【摘要】：目的研究17β-雌二醇(estradiol,E_2)刺激甲狀腺乳頭狀癌K-1細胞增殖、遷移及生長因子類似物人三葉草因子1(trefoil factor family 1,TFF1)分泌及分子機制。方法 ELISA檢測E_2、ERβ激動劑(propylpyrazoletriol,PPT)、ERβ激動劑(diarylpropionitrile,DPN)對K-1細胞TFF1分泌的影響,Western blot檢測細胞中雌激素受體ERα、ERβ的表達量;設計合成ERαsiRNA、ERβsiRNA后,轉(zhuǎn)染K-1細胞,采用ELISA觀察其對E_2誘導的TFF1分泌的影響。染色體免疫共沉淀檢測ERα、ERβ與TFF1基因啟動子的相互作用;MTT檢測E_2對K-1細胞增殖的影響;Transwell檢測E_2對K-1細胞遷移的作用。結果 E_2處理后K-1細胞上清TFF1含量逐漸升高,24 h達到峰值,隨后降低;PPT處理K-1細胞后TFF1含量增多,而DPN處理降低TFF1含量;轉(zhuǎn)染ERαsiRNA后細胞TFF1分泌量減少;而轉(zhuǎn)染ERβsiRNA后分泌量升高。Western blot檢測結果顯示,K-1細胞中雌激素受體ERα表達高于ERβ。染色體免疫共沉淀結果顯示,ERα能與TFF1基因啟動子區(qū)域結合;MTT結果顯示,E_2處理促進K-1細胞增殖;Transwell檢測結果顯示,E_2處理增強K-1細胞遷移。結論 E_2可以通過ERα促進K-1細胞中TFF1的表達及分泌,促進細胞增殖和遷移。
[Abstract]:Objective to investigate the secretion and molecular mechanism of 17 尾 -estradiol (estradiol,E_2) -stimulated proliferation, migration and growth factor analogue of human clover factor 1 (trefoil factor family 1 (TFF1) in K-1 cells of papillary thyroid carcinoma. Methods the effect of E _ 2H _ 2ER 尾 agonist (propylpyrazoletriol,PPT) and ER 尾 agonist (diarylpropionitrile,DPN) on the secretion of TFF1 in K-1 cells was detected by ELISA. The expression of estrogen receptor ER 偽 -mer 尾 in K-1 cells was detected by Western blot. After ER 偽 siRNA,ER 尾 siRNA was synthesized and transfected into K-1 cells, ELISA was used to observe the effect of ER 偽 siRNA,ER 尾 siRNA on TFF1 secretion induced by E _ 2. Chromosome immunoprecipitation was used to detect the interaction between ER 偽 -ER 尾 and TFF1 gene promoter. The effect of E _ (2) on the proliferation of K-1 cells was detected by MTT and the effect of E _ (2) on the migration of K ~ (-1) cells was detected by Transwell. Results the content of TFF1 in K-1 cell supernatant increased gradually after treatment with EK 2, then reached its peak value at 24 h, then decreased after treated with PPT, the content of TFF1 increased, while DPN treatment decreased the content of TFF1, and the TFF1 secretion of K-1 cells decreased after transfection of ER 偽 siRNA. The expression of estrogen receptor ER 偽 in K-1 cells was higher than that of ER 尾. The results of chromosome immunoprecipitation showed that ER 偽 could bind to the promoter region of TFF1 gene. Conclusion EK _ 2 can promote the expression and secretion of TFF1 and the proliferation and migration of K-1 cells through ER 偽.
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學基礎醫(yī)學院生物化學與分子生物學教研室 分子醫(yī)學與腫瘤研究中心;
【基金】：國家自然科學基金面上項目(81272937)~~
【分類號】：R736.1

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