【摘要】：目的探究肺癌細(xì)胞株中表皮生長(zhǎng)因子受體通路底物8(EPS8)表達(dá)下降對(duì)順鉑化療敏感性的影響。方法脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法將EPS8沉默后并通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(qRT-PCR)檢測(cè)EPS8在各細(xì)胞系的沉默效率。采用Caspase-3/7細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)檢測(cè),5μmol順鉑對(duì)淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞系(LCLs)和A549肺癌細(xì)胞凋亡的影響。Alamar Blue細(xì)胞生長(zhǎng)抑制實(shí)驗(yàn)中采用0.01μmol/L光神霉素A作為EPS8抑制劑單用及聯(lián)用不同濃度順鉑,Alamar Blue細(xì)胞生長(zhǎng)抑制實(shí)驗(yàn)檢測(cè)其對(duì)癌和非癌細(xì)胞系生長(zhǎng)抑制的影響。結(jié)果與對(duì)照組比較,LCLs細(xì)胞系中EPS8的沉默導(dǎo)致順鉑干預(yù)時(shí)細(xì)胞存活率升高7.9%,凋亡率下降8.7%。與此相反,順鉑干預(yù)導(dǎo)致肺癌細(xì)胞存活率下降20.6%。光神霉素A在LCLs細(xì)胞系中能夠降低EPS8的表達(dá),并與對(duì)照組比較,非癌細(xì)胞系LCLs在順鉑干預(yù)時(shí)具有更低Caspase-3/7活性,凋亡率降低。在5種非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)細(xì)胞系中,光神霉素A同樣能夠?qū)е翬PS8表達(dá)下降。與LCLs細(xì)胞系比較,光神霉素A的干預(yù)能夠使4種NSCLC細(xì)胞和膀胱癌細(xì)胞HTB9對(duì)順鉑的敏感性增加(P0.05),但NSCLC中存在EGFR突變的H1975細(xì)胞對(duì)順鉑的敏感性并未出現(xiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)改變(P0.05)。結(jié)論通過(guò)核糖核酸(RNA)干擾或者光神霉素A將EPS8表達(dá)抑制后,腫瘤細(xì)胞對(duì)順鉑的敏感性升高,而正常細(xì)胞LCLs對(duì)其敏感性卻出現(xiàn)下降。對(duì)EPS8分子機(jī)制的進(jìn)一步研究有望其成為抗腫瘤治療的新靶點(diǎn)。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of decreased expression of epidermal growth factor receptor pathway substrate 8 (EPS8) on chemotherapy sensitivity of cisplatin in lung cancer cell lines. Methods the silencing efficiency of EPS8 in various cell lines was detected by real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction (qRT-PCR) after silencing with lipofectamine. Caspase-3/7 cell apoptosis assay was used. The effect of 5 渭 mol DDP on apoptosis of lymphoid cell line (LCLs) and A549 lung cancer cells. Alamar Blue cells were treated with 0.01 渭 mol / L photosensin A as an inhibitor of EPS8 alone and in combination with different concentrations of DDP. The effect of Alamar Blue cell growth inhibition test on the growth inhibition of cancer and non-cancer cell lines was detected. Results compared with the control group, the silencing of EPS8 in LCLs cell line increased the cell survival rate by 7.9% and decreased the apoptosis rate by 8.7%. In contrast, the survival rate of lung cancer cells decreased by 20.6%. Photomycin A could decrease the expression of EPS8 in LCLs cell line. Compared with the control group, the non-cancer cell line LCLs had lower Caspase-3/7 activity and lower apoptosis rate when treated with cisplatin. In five non-small cell lung cancer (NSCLC) cell lines, photoShenmycin A can also lead to the decrease of EPS8 expression. Compared with LCLs cell line, the intervention of photomycin A increased the sensitivity of four NSCLC cells and bladder cancer cell line HTB9 to cisplatin (P0.05). However, there was no significant change in the sensitivity of H 1975 cells with EGFR mutation to DDP in NSCLC (P 0.05). Conclusion after EPS8 expression was inhibited by ribonucleic acid (RNA) interference or photomycin A, the sensitivity of tumor cells to cisplatin increased, while the sensitivity of normal LCLs cells to cisplatin decreased. Further study on the molecular mechanism of EPS8 is expected to be a new target for antitumor therapy.
【作者單位】： 廣州軍區(qū)廣州總醫(yī)院呼吸內(nèi)科;廣東藥科大學(xué);中國(guó)人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué);
【分類號(hào)】：R734.2

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2472511