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miRNA-101-3p靶向調控EZH2蛋白抑制胃癌細胞增殖和遷移

發(fā)布時間:2019-05-29 04:00
【摘要】:目的:研究微小RNA-101-3p(miRNA-101-3p)對人胃癌細胞增殖、凋亡和遷移的影響及其可能的調控機制。方法:Real-time PCR檢測2種人胃癌細胞和1種胃黏膜細胞中miRNA-101-3p和zeste增強子同源物2(EZH2)的表達水平;采用脂質體瞬時轉染技術過表達miRNA-101-3p;流式細胞術檢測miRNA-101-3p對胃癌細胞周期和凋亡的影響;Transwell實驗、CCK-8法和臺盼藍染色法檢測miRNA-101-3p對胃癌細胞遷移和增殖能力的影響;Western blot法檢測EZH2的表達。結果:miRNA-101-3p在胃癌細胞的表達水平顯著低于胃黏膜細胞(P0.05);過表達miRNA-101-3p后,流式細胞術結果顯示胃癌細胞的S期比例減少,G0/G1期比例增加,早期凋亡率增加(P0.05);CCK-8法、臺盼藍染色法及Transwell實驗結果顯示胃癌細胞的增殖和遷移能力顯著降低(P0.05);Western blot結果顯示胃癌細胞中EZH2蛋白的表達明顯下降(P0.05)。結論:miRNA-101-3p可能通過靶向負調控EZH2蛋白的表達抑制胃癌細胞的增殖和遷移,進而促進胃癌細胞凋亡。
[Abstract]:Aim: to study the effect of microRNA-101-3p (miRNA-101-3p) on proliferation, apoptosis and migration of human gastric cancer cells and its possible regulatory mechanism. Methods: the expression of miRNA-101-3p and zeste enhancer homologue 2 (EZH2) in two kinds of human gastric cancer cells and one kind of gastric mucous membrane cells was detected by Real-time PCR, and the expression of miRNA-101-3p; was overexpressed by liposomes transient transfer technique. The effects of miRNA-101-3p on the cycle and apoptosis of gastric cancer cells were detected by flow cytometry, and the expression of EZH2 was detected by; Western blot assay. The effects of miRNA-101-3p on the migration and proliferation of gastric cancer cells were detected by Transwell assay, CCK- 8 assay and trypan blue staining. Results: the expression level of miRNA-101-3p in gastric cancer cells was significantly lower than that in gastric mucosa cells (P 0.05). After overexpression of miRNA-101-3p, the results of flow cytometry showed that the proportion of S phase decreased, the proportion of G 0 / G 1 phase increased, and the early apoptosis rate increased (P 0.05). The results of CCK-8 assay, trypan blue staining and Transwell assay showed that the proliferation and migration of gastric cancer cells were significantly decreased (P 0.05); Western blot). The expression of EZH2 protein in gastric cancer cells was significantly decreased (P 0.05). Conclusion: miRNA-101-3p may inhibit the proliferation and migration of gastric cancer cells by targeting negative regulation of EZH2 protein expression, and then promote apoptosis of gastric cancer cells.
【作者單位】: 山西醫(yī)科大學汾陽學院醫(yī)學檢驗系;山西醫(yī)科大學醫(yī)學影像學系;
【基金】:國家自然科學基金資助項目(No.81301426) 山西醫(yī)科大學汾陽學院科研項目(No.2017B05)
【分類號】:R735.2

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