【摘要】：目的探討miR-214對(duì)Hep G2細(xì)胞增殖及細(xì)胞周期的影響。方法 Realtime-PCR法檢測(cè)肝癌細(xì)胞株SMMC-7721、Hep G2、SK-Hep-1、Huh 7、Hep3B及正常肝細(xì)胞L-02中miR-214表達(dá)量,并利用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染miR-214NC及miR-214 mimics,采用Realtime-PCR法檢測(cè)轉(zhuǎn)染效果;采用MTT法、流式細(xì)胞術(shù)分別檢測(cè)miR-214對(duì)肝癌細(xì)胞活力、凋亡及細(xì)胞周期影響;蛋白印跡(WB)檢測(cè)miR-214對(duì)肝癌細(xì)胞中細(xì)胞周期蛋白D1(cyclin D1),細(xì)胞周期蛋白依賴(lài)性激酶4(CDK4),生存素(survivin)及增值細(xì)胞核抗原(PCNA)表達(dá)影響。結(jié)果 miR-214在肝癌細(xì)胞SMMC-7721、SK-Hep-1、Huh 7、Hep3B、Hep G2中表達(dá)量[分別為(1.25±0.10)、(1.43±0.10)、(0.95±0.09)、(0.98±0.01)、(0.82±0.08)]明顯低于正常肝細(xì)胞L-02(2.52±0.23),其中Hep G2中miR-214表達(dá)量最低。miR-214 mimics組Hep G2細(xì)胞中miR-214表達(dá)量(2.38±0.23)明顯高于miR-214 NC組(0.83±0.08),miR-214mimics組Hep G2細(xì)胞活力(0.37±0.03)明顯低于miR-214 NC組(0.78±0.07);與miR-214 NC組比較,miR-214mimics組Hep G2細(xì)胞凋亡率明顯升高,細(xì)胞周期阻滯于G1期,cyclin D1、CDK4、survivin及PCNA表達(dá)量下調(diào),差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。結(jié)論上調(diào)miR-214表達(dá)可抑制肝癌細(xì)胞增殖,其機(jī)制可能與調(diào)控細(xì)胞周期相關(guān)蛋白表達(dá)水平有關(guān)。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of miR-214 on the proliferation and cell cycle of Hep G2 cells. Methods Realtime-PCR assay was used to detect the expression of miR-214 in hepatoma cell line SMMC-7721,Hep G2SK-Hep-1Huh7Hep3B and normal hepatocytes L-02, and the transfection effect was detected by miR-214NC and miR-214 mimics, transfection with liposome, and the viability of hepatocarcinoma cells was detected by MTT assay and flow cytometry, respectively. The effects of miR-214 on the expression of cyclin D1 (cyclin D1), cyclin dependent kinase 4 (CDK4), survivin (survivin) and proliferating cell nuclear antigen (PCNA) were detected by Western blot (WB). Results the expression of miR-214 in hepatoma cell line (1.25 鹵0.10), (1.43 鹵0.10), (0.95 鹵0.09), (0.98 鹵0.01), (0.82 鹵0.08) was significantly lower than that in normal hepatocyte L-02 (2.52 鹵0.23). The expression of miR-214 in miR-214 mimics group was significantly higher than that in miR-214 NC group (2.38 鹵0.23), and the activity of Hep G2 in miR-214mimics group was significantly higher than that in miR-214 NC group. (0.37 鹵0.03) was significantly lower than that in miR-214 NC group (0.78 鹵0.07), and the apoptosis rate of Hep G2 cells in miR-214mimics group was significantly higher than that in miR-214 NC group. The cell cycle was blocked in G1 phase, and the expression of cyclin D1 CDK4 and PCNA was down-regulated (P0.01). Conclusion Up-regulation of miR-214 expression can inhibit the proliferation of hepatoma cells, and its mechanism may be related to the regulation of cell cycle related protein expression level.
【作者單位】： 牡丹江醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院肝膽外科;
【分類(lèi)號(hào)】：R735.7

【參考文獻(xiàn)】

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2 Li-Li Zhang;Yan-Jun Guo;Chun-Na Zhao;Jian-Yun Gao;;Effects and mechanism of miR-214 on hepatocellular carcinoma[J];Asian Pacific Journal of Tropical Medicine;2015年05期

3 郭明明;蔡銳彬;鄒德志;趙坤;劉江輝;;miR-214對(duì)人肝細(xì)胞癌增殖能力影響的體外實(shí)驗(yàn)研究[J];中華肝臟外科手術(shù)學(xué)電子雜志;2014年05期

4 李煜;孔祥文;樓永軍;洪利婭;;癌癥研究與臨床治療中的CDK抑制劑[J];中國(guó)現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué);2014年09期

5 田曉娟;劉海峰;柳建強(qiáng);;Ku80在石英誘導(dǎo)細(xì)胞周期改變中作用[J];中國(guó)公共衛(wèi)生;2015年01期

6 李玉華;王姣鋒;江峰;林文堯;沈福民;孟煒;;survivin基因易感性及其單倍型與原發(fā)性肝細(xì)胞癌關(guān)系[J];中國(guó)公共衛(wèi)生;2012年02期

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2 張嬌;錢(qián)暉;;miR-214/199a在消化系統(tǒng)腫瘤診斷中的作用[J];臨床檢驗(yàn)雜志;2016年05期

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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6 Luigi Rossi;Federica Zoratto;Anselmo Papa;Francesca Iodice;Marina Minozzi;Luigi Frati;Silverio Tomao;;Current approach in the treatment of hepatocellular ca[J];World Journal of Gastrointestinal Oncology;2010年09期

7 李先東;曾斌;謝立群;;Survivin蛋白及β-catenin蛋白在原發(fā)性肝癌組織中的表達(dá)及其臨床意義[J];現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué);2008年01期

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4 ;《現(xiàn)代細(xì)胞周期分子生物學(xué)》已出版[J];中華實(shí)驗(yàn)和臨床感染病雜志(電子版);2010年03期

5 ;細(xì)胞周期的閥門(mén)[J];第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2000年06期

6 吳家睿;;細(xì)胞周期的調(diào)控[J];科學(xué);2002年01期

7 王曉玲;D類(lèi)細(xì)胞周期素在細(xì)胞周期中的作用[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(分子生物學(xué)分冊(cè));2002年01期

8 佟力,歐陽(yáng)紅梅,肖敏;慢性粒細(xì)胞白血病患者細(xì)胞周期各時(shí)相指標(biāo)變化的觀察[J];昆明醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2002年02期

9 ;細(xì)胞周期及其調(diào)控機(jī)制的研究[J];上海針灸雜志;2003年05期

10 張惠;施生根;王美霞;沈麗娟;張少鋒;;模擬咬合壓力對(duì)人牙周膜成纖維細(xì)胞細(xì)胞周期的影響[J];牙體牙髓牙周病學(xué)雜志;2005年12期

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3 黃敏;梁娟;魏俊寧;李朝軍;;熱休克蛋白70與鈣調(diào)蛋白的相互作用可能調(diào)控細(xì)胞周期的進(jìn)程[A];中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會(huì)第九次會(huì)員代表大會(huì)暨青年學(xué)術(shù)大會(huì)論文摘要集[C];2007年

4 孫黎光;李新鳴;;web2基因參與芽殖酵母S期檢查點(diǎn)調(diào)控[A];中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)會(huì)第八屆會(huì)員代表大會(huì)暨全國(guó)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要集[C];2001年

5 康鐵邦;;細(xì)胞周期失調(diào)與腫瘤[A];中國(guó)病理生理學(xué)會(huì)第十三屆腫瘤、第十四屆免疫專(zhuān)業(yè)委員會(huì)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2012年

6 平潔;汪暉;;吲哚-3-原醇對(duì)肝星狀細(xì)胞凋亡及細(xì)胞周期的影響[A];第十屆全國(guó)生化與分子藥理學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編[C];2007年

7 張學(xué)敏;;細(xì)胞周期與基因組不穩(wěn)定性(英文)[A];第11屆全國(guó)脂質(zhì)與脂蛋白學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2012年

8 張進(jìn)華;丁彥青;;介紹一種分步傳代消化的新方法篩選培養(yǎng)細(xì)胞周期中M期細(xì)胞[A];中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會(huì)第五次會(huì)議論文摘要匯編[C];1992年

9 張紅鋒;陳樹(shù)德;張利華;;低頻脈沖電場(chǎng)對(duì)真皮成纖維細(xì)胞細(xì)胞周期的影響[A];動(dòng)物學(xué)專(zhuān)輯——上海市動(dòng)物學(xué)會(huì)1997年年會(huì)論文集[C];1997年

10 季宇彬;高鵬;鄒翔;;G_2/M檢驗(yàn)點(diǎn)調(diào)控機(jī)制研究概述[A];2008年中國(guó)藥學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)暨第八屆中國(guó)藥師周論文集[C];2008年

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