流式細胞技術(shù)及MTT方法檢測梯度濃度姜黃素溶液(0μmol/L、7.5μmol/L、15μmol/L、30μmol/L、60μmol/L)處理結(jié)腸腺癌SW480細胞株24小時和48小時后,結(jié)腸腺癌SW480細胞株增殖及凋亡情況。3.利用Western blot方法檢測梯度濃度姜黃素溶液(0μmol/L、7.5μmol/L、15μmol/L、30μmol/L、60μmol/L)處理結(jié)腸腺癌SW480細胞株24小時和48小時后,Notch1信號通路中Notch1、NICD1、Hes-1蛋白表達情況,觀察姜黃素對Notch1信號通路中Notch1、NICD1、Hes-1蛋白表達影響。4.利用RT-PCR方法檢測梯度濃度姜黃素溶液(0μmol/L、7.5μmol/L、15μmol/L、30μmol/L、60μmol/L)處理結(jié)腸腺癌SW480細胞株24小時和48小時后,Notch1信號通路中Notch1、Hes-1基因mRNA表達水平,觀察姜黃素對Notch1信號通路中Notch1、Hes-1基因mRNA表達的影響。結(jié)果:1.免疫組織化學方法結(jié)果顯示Notch 1 intracellular domain蛋白(NICD1蛋白)在人結(jié)直腸癌病理組織中均表達,陽性率100%(40/40),而對照組癌旁正常腸粘膜組織中部分表達,陽性率為90.3%(28/31),但NICD1蛋白在人結(jié)直腸癌組織中表達強度明顯高于癌旁正常腸粘膜組織,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。2.流式細胞技術(shù)和MTT法檢測凋亡結(jié)果均顯示,姜黃素能一定程度上抑制結(jié)腸癌SW480細胞株增殖并促進其凋亡,有濃度和時間依賴。3.Western blot結(jié)果示姜黃素能一定程度上下調(diào)人結(jié)腸腺癌SW480細胞株中NICD1、Notch1、Hes-1蛋白的表達,有時間和劑量依賴,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。4.RT-PCR結(jié)果示姜黃素一定程度上降低了結(jié)腸癌細胞株中Notch1、Hes-1基因m RNA的表達水平,有時間和劑量依賴,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。結(jié)論:1.Notch1信號通路能在人結(jié)直腸癌組織中高表達。2.姜黃素能夠通過下調(diào)Notch1信號通路抑制結(jié)腸腺癌SW480細胞株的增殖并促進細胞凋亡。
【學位授予單位】：南華大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R735.35

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本文編號：2539410