發(fā)布時間：2018-09-08 12:15

【摘要】：背景與目的:LASP1是一種新的肌動蛋白結(jié)合蛋白,參與細(xì)胞骨架的重組調(diào)控及細(xì)胞遷移,在多種惡性腫瘤中高表達(dá),并與腫瘤的增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。但目前LASP1在胃癌發(fā)生、發(fā)展中的作用少見報道。該研究旨在探討LASP1在胃癌增殖和侵襲中的作用及分子機(jī)制。方法:利用實(shí)時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)和蛋白[質(zhì)]印跡法(Western blot)檢測LASP1在不同胃癌細(xì)胞系中的表達(dá),應(yīng)用RNA干擾技術(shù)抑制BGC823細(xì)胞中LASP1的表達(dá),采用RTFQ-PCR和Western blot檢測轉(zhuǎn)染后LASP1的表達(dá),應(yīng)用體外增殖、遷移和侵襲實(shí)驗(yàn)檢測轉(zhuǎn)染后細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲能力,通過F-actin聚合實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞的F-actin的聚合能力,采用Western blot檢測轉(zhuǎn)染前后BGC823細(xì)胞中Akt的磷酸化情況。結(jié)果:LASP1在胃癌BGC823細(xì)胞中高表達(dá)。RNA干擾技術(shù)沉默LASP1基因后,干擾組與對照組相比,LASP1的m RNA和蛋白表達(dá)水平均明顯下降。細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)顯示,干擾組細(xì)胞的增殖率低于對照組(P0.05);Transwell遷移和侵襲實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),與對照組相比,干擾組細(xì)胞的遷移和侵襲能力均明顯降低(P0.05);在干擾組細(xì)胞內(nèi)的F-actin聚合量比對照組減少(P0.05);在干擾組細(xì)胞內(nèi)Akt磷酸化受到抑制。結(jié)論:LASP1的表達(dá)降低可以抑制胃癌BGC823細(xì)胞的體外增殖、遷移和侵襲能力,LASP1通過調(diào)節(jié)F-actin的聚合和Akt磷酸化從而影響胃癌細(xì)胞的侵襲、轉(zhuǎn)移。
[Abstract]:Background & AIM: LASP1 is a novel actin binding protein involved in the regulation of cytoskeleton recombination and cell migration. It is highly expressed in various malignant tumors and is closely related to tumor proliferation invasion and metastasis. However, the role of LASP1 in the occurrence and development of gastric cancer is rarely reported. The aim of this study was to investigate the role and molecular mechanism of LASP1 in the proliferation and invasion of gastric cancer. Methods: real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction (real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR) and Western blot (Western blot) were used to detect the expression of LASP1 in different gastric cancer cell lines. RNA interference technique was used to inhibit the expression of LASP1 in BGC823 cells. RTFQ-PCR and Western blot were used to detect the expression of LASP1 after transfection. The proliferation, migration and invasion of transfected cells were detected by in vitro proliferation, migration and invasion experiments. The aggregation ability of F-actin was detected by F-actin polymerization assay. Western blot was used to detect the phosphorylation of Akt in BGC823 cells before and after transfection. Results the expression of m RNA and protein in the interfering group was significantly lower than that in the control group after the LASP1 gene was silenced by the high expression of .RNAi technique in BGC823 cells of gastric cancer. Cell proliferation test showed that the cell proliferation rate in the interference group was lower than that in the control group (P0.05). The ability of migration and invasion were significantly decreased in the interference group (P0.05); the amount of F-actin aggregation in the interference group was lower than that in the control group (P0.05); the phosphorylation of Akt was inhibited in the interference group. Conclusion the decreased expression of WASP1 can inhibit the proliferation of gastric cancer BGC823 cells in vitro. The migration and invasion ability of LASP1 may affect the invasion and metastasis of gastric cancer cells by regulating the aggregation of F-actin and the phosphorylation of Akt.
【作者單位】： 濰坊醫(yī)學(xué)院臨床病理系 神經(jīng)疾病與再生修復(fù)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81472365) 山東省自然科學(xué)基金(ZR2015HL091,ZR2014HM086,ZR2016HL20) 山東省醫(yī)藥衛(wèi)生科技發(fā)展計劃(2013WS0279,2014WS0182) 山東省高等學(xué)�？萍加媱�(J15LK11)
【分類號】：R735.2

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