【摘要】：目的神經(jīng)膠質(zhì)瘤是中樞神經(jīng)系統(tǒng)最常見(jiàn)的原發(fā)性腫瘤,其中惡性度最高的多形性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤現(xiàn)有的手術(shù)及放化療等治療方式對(duì)患者總體生存率無(wú)顯著改善。本研究觀察重組慢病毒中與腫瘤增殖、周期相關(guān)的鈣整合素結(jié)合蛋白1(calcium-and integrin-binding protein 1,CIB1)基因,在人膠質(zhì)瘤細(xì)胞系U251中的過(guò)表達(dá)情況及對(duì)其增殖和周期的影響。方法 PCR擴(kuò)增CIB1目的片段,構(gòu)建CIB1重組pLVX-IRES-CIB1-tdTomato慢病毒載體,將重組慢病毒表達(dá)載體感染293T包裝細(xì)胞,進(jìn)行病毒的包裝并檢測(cè)病毒滴度,篩選最佳病毒感染復(fù)數(shù)并感染U251膠質(zhì)瘤細(xì)胞,熒光顯微鏡觀察pLVX-IRES-CIB1-tdTomato慢病毒表達(dá),CCK-8法檢測(cè)CIB1過(guò)表達(dá)對(duì)人膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的影響,流式細(xì)胞儀檢測(cè)CIB1過(guò)表達(dá)對(duì)細(xì)胞周期的影響。結(jié)果成功構(gòu)建慢病毒表達(dá)載體pLVX-CIB1-IRES-tdTomato,制備了重組CIB1慢病毒和空載體慢病毒,病毒滴度分別為2.9×10~7和2.8×10~7 ifu/mL;用最佳病毒感染復(fù)數(shù)100感染U251細(xì)胞。CCK-8檢測(cè)顯示,CIB1感染組與空載體對(duì)照組及空白組相比明顯促進(jìn)細(xì)胞增殖(P0.05),提示CIB1過(guò)表達(dá)對(duì)人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞U251有生長(zhǎng)促進(jìn)效應(yīng)。流式細(xì)胞檢測(cè)顯示,CIB1感染組U251細(xì)胞G_2/M期細(xì)胞百分比明顯增加,S期細(xì)胞比例下降。結(jié)論 CIB1過(guò)表達(dá)可以促進(jìn)U251細(xì)胞增殖,并使細(xì)胞G_2/M細(xì)胞比例上升。
[Abstract]:......
【作者單位】： 蘭州軍區(qū)蘭州總醫(yī)院實(shí)驗(yàn)中心·甘肅省干細(xì)胞與基因藥物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;蘭州大學(xué)藥學(xué)院;蘭州軍區(qū)蘭州總醫(yī)院神經(jīng)外科;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(81372177)
【分類號(hào)】：R739.41
，

本文編號(hào)：2458001