【摘要】：第一部分：不同溫度熱消融小鼠皮下移植性肝癌的實(shí)驗(yàn)研究目的：通過(guò)對(duì)小鼠皮下移植性肝癌進(jìn)行不同溫度的熱生理鹽水消融,觀察小鼠生存時(shí)間、肝癌體積大小、消融灶內(nèi)免疫細(xì)胞及熱休克蛋白的變化,探討誘導(dǎo)有效免疫反應(yīng)的合適消融溫度。方法：共120只C57BL/6J小鼠皮下種瘤成功后,隨機(jī)分為50℃、60℃、70℃、100℃及對(duì)照組共5組,每組24只；7-12天后,腫瘤長(zhǎng)徑、短徑約6～8mm時(shí)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),在各組小鼠的皮下瘤內(nèi)按各組溫度注射不同溫度熱生理鹽水0.15m1進(jìn)行消融,每組各取6只觀察小鼠生存時(shí)間,6只于第15日觀察腫瘤大小變化及取下腫瘤標(biāo)本做HE染色,同時(shí)計(jì)算肝癌殘留率,6只于消融后第72小時(shí)取腫瘤標(biāo)本做免疫組化CD4+細(xì)胞、CD8+細(xì)胞數(shù)兩項(xiàng)指標(biāo)檢測(cè),6只于消融后第24小時(shí)取腫瘤標(biāo)本做免疫組化HSP70單項(xiàng)指標(biāo)檢測(cè)。結(jié)果：①小鼠生存時(shí)間：各組小鼠生存時(shí)間不全相等(P0.05),50℃組生存時(shí)間較長(zhǎng),對(duì)照組最短。②腫瘤體積大小變化：各消融組體積均顯著小于對(duì)照組(P0.05)；與消融前腫瘤體積比較,50℃組是唯一一組較消融前腫瘤明顯縮小的組別(P0.05)。③HE染色結(jié)果：經(jīng)HE染色證實(shí),對(duì)照組標(biāo)本中無(wú)腫瘤細(xì)胞壞死,肝癌殘留率為100%；50℃組中1個(gè)標(biāo)本可見(jiàn)腫瘤細(xì)胞殘留,肝癌殘留率為16.7%；剩余三組中每組2個(gè)標(biāo)本可見(jiàn)腫瘤細(xì)胞殘留,肝癌殘留率為33.3%。④免疫組化結(jié)果：50℃組CD4+細(xì)胞數(shù)量顯著高于其它各組(P0.05),CD8+細(xì)胞50℃組與對(duì)照組之間無(wú)顯著差異(P0.05),但高于其它熱消融組(P0.05)；50℃C組CD4+/CD8+比值升高最為明顯；HSP70標(biāo)記指數(shù)熱消融組均顯著高于對(duì)照組(P0.05),標(biāo)記指數(shù)在各組中隨溫度升高而降低,即50℃組最高,對(duì)照組最低。結(jié)論：在熱生理鹽水消融皮下移植性肝癌的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中,50℃左右的消融溫度可能更有利于誘導(dǎo)產(chǎn)生更為強(qiáng)烈的主動(dòng)免疫效應(yīng)。第二部分：熱消融聯(lián)合消融灶周邊注射CpG ODN對(duì)小鼠肝癌生長(zhǎng)抑制作用的研究目的探討熱消融聯(lián)合消融灶周邊注射CpG ODN治療對(duì)小鼠肝癌的影響以及繼發(fā)免疫效應(yīng)的抗腫瘤效果。方法建立Hepal-6小鼠皮下肝癌動(dòng)物模型,隨機(jī)分為100℃熱消融治療組,100℃熱消融聯(lián)合CpG ODN治療組、CpG ODN治療組和對(duì)照組,8只于接種腫瘤細(xì)胞后第7天、第14天給予治療,測(cè)量小鼠腫瘤體積,觀察荷瘤小鼠存活情況及消融灶內(nèi)淋巴細(xì)胞和HSP70變化,另8只第7天給予治療,30d后對(duì)側(cè)接種等量腫瘤細(xì)胞,1月后處死,觀察小鼠生存狀況及對(duì)側(cè)種瘤生長(zhǎng)情況結(jié)果①各實(shí)驗(yàn)組小鼠觀察期內(nèi)死亡率均低于對(duì)照組(P0.05),各實(shí)驗(yàn)組對(duì)側(cè)均無(wú)腫瘤生長(zhǎng),對(duì)照組再接種腫瘤生長(zhǎng)率為100%(3/3),兩者相比,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；②各實(shí)驗(yàn)組小鼠與對(duì)照組相比,腫瘤體積顯著縮小(P0.05),聯(lián)合治療組腫瘤縮小更顯著；③各實(shí)驗(yàn)組較對(duì)照組有較多淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)(P0.05),聯(lián)合治療組數(shù)量最多；④各實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比有更多HSP70表達(dá)(P0.05),聯(lián)合治療組HSP70表達(dá)最多,與其余實(shí)驗(yàn)組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論CpG ODN對(duì)荷瘤小鼠具有明顯的免疫增強(qiáng)作用,CpG ODN聯(lián)合熱消融能有效的治療小鼠肝癌,且能有效的減少?gòu)?fù)發(fā)第三部分：瘤內(nèi)注射MIP-3 α對(duì)小鼠肝癌生長(zhǎng)抑制作用的研究目的探討巨噬細(xì)胞炎癥蛋白-3a (MIP-3a)能否在小鼠皮下肝癌灶內(nèi)趨化、募集外周的樹(shù)突狀細(xì)胞(DCs),使之在原位有效地?cái)z取并提呈腫瘤抗原,誘導(dǎo)針對(duì)肝癌細(xì)胞的特異性免疫應(yīng)答,以達(dá)到控制腫瘤進(jìn)展的目的。方法成功建立小鼠皮下肝癌模型后隨機(jī)分為3組,第10天起分別向MIP-3α治療組、PBS對(duì)照組小鼠皮下腫瘤內(nèi)注射MIP-3α溶液(含MIP-3α0.2μm)及PBS 100μl,空白對(duì)照組小鼠不予任何處理。20天后取腫瘤組織,免疫組化法檢測(cè)腫瘤內(nèi)DCs、CD4+、CD8+細(xì)胞浸潤(rùn)情況,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)腫瘤內(nèi)DCs浸潤(rùn)數(shù)量及其表型。另取部分小鼠建立模型,分組、治療方法同前,治療實(shí)驗(yàn)結(jié)束后持續(xù)觀察,繪制腫瘤生長(zhǎng)曲線并觀察生存時(shí)間。結(jié)果① MIP-3α治療組小鼠腫瘤內(nèi)浸潤(rùn)的CD4+、CD8+細(xì)胞及DCs數(shù)量均顯著高于其他兩組。② MIP-3α治療組小鼠腫瘤內(nèi)浸潤(rùn)性DCs的CD80、CD86表達(dá)率顯著高于其他兩組(P0.05)。③ MIP-3α治療組小鼠腫瘤生長(zhǎng)速率顯著低于對(duì)照組(p0.001),生存時(shí)間較對(duì)照組明顯延長(zhǎng)(p0.05)。結(jié)論①瘤內(nèi)注射MIP-3α可在小鼠肝癌病灶內(nèi)趨化、募集外周的樹(shù)突狀細(xì)胞,使其攝取并提呈腫瘤抗原,有效誘導(dǎo)針對(duì)肝癌細(xì)胞的特異性免疫應(yīng)答。②MIP-3α在小鼠皮下肝癌模型的局部微環(huán)境下可能具有促進(jìn)樹(shù)突狀細(xì)胞成熟的作用。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R735.7

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 官泳松,周翔平;肝癌的血液供應(yīng)與介入治療[J];中華肝臟病雜志;2003年12期

2 胡宏楷,吳孟超,張秀忠,屠振興,舒鴻逵;大鼠肝內(nèi)移植型肝癌模型的建立[J];第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);1986年01期

3 成美英;張洪泉;;肝癌疫苗研究進(jìn)展[J];國(guó)際腫瘤學(xué)雜志;2006年02期

4 徐燕立;孟志強(qiáng);劉魯明;;中藥抗肝癌復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移的實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展[J];中華中醫(yī)藥雜志;2010年10期

5 姜飚;李挺;韋長(zhǎng)元;;肝癌細(xì)胞多藥耐藥和耐藥性逆轉(zhuǎn)[J];中國(guó)醫(yī)學(xué)文摘(腫瘤學(xué));2001年02期

6 鄭小華;肝癌的血液供應(yīng)[J];放射學(xué)實(shí)踐;2002年06期

7 蔣時(shí)紅,周宜強(qiáng);中醫(yī)藥防治肝癌機(jī)理及實(shí)驗(yàn)研究[J];中國(guó)中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志;2003年04期

8 丁田貴,尹立杰,彭兆祥;肝癌荷瘤大鼠立體定向放射治療的實(shí)驗(yàn)研究[J];實(shí)用腫瘤學(xué)雜志;2003年02期

9 汪蕓;段小嫻;;肝癌的化學(xué)預(yù)防研究進(jìn)展[J];四川腫瘤防治;2005年04期

10 蔣小良;牟培源;李永忠;;~(90)Y治療肝癌的研究進(jìn)展[J];放射學(xué)實(shí)踐;2006年01期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 史衛(wèi)衛(wèi);劉秀筠;張秀敏;何琪楊;;白藜蘆醇增強(qiáng)吉西他濱抗肝癌活性的機(jī)制[A];2009醫(yī)學(xué)前沿論壇暨第十一屆全國(guó)腫瘤藥理與化療學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2009年

2 鄔雄飛;任進(jìn);戚新明;;短期大鼠致肝癌模型肝臟線粒體損傷的研究[A];2007年全國(guó)藥物毒理學(xué)會(huì)議論文集[C];2007年

3 徐紹斌;全顯躍;孫希杰;;兔VX2種植型肝癌模型動(dòng)態(tài)磁共振張量成像的量化研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十三屆全國(guó)放射學(xué)大會(huì)論文匯編（下冊(cè)）[C];2006年

4 董鳳林;查月琴;劉哲嬰;董彥;朱利霞;王阿軍;李智;肖榮;;超聲引導(dǎo)下建立兔VX2肝癌模型的實(shí)驗(yàn)研究[A];第二屆長(zhǎng)三角超聲醫(yī)學(xué)論壇暨2009年浙江省超聲醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2009年

5 賈洪順;全顯躍;孫濤;;兔VX2肝癌MRI征象與病理對(duì)照研究[A];全國(guó)醫(yī)學(xué)影像技術(shù)學(xué)術(shù)會(huì)議（CMIT-2004）論文匯編[C];2004年

6 陳晟;鄧鋼;牛煥章;何仕誠(chéng);方文;郭金和;朱光宇;余輝;李國(guó)昭;滕皋軍;;兔VX2肝癌模型的經(jīng)股動(dòng)脈插管技術(shù)探討及對(duì)肝腎功能的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十三屆全國(guó)放射學(xué)大會(huì)論文匯編（下冊(cè)）[C];2006年

7 黃智銘;陳旭艷;王劍虹;陳周峰;吳金明;吳建勝;陳向榮;蔡勇;;CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞在肝癌免疫中的研究[A];首屆浙江省消化病學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編[C];2008年

8 黃智銘;陳旭艷;;CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞在肝癌免疫中的研究[A];2008年浙江省內(nèi)科學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2008年

9 羅仕華;鄭傳勝;馮敢生;;重組人P53腺病毒基因經(jīng)介入方法治療肝癌的的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究[A];第十一次全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合影像學(xué)術(shù)研討會(huì)暨全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合影像學(xué)研究進(jìn)展學(xué)習(xí)班資料匯編[C];2010年

10 張玄;鄭翔;何凡;陳知水;;移植肝肝癌中IL-17A的表達(dá)及意義的研究[A];2012中國(guó)器官移植大會(huì)論文匯編[C];2012年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前2條

1 戴麗昕;肝癌的克星[N];上海科技報(bào);2007年

2 記者 錢(qián)海紅 鄭莉麗;我國(guó)肝癌肝炎研究國(guó)際領(lǐng)先[N];健康報(bào);2000年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 唐建華;三維肝癌類組織體模型建立及肺侵襲關(guān)聯(lián)蛋白篩查[D];復(fù)旦大學(xué);2010年

2 趙蔭農(nóng);消融聯(lián)合瘤周注射免疫佐劑誘導(dǎo)小鼠抗肝癌主動(dòng)免疫效應(yīng)系列研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2015年

3 王寧;肝癌介入治療與肝癌多藥耐藥實(shí)驗(yàn)研究[D];吉林大學(xué);2005年

4 謝萌;基于介孔二氧化硅的控釋靶向給藥系統(tǒng)的構(gòu)建及對(duì)肝癌的藥效學(xué)研究[D];浙江大學(xué);2013年

5 孫希杰;兔VX2肝癌模型動(dòng)態(tài)量化磁共振擴(kuò)散、張量成像與病理的對(duì)照研究[D];第一軍醫(yī)大學(xué);2005年

6 閻雄;抑癌基因maspin在肝癌中的作用及機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2006年

7 全顯躍;兔VX2肝癌模型動(dòng)態(tài)量化磁共振灌注成像與病理的對(duì)照研究[D];第一軍醫(yī)大學(xué);2006年

8 莊鵬遠(yuǎn);干擾素α對(duì)肝癌生長(zhǎng)和肺轉(zhuǎn)移影響的實(shí)驗(yàn)研究[D];復(fù)旦大學(xué);2009年

9 姜慧杰;肝癌多層螺旋CT灌注成像實(shí)驗(yàn)和臨床應(yīng)用研究[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2005年

10 廖成功;Basigin選擇性剪接體的鑒定及其在肝癌增殖和侵襲中的功能[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2010年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 王英新;活體觀測(cè)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)肝癌微循環(huán)的作用及影響[D];大連醫(yī)科大學(xué);2012年

2 程寶興;碘-125組織間植入治療肝癌的實(shí)驗(yàn)研究[D];蘇州大學(xué);2001年

3 王為;基于磁共振圖像的肝癌識(shí)別技術(shù)研究[D];大連理工大學(xué);2008年

4 張志培;肝癌細(xì)胞在不同免疫力小鼠中生長(zhǎng)特點(diǎn)與免疫細(xì)胞間的關(guān)系[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2001年

5 廖維榮;二氧化碳對(duì)肝癌細(xì)胞體外侵襲作用的研究[D];南昌大學(xué);2010年

6 李廣欣;肝癌放療靶區(qū)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2008年

7 朱求實(shí);RCAS1mRNA在肝癌表達(dá)的意義[D];華中科技大學(xué);2007年

8 單士崗;GP73蛋白在肝病中的表達(dá)特點(diǎn)及與肝癌預(yù)后相關(guān)性的研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2013年

9 游蓁;高強(qiáng)度超聲治療對(duì)兔VX2肝癌血道播散的影響[D];四川大學(xué);2007年

10 陳國(guó)碩;經(jīng)導(dǎo)管動(dòng)脈化療栓塞聯(lián)合重組人血管內(nèi)皮抑素恩度治療兔VXⅡ肝癌模型的實(shí)驗(yàn)研究[D];廣州醫(yī)科大學(xué);2014年

，

本文編號(hào)：2354340