發(fā)布時間：2018-10-29 13:21

【摘要】：目的：對比微滴式數(shù)字PCR技術(shù)(droplet digital PCR, ddPCR)與免疫組織化學(xué)(IHC)聯(lián)合熒光原位雜交(FISH)檢測浸潤性乳腺癌人類表皮生長因子受體2(HER2)基因的符合率,評估微滴式數(shù)字PCR技術(shù)檢測HER2的應(yīng)用價值,進而分析HER2基因擴增與乳腺癌其他病理學(xué)指標(biāo)及中醫(yī)辨證分型的相關(guān)性,為臨床診療及預(yù)后判斷提供科學(xué)依據(jù)。方法：1.通過廣東省中醫(yī)院住院病歷系統(tǒng)及華海病理系統(tǒng),收集從2012年7月至2013年12月就診于廣東省中醫(yī)院的120例經(jīng)病理組織學(xué)確診為浸潤性乳腺癌的病例,從中篩選出110例具有完整術(shù)后病理資料的病例納入研究。2.對入選標(biāo)本HER2基因行IHC檢測,對IHC積分為2+的病例行FISH檢測；3.應(yīng)用微滴式數(shù)字PCR技術(shù)對110例浸潤性乳腺癌經(jīng)IHC檢測評分為0,1+,2+,3+的標(biāo)本進行HER2基因擴增檢測；4.對所有標(biāo)本的雌激素受體(ER)、孕激素受體(PR)、腫瘤細胞增殖因子(Ki-67)行THC檢測。5.應(yīng)用SPSS19.0統(tǒng)計軟件分析HER2表達量與年齡、腫瘤類型、腫瘤大小、組織學(xué)分級、Luminal分型、ER、PR、Ki-67、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移個數(shù)、.有無絕經(jīng)、中醫(yī)辨證分型之間的相關(guān)性。當(dāng)比較微滴式數(shù)字PCR與IHC聯(lián)合FISH檢測HER2的符合率時,則使用Kappa進行一致性檢驗；當(dāng)探討ddPCR測得的HER2表達量與其他臨床病理學(xué)指標(biāo)及中醫(yī)證型的相關(guān)性時,則使用Spearman相關(guān)性分析；當(dāng)研究乳腺癌中醫(yī)證型與乳腺癌預(yù)后因素的相關(guān)性時,則使用卡方檢驗。結(jié)果：1.HER2基因的IHC檢測結(jié)果53例為0／1+；32例2+；25例為3+。32例IHC 2+標(biāo)本經(jīng)FISH檢測,8例陽性,24例陰性。2.110例入組病例中,HER2拷貝數(shù)／細胞的ddPCR值31例≥3.2,即使用ddPCR檢測出HER2基因的陽性表達率為28.18%(31／110),79例標(biāo)本HER2拷貝數(shù)／細胞的ddPCR值3.2,即使用ddPCR檢測出HER2基因的陰性表達率為71.82%(79／110)。3. ddPCR與IHCFISH檢測的陽性結(jié)果符合率93.9%(31／33),ddPCR與IHCFISH陰性結(jié)果符合率100%(77／77)。兩種方法一致性較好,Kappa值為0.96,P0.01。4.本組ER/PR的陽性表達率分別為69.1%和45.5%,Ki-67高表達率60.0%。5.Her-2定量表達與腫瘤大小呈正相關(guān)(rs=0.224,P0.05)、與Ki-67表達呈正相關(guān)(rs=0.215,P0.05)、與組織學(xué)分級呈正相關(guān)(rs=0.261,P0.01),與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移個數(shù)呈正相關(guān)(rs=0.172,P0.05),與ER表達呈負相關(guān)(rs=-0.417,P0.01)、與PR表達呈負相關(guān)(rs=-0.353,P0.01),與TNM分期呈正相關(guān)(rs=0.335,P0.01),與Luminal分型呈正相關(guān)(rs=0.266,P0.01),與年齡、腫瘤類型及絕經(jīng)狀態(tài)無顯著相關(guān)性(P0.05)。6.經(jīng)Spearman相關(guān)性檢驗,乳腺癌中醫(yī)證型與年齡相關(guān)(rs=0.219,P＜0.05)經(jīng)卡方檢驗,與ER表達相關(guān)(X2=39.415,P0.01),與TNM分期相關(guān)(X2=32.410,P0.05),與HER2、 PR、 Ki-67表達,組織學(xué)分級無顯著相關(guān)性(P0.05)。結(jié)論：1.使用微滴式數(shù)字PCR技術(shù)能成功檢測出乳腺癌HER2基因的擴增狀態(tài),并且其結(jié)果與傳統(tǒng)方法(IHC聯(lián)合FISH)一致性較好,陽性符合率為93.9%(31／33),陰性符合率為100%(77／77)。2.HER2基因定量表達與腫瘤直徑大小、Ki-67表達、組織學(xué)分級、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移個數(shù)、TNM分期、Luminal分型呈正相關(guān)；與ER、 PR的表達呈負相關(guān)；與年齡、絕經(jīng)狀態(tài)、腫瘤類型無顯著相關(guān)性。3.乳腺癌中醫(yī)證型與患者年齡分布、ER表達和TNM分期相關(guān),與HER2、PR、Ki-67表達,組織學(xué)分級無顯著相關(guān)性。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：廣州中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R737.9

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本文編號：2297804