【摘要】：目的研究17β-雌二醇(estradiol,E_2)刺激甲狀腺乳頭狀癌K-1細(xì)胞增殖、遷移及生長(zhǎng)因子類(lèi)似物人三葉草因子1(trefoil factor family 1,TFF1)分泌及分子機(jī)制。方法 ELISA檢測(cè)E_2、ERβ激動(dòng)劑(propylpyrazoletriol,PPT)、ERβ激動(dòng)劑(diarylpropionitrile,DPN)對(duì)K-1細(xì)胞TFF1分泌的影響,Western blot檢測(cè)細(xì)胞中雌激素受體ERα、ERβ的表達(dá)量;設(shè)計(jì)合成ERαsiRNA、ERβsiRNA后,轉(zhuǎn)染K-1細(xì)胞,采用ELISA觀(guān)察其對(duì)E_2誘導(dǎo)的TFF1分泌的影響。染色體免疫共沉淀檢測(cè)ERα、ERβ與TFF1基因啟動(dòng)子的相互作用;MTT檢測(cè)E_2對(duì)K-1細(xì)胞增殖的影響;Transwell檢測(cè)E_2對(duì)K-1細(xì)胞遷移的作用。結(jié)果 E_2處理后K-1細(xì)胞上清TFF1含量逐漸升高,24 h達(dá)到峰值,隨后降低;PPT處理K-1細(xì)胞后TFF1含量增多,而DPN處理降低TFF1含量;轉(zhuǎn)染ERαsiRNA后細(xì)胞TFF1分泌量減少;而轉(zhuǎn)染ERβsiRNA后分泌量升高。Western blot檢測(cè)結(jié)果顯示,K-1細(xì)胞中雌激素受體ERα表達(dá)高于ERβ。染色體免疫共沉淀結(jié)果顯示,ERα能與TFF1基因啟動(dòng)子區(qū)域結(jié)合;MTT結(jié)果顯示,E_2處理促進(jìn)K-1細(xì)胞增殖;Transwell檢測(cè)結(jié)果顯示,E_2處理增強(qiáng)K-1細(xì)胞遷移。結(jié)論 E_2可以通過(guò)ERα促進(jìn)K-1細(xì)胞中TFF1的表達(dá)及分泌,促進(jìn)細(xì)胞增殖和遷移。
[Abstract]:Objective to investigate the secretion and molecular mechanism of 17 尾 -estradiol (estradiol,E_2) -stimulated proliferation, migration and growth factor analogue of human clover factor 1 (trefoil factor family 1 (TFF1) in K-1 cells of papillary thyroid carcinoma. Methods the effect of E _ 2H _ 2ER 尾 agonist (propylpyrazoletriol,PPT) and ER 尾 agonist (diarylpropionitrile,DPN) on the secretion of TFF1 in K-1 cells was detected by ELISA. The expression of estrogen receptor ER 偽 -mer 尾 in K-1 cells was detected by Western blot. After ER 偽 siRNA,ER 尾 siRNA was synthesized and transfected into K-1 cells, ELISA was used to observe the effect of ER 偽 siRNA,ER 尾 siRNA on TFF1 secretion induced by E _ 2. Chromosome immunoprecipitation was used to detect the interaction between ER 偽 -ER 尾 and TFF1 gene promoter. The effect of E _ (2) on the proliferation of K-1 cells was detected by MTT and the effect of E _ (2) on the migration of K ~ (-1) cells was detected by Transwell. Results the content of TFF1 in K-1 cell supernatant increased gradually after treatment with EK 2, then reached its peak value at 24 h, then decreased after treated with PPT, the content of TFF1 increased, while DPN treatment decreased the content of TFF1, and the TFF1 secretion of K-1 cells decreased after transfection of ER 偽 siRNA. The expression of estrogen receptor ER 偽 in K-1 cells was higher than that of ER 尾. The results of chromosome immunoprecipitation showed that ER 偽 could bind to the promoter region of TFF1 gene. Conclusion EK _ 2 can promote the expression and secretion of TFF1 and the proliferation and migration of K-1 cells through ER 偽.
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室 分子醫(yī)學(xué)與腫瘤研究中心;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(81272937)~~
【分類(lèi)號(hào)】：R736.1

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本文編號(hào)：2250074