【摘要】：背景與目的:大黃素處理肝癌細(xì)胞后能夠誘導(dǎo)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激和凋亡。鑒于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激與自噬之間的關(guān)聯(lián)及后者作為細(xì)胞對(duì)抗應(yīng)激環(huán)境的一種自我防御機(jī)制,該研究擬探討通過抑制肝癌細(xì)胞自噬信號(hào)通路的策略提高大黃素對(duì)腫瘤細(xì)胞的毒性殺傷作用。方法:大黃素處理肝癌細(xì)胞后,應(yīng)用CYTO-ID自噬檢測(cè)試劑盒和蛋白[質(zhì)]印跡法(Western blot)分別檢測(cè)大黃素誘發(fā)細(xì)胞自噬情況;利用細(xì)胞自噬抑制劑(氯喹)預(yù)先抑制肝癌細(xì)胞自噬的產(chǎn)生,然后用大黃素處理肝癌細(xì)胞,最后通過ATPlite試驗(yàn)和細(xì)胞克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)腫瘤細(xì)胞存活;通過流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)氯喹和大黃素聯(lián)合處理誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞發(fā)生凋亡的凋亡率,采用Western blot檢測(cè)凋亡效應(yīng)蛋白caspase-3活化斷裂后產(chǎn)生活性片段的水平。結(jié)果:大黃素處理肝癌細(xì)胞后能夠誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞自噬;利用氯喹抑制肝癌細(xì)胞自噬能夠顯著能夠提高大黃素對(duì)肝癌細(xì)胞克隆存活的抑制作用;氯喹和大黃素聯(lián)合處理肝癌細(xì)胞能夠顯著提高細(xì)胞周期sub-G1期和活化caspase-3蛋白的表達(dá)水平。結(jié)論:靶向肝癌細(xì)胞自噬能夠提高大黃素的毒性殺傷作用。
[Abstract]:Background & AIM: emodin can induce endoplasmic reticulum stress and apoptosis in HCC cells. In view of the relationship between endoplasmic reticulum stress and autophagy and the latter as a self-defense mechanism of cells against stress environment, The aim of this study was to investigate the toxic killing effect of emodin on tumor cells by inhibiting autophagy signaling pathway of HCC cells. Methods: after emodin treatment, CYTO-ID autophagy kit and protein printing (Western blot) were used to detect emodin induced autophagy. The autophagy inhibitor (chloroquine) was used to inhibit the autophagy of HCC cells in advance, and then the HCC cells were treated with emodin. Finally, the survival of HCC cells was detected by ATPlite test and cell clone formation assay. The apoptosis rate of HCC cells induced by combined treatment of chloroquine and emodin was detected by flow cytometry, and the level of active fragments produced by activation and fragmentation of apoptosis effect protein caspase-3 was detected by Western blot. Results: emodin could induce autophagy of HCC cells after treatment, and the inhibition of autophagy by chloroquine could significantly improve the inhibitory effect of emodin on the clone survival of HCC cells. Combined treatment of chloroquine and emodin could significantly increase the expression of sub- G 1 phase and activated caspase-3 protein in HCC cells. Conclusion: targeting autophagy of HCC cells can improve the toxic killing effect of emodin.
【作者單位】： 甘肅省腫瘤醫(yī)院腹外二科;
【基金】：甘肅省中醫(yī)藥管理局基金項(xiàng)目(GZK-2014-71)
【分類號(hào)】：R735.7

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3 劉s，

本文編號(hào)：2479093