【摘要】：研究背景與研究目的血小板減少癥是臨床常見(jiàn)的放療劑量、化療藥物劑量限制性毒性反應(yīng),可導(dǎo)致降低放療劑量、化療藥物劑量或延遲放化療時(shí)間,甚至終止放化療。此外,血小板減少癥還見(jiàn)于免疫性血小板減少、骨髓增生異常綜合征及造血干細(xì)胞移植術(shù)后。血小板重度減少時(shí)可引起致命性出血而導(dǎo)致患者死亡,由此影響患者的臨床療效和生存,同時(shí)也增加了醫(yī)療費(fèi)用。目前針對(duì)血小板減少癥的治療包括血小板輸注和給予促血小板生長(zhǎng)因子。促血小板生長(zhǎng)因子包括重組人促血小板生成素(recombinant human thrombopoietin, rhTPO)、重組人白細(xì)胞介素-11(recombinant human interleukin-11, rhIL-11)和促血小板生成素受體激動(dòng)劑(Thrombopoietin receptor agonists)艾曲波帕(]Ehmmbopag)和羅米司汀(Romiplostim)。目前,僅rhTPO和rhIL-11被國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局(China Food and Drug Administration, CFDA)批準(zhǔn)用于治療腫瘤相關(guān)的血小板減少癥,二者均起效慢且價(jià)格昂貴。此外,反復(fù)的血小板輸注易引起自身血小板抗體的產(chǎn)生,導(dǎo)致血小板輸注無(wú)效。因此開(kāi)發(fā)新的促血小板生長(zhǎng)因子成為許多學(xué)者研究的工作重點(diǎn)。褪黑素(melatonin,MLT)化學(xué)名為5-甲氧基-N-乙酰色胺,是調(diào)節(jié)神經(jīng)系統(tǒng)及內(nèi)分泌系統(tǒng)的主要因子之一。既往臨床研究證實(shí)MLT能夠降低腫瘤患者血小板減少癥的發(fā)生率,然而MLT對(duì)巨核細(xì)胞／血小板形成和存活的影響及作用機(jī)制尚未見(jiàn)報(bào)道。本課題組前期研究已證實(shí)5-羥色胺(serotonin,5-HT)能夠刺激造血和巨核細(xì)胞生成。MLT是5-HT的乙�；a(chǎn)物。因此,我們推測(cè)MLT可能會(huì)影響巨核細(xì)胞生成及血小板形成,因此,對(duì)血小板減少癥具有治療作用。本研究目的通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證上述假說(shuō)。研究?jī)?nèi)容與研究方法1.血小板減少癥小鼠模型的建立及體內(nèi)實(shí)驗(yàn)觀察指標(biāo)取6-8周齡的雄性Balb/c小鼠24只,隨機(jī)分為正常對(duì)照組(Normal組),模型對(duì)照組(Control組,生理鹽水腹腔注射),MLT組(melatonin, 10mg/kg/d),TPO組(TPO, 1μg/kg/d),每組6只：除正常對(duì)照組外,剩余三組小鼠均給予4Gy全身放射線照射3分鐘。照射后,連續(xù)21天按照分組分別通過(guò)腹腔注射給予相應(yīng)的因子。觀察第0、7、14、21天各組小鼠外周血紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板計(jì)數(shù)水平；21天后,處死各組小鼠取胸骨制作病理切片(5μm厚度),瑞氏吉姆薩染色和HE染色法觀察骨髓組織病理學(xué)改變；測(cè)量各組小鼠第0、7、14、21天體重；21天時(shí),測(cè)量肝、腎及脾臟重量；21天后,將小鼠處死,取雙側(cè)股骨分離提取小鼠骨髓細(xì)胞,采用甲基纖維素法培養(yǎng)分析粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落形成單位(colony forming units-granulocyte macrophage, CFU-GM)、紅細(xì)胞集落形成單位(burst-forming units-erythroid/colony forming units-erythroid, BFU/CFU-E)及粒細(xì)胞、紅細(xì)胞、單核細(xì)胞及巨核細(xì)胞集落形成單位(colony forming units-granulocyte,erythrocyte,monocyte and megakaryocyte, CFU-GEMM)的形成能力；血漿凝塊法培養(yǎng)巨核細(xì)胞集落(colony forming units-megakaryocyte, CFU-MK);貼壁法培養(yǎng)成纖維細(xì)胞集落(colony froming units-fibroblast, CFU-F)。2. CHRF-288-11(CHRF)細(xì)胞的生物學(xué)特性采用瑞氏吉姆薩染色法檢測(cè)CHRF細(xì)胞的形態(tài)學(xué)特征；應(yīng)用細(xì)胞計(jì)數(shù)法繪制CHRF細(xì)胞生長(zhǎng)曲線,并計(jì)算對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞的群體倍增時(shí)間；采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)分析CHRF細(xì)胞的表面分子標(biāo)記表達(dá)；G顯帶法分析CHRF的染色體核型。3.MLT對(duì)CHRF細(xì)胞的增殖和凋亡的影響CCK-8法、細(xì)胞計(jì)數(shù)法分別檢測(cè)不同濃度MLT(0,20,50,100,200,500nM)對(duì)CHRF存活率的影響；去血清饑餓培養(yǎng)法誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,而后加入MLT或TPO,37℃,5%CO2完全濕度培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)72小時(shí),收集各處理組細(xì)胞,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)Annexin V/PI, Tetrechloro-tetraethylbenzimidazol carbocyanine iodide (JC-1), Caspase-3等凋亡相關(guān)蛋白或分子表達(dá)水平變化。4.檢測(cè)CHRF細(xì)胞表面MLT受體表達(dá)采用熒光定量PCR和Western Blotting檢測(cè)CHRF細(xì)胞表面MLT受體(MTl和MT2)的表達(dá)水平。5.MLT影響巨核系細(xì)胞生成的分子機(jī)制利用Western Blotting檢測(cè)MLT對(duì)PI3K/Akt信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路磷酸化蛋白表達(dá)水平的影響及MLT受體在該過(guò)程中的作用。6.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件,對(duì)于連續(xù)型變量,首先進(jìn)行正態(tài)性分布檢驗(yàn),對(duì)于符合正態(tài)性分布的數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,兩組單獨(dú)計(jì)量資料的比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn),多組之間的比較采用完全隨機(jī)設(shè)計(jì)單因素的方差分析(one-way ANOVA),方差齊時(shí)整體的比較采用F檢驗(yàn),多重比較采用Bonferroni法,方差不齊時(shí)采用Welch近似F檢驗(yàn),多重比較采用Dunnett's T3法；當(dāng)P0.05時(shí)認(rèn)為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。研究結(jié)果1、MLT對(duì)放射性骨髓抑制小鼠模型骨髓造血恢復(fù)的影響(1)小鼠外周血血細(xì)胞計(jì)數(shù)①紅細(xì)胞計(jì)數(shù)放射后Control組、MLT組和TPO組紅細(xì)胞計(jì)數(shù)均出現(xiàn)下降,第7天時(shí)最低,隨后逐漸恢復(fù)；第7天時(shí),各組間比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=4.212,P=0.035),兩兩比較發(fā)現(xiàn)僅TPO組與Control組差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[(7.950±0.596)×1012/L versus(6.717±0.512)×1012/L,n=6,P=0.043]；第14天與第7天時(shí)的結(jié)果相似,三組間比較的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=5.349,P=0.018),兩兩比較MLT組與Control組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.080),而TPO組顯著優(yōu)于Control組[(9.350±0.880)×1012/L versus(8.067±0.476)×1012/L,n=6,P=0.022]；第21天時(shí),三組比較之間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=14.998,P=0.000),兩兩比較MLT組、TPO組均顯著高于Control組[MLT組versus Control組：(10.400±0.894)×1012/Lversus(8.800±0.469)×1012/L,n=6,P=0.004；TPO組versus Contol組：(10.917±0.665)×1012/L versus(8.800±0.469)×1012/L, n=6,P=0.000].上述結(jié)果表明：MLT能夠促進(jìn)放射性骨髓抑制小鼠外周血紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的恢復(fù)。②白細(xì)胞計(jì)數(shù)給予全身放射后,小鼠白細(xì)胞計(jì)數(shù)逐漸降低,第7天時(shí)最低,然后逐漸恢復(fù)；第7、14天三組間白細(xì)胞計(jì)數(shù)比較均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(第7天：F=3.369,P=0.062；第14天：F=2.830,P=0.091)；第21天時(shí),各組間比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=7.290,P=0.006),兩兩比較MLT組、TPO組白細(xì)胞計(jì)數(shù)均顯著高于Contol組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[MLT組versus Control組：(7.250±1.725)×109/Lversus(4.750±0.758)×109/L,n=6,P=0.040；TPO組versus Control組：(8.000±1.897)×109/L versus(4.750±0.758)×109/L,n=6,P=0.007]；MLT組與TPO組比較兩組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。上述結(jié)果表明：MLT能夠促進(jìn)外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)恢復(fù),且與TPO作用相當(dāng)。③血小板計(jì)數(shù)與紅細(xì)胞、白細(xì)胞計(jì)數(shù)變化相似,放射后小鼠外周血血小板計(jì)數(shù)出現(xiàn)下降,第7天達(dá)到最低,之后又漸漸恢復(fù)；第0、7天三組間血小板計(jì)數(shù)值比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(第0天：F=0.638,P=0.542；第7天：F=1.353,P=0.288)；第14天時(shí),三組間比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=7.820,P=0.005),兩兩比較僅TPO組顯著優(yōu)于Control組[(385.000±55.045)×109/L versus(261.667±53.541)×109/L,n=6,P=0.004],而MLT組與Control組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.200)；第21天時(shí),各組外周血血小板計(jì)數(shù)比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=8.005,P=0.004),MLT組、TPO組均顯著高于Control組[MLT組versus Control組：(509.167±108.509)×109/L versus(336.667±84.951)×109/L,n=6,P=0.013；TPO組versus Control組：(520.000±69.282)×109/L versus(336.667±84.951)×109/L,n=6,P=0.008],但MLT組與TPO組差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。MLT具有與TPO相似的促進(jìn)放射性小鼠外周血血小板計(jì)數(shù)恢復(fù)的作用。(2)、小鼠體重及臟器重量變化①小鼠體重稱量與外周血計(jì)數(shù)變化趨勢(shì)相同,放射后小鼠的體重逐漸下降,第7天時(shí),四組(Normal組、Control組、MLT組與TPO組)之間比較小鼠體重差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=5.532,P=0.006)；第14天時(shí),各組小鼠體重均較前有所增加,但MLT組小鼠體重仍顯著低于Normal組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[(26.267±0.739)gversus(27.833±0.427)g,n.6,P=0.001]；第21天時(shí),四組小鼠體重比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=3.507,P=0.034),采用LSD法比較,MLT組小鼠體重依然顯著低于Normal組[MLT組versus Normal組：(26.850±0.907)g versus(28.000± 0.735)g,n=6,LSD法比較P=0.018,但采用Bonferroni法,比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P=0.111]。②各組小鼠肝、腎、脾臟稱重放射后第21天時(shí),處死各組小鼠后,分別取其肝、腎、脾臟進(jìn)行計(jì)重比較。肝臟重量,四組比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=11.003,P=0.000),兩兩比較結(jié)果顯示：MLT組顯著低于Control組[(1.260±0.044)g versus(1.450±0.092)g,n=6, P=0.000]:腎臟計(jì)重組間比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=7.552, P=0.001),兩兩比較發(fā)現(xiàn)：與Control組比較,LSD法分析顯示僅TPO組與Control組比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(n=6,P=0.011),而B(niǎo)onferroni法提示無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.068)；與MLT組比較,Bonferroni法分析結(jié)果提示MLT組小鼠腎臟重量顯著低于TPO組[(0.449±0.025)g versus(0.490±0.016)g,n=6,P=0.001],差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義：四組小鼠脾臟計(jì)重比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=3.128,P=0.049),采用LSD法兩兩比較發(fā)現(xiàn)TPO組顯著高于MLT組.Normal組小鼠脾臟重量[TPO組versus MLT組：(0.142±0.027)g versus(0.109±0.011)g,n=6,P=0.012；TPO組versus Normal組：(0.142±0.027)versus(0.113±0.018)g,n=6,P=0.025].不同的分析方法結(jié)果有差異,LSD法比較敏感,但Bonferroni法較保守,檢驗(yàn)更為嚴(yán)格。上述結(jié)果提示：MLT對(duì)小鼠各臟器無(wú)顯著保護(hù)作用。(3)MLT對(duì)骨髓集落形成的影響采用血漿凝塊法進(jìn)行CFU-MK的分析,MLT能夠顯著促進(jìn)CFU-MK的形成[MLT組versus Control組：(33.000±0.018)versus(16.170±2.714),n=6,P0.001]；其他集落(包括CFU-GM,BFU/CFU-E,及CFU-GEMM)采用甲基纖維素法進(jìn)行培養(yǎng)分析；與Control組相比,MLT能夠顯著促進(jìn)CFU-GM[(58.330±6.743) versus(41.170±4.834),n=6,P0.01].BFU-E[(31.330±7.840)versus(12.000± 4.243),n=6,P0.001]和CFU-GEMM[(20.830±2.041)versus(10.000±1.897),n=6,P0.001]的形成,表明MLT能夠促進(jìn)粒系、紅系造血恢復(fù)；CFU.F使用貼壁培養(yǎng)方法分析,MLT處理組與TPO處理組相比,CFU.F數(shù)量差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,提示MLT對(duì)骨髓間充質(zhì)細(xì)胞的保護(hù)作用與TPO相當(dāng),二者均顯著優(yōu)于對(duì)照組[MLT組versus Control組(21.670±2.422)versus(11.670±3.502),n=6,P0.001；TPO組versus Control組(20.830±6.513)versus(11.670±3.502),n=6,P 0.001]。(4)骨髓組織病理學(xué)檢測(cè)21天后,將各組小鼠全部處死后進(jìn)行骨髓組織學(xué)分析,對(duì)照組小鼠骨髓組織造血細(xì)胞數(shù)較正常小鼠明顯減少,壞死與凋亡細(xì)胞比例高于正常小鼠；MLT,TPO處理組小鼠骨髓組織細(xì)胞數(shù)多于對(duì)照組,特別是巨核系細(xì)胞,在MLT組骨髓組織中巨核細(xì)胞及其祖細(xì)胞數(shù)均顯著多于對(duì)照組；TPO處理組,巨核細(xì)胞及其祖細(xì)胞恢復(fù)的較粒系及紅系更好。2.CHRF-288-11細(xì)胞的生物學(xué)特征瑞氏吉姆薩染色,CHRF細(xì)胞胞體較大,胞核大,形態(tài)不規(guī)則,染色胞質(zhì)不均勻,染色深藍(lán)色,符合巨核細(xì)胞形態(tài)特征；流式細(xì)胞術(shù)分析細(xì)胞表面分子標(biāo)記,CHRF細(xì)胞高表達(dá)CD61:92.07%,CD41:99.04%,CD42:95.03%巨核系特異性分子標(biāo)記,高表達(dá)CD13:99.20%,CD33:98.11%；HLA-DR:25.010%,表達(dá)陽(yáng)性；CD3:6.310%,CD34:2.540%,CDl9:5.5%,CD38:2.760%,表達(dá)為陰性。CHRF染色體核型95,XY,存在多條染色體數(shù)目異常；CHRF細(xì)胞對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期群體倍增時(shí)間為58.88小時(shí)。3、MLT對(duì)CHRF細(xì)胞增殖和凋亡的影響(1)MLT能夠促進(jìn)巨核細(xì)胞增殖并具有時(shí)間與濃度依賴性,200nnM時(shí)促進(jìn)作用最強(qiáng)。(2)MLT對(duì)CHRF凋亡的影響①Annexin V/PI早期凋亡細(xì)胞比例四組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=1.714,P=0.217)；但晚期凋亡細(xì)胞比例四組之間存在顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(F=23.087,P=0.000)；多組比較結(jié)果表明：MLT、TPO組晚期凋亡細(xì)胞均較對(duì)照組降低,Bonferroni法分析差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[MLT組versus Control組：(13.143±2.510)%versus(26.105± 4.638)%,n=4,P0.01；TPO組versus Control組(10.620±3.145)%versus (26.105±4.638)%,n=4,P0.001]；總凋亡率四組比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=25.860,P=0.000)；細(xì)胞總凋亡率比較,MLT.TPO組顯著低于對(duì)照組[MLT組versus Control組：(14.180±2.492)%versus(27.930±3.828)%,n=4,P0.001；TPO組versus Control組(11.960±3.661)%versus(27.930±3.828)%,n=4,P0.001],差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。②Caspase-3和JC-1檢測(cè)Caspase-3活化率比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=107.428,P=0.000)；MLT組Caspase-3的活化水平較對(duì)照組降低,且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[(22.833±2.275)%versus(31.200±2.022)%,n=3,P=0.002]；MLT組與TPO組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[(22.833±2.275)%versus(19.900±1.179)%,n=3,P=0.252].JC-1檢測(cè)結(jié)果與Caspase-3檢測(cè)結(jié)果相似,對(duì)照組細(xì)胞JC-1陽(yáng)性細(xì)胞比例明顯增高。MLT組與對(duì)照組比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[(36.553±2.259)％versus (44.503±3.033)％,n=3,P=0.048],而與TPO組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[(36.553±2.259)％versus(34.873±2.671)％,n=3,P0.05].4、MLT受體在CHRF表達(dá)情況(1)熒光定量PCR檢測(cè)MLT受體mRNA水平表達(dá)采用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)分析,MT1 mRNA在CHRF細(xì)胞和L-02肝細(xì)胞中相對(duì)表達(dá)量分別為：0.000±0.000,0.824±0.543,Levene方差齊性檢驗(yàn)F=6.550,P=0.034,方差不齊,t=--3.390, P=0.028,MT1 mRNA在CHRF細(xì)胞表達(dá)水平顯著低于L-02細(xì)胞。MT2 mRNA在CHRF細(xì)胞和L-02肝細(xì)胞中相對(duì)表達(dá)量分別為：0.216±0.111,0.583±0.302,Levene方差齊性檢驗(yàn)F=3.206,P=0.124；兩組比較t=-2.282,P=0.063,因此,MT2 mRNA在CHRF和L-02兩種細(xì)胞表達(dá)水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(2)Western-Blotting檢測(cè)MLT受體蛋白水平表達(dá)檢測(cè)結(jié)果與RT-PCR結(jié)果一致,CHRF細(xì)胞表達(dá)MT2受體。5、MLT對(duì)P13K/Akt信號(hào)通路的影響(1)MLT對(duì)Akt蛋白表達(dá)的影響MLT處理后,p-Akt水平較對(duì)照組顯著升高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[MLT組versus Control組(69.370±6.787)％versus(33.479±6.056)％,n=5,P=0.000]；MLT聯(lián)合PI3K抑制劑Wortmannin (100nM)處理組,p-AKt水平較MLT單獨(dú)處理組顯著降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[(MLT+Wortmannin)組versus Melatonin組：(42.700±13.645)％versus(69.370±6.787)％,n=5,P=0.002].Wortmannin單獨(dú)處理組p-Akt表達(dá)水平顯著低于MLT組[Wortmannin組versus Melatonin組：(25.767±7.734)％versus(69.370±6.787)％,n=5,P=0.000],而與Control組、(MLT+Wortmannin)組比較均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。(2)MLT受體阻滯劑Luzindole對(duì)MLT活化p-Akt的影響首先對(duì)各組比較結(jié)果進(jìn)行Levene檢驗(yàn),方差不齊,F=5.987,P=0.006；組間比較采用近似的Welch檢驗(yàn),P=0.000；采用Dunnett's T3方法進(jìn)行兩兩多重比較；結(jié)果提示：MLT處理后,p-Akt水平較對(duì)照組顯著升高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[MLT組versus Control組：(51.988±10.090)%versus(14.277±6.513)%,n= 5,P=0.001]；MLT聯(lián)合MLT受體阻滯劑Luzindole(1μM)處理組,p-Akt水平較MLT單獨(dú)處理組顯著降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[(MET+Luzindole)組versusMLT組：(3.436±1.113)%versus(51.988±10.090)%,n=5,P,=0.002]；而與對(duì)照組相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[(MLT+Luzindole)組versus Control組：(3.436±1.113)%versus(14.277±6.513)％,n=5,P=0.081]。Lnzindole單獨(dú)處理組p-Akt表達(dá)水平較MLT組顯著降低[Luzindole組versus MLT組:(10.084±4.779)%versus(51.988 ±10.090)%,n=5,P=0.001],而與Contol組,(MLT+Luzindole)組比較均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異[Luzidole組versus Contol組：P=0.804；Luzindole組versus(MET+ Luzindole)組：P=0.139]。研究結(jié)論1、MLT能夠促進(jìn)放射性血小板減少癥小鼠模型的造血恢復(fù)。2.CHRF符合巨核細(xì)胞的形態(tài)學(xué)特征,并高表達(dá)CD41、CD61、CD42等特異性巨核細(xì)胞系表面分子標(biāo)記。3、MLT能夠促進(jìn)巨核細(xì)胞增殖,減少細(xì)胞凋亡,具有抗凋亡作用。MLT對(duì)巨核細(xì)胞的抗凋亡作用是通過(guò)降低線粒體膜的滲透量和減少活化的Caspase-3的表達(dá)來(lái)實(shí)現(xiàn)的。4.CHRF細(xì)胞表達(dá)MT2受體。5、MLT可能通過(guò)MT2受體激活P13K,Akt信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路發(fā)揮抗凋亡作用。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R558.2;R730.5

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本文編號(hào)：2371963