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人參皂苷免疫納米對胃癌荷瘤裸鼠侵襲轉(zhuǎn)移及VEGF-C、TGF-β1表達(dá)的影響

發(fā)布時(shí)間:2018-09-05 07:33
【摘要】:目的:建立裸鼠原位熒光胃癌模型,探討人參皂苷免疫納米(VEGFR3-mediated immune-nanoemulsion of ginsenoside Rg3, VRIN)對人胃癌裸鼠原位移植瘤轉(zhuǎn)移及胃癌裸鼠血清中血管內(nèi)皮生長因子-C (Vascular endothelial growth factor-C, VEGF-C)、轉(zhuǎn)化生長因子-β1 (Transforming growth factor-beta1, TGF-β1)表達(dá)的影響。方法:利用穩(wěn)定表達(dá)紅色熒光的細(xì)胞系NUGC-4胃癌細(xì)胞成功建立裸鼠原位熒光胃癌模型。造模后第9天,將32只人胃癌移植瘤裸鼠隨機(jī)分成4組,每組8只,分別予生理鹽水、5-FU、VRIN低劑量、VRIN高劑量進(jìn)行干預(yù),觀察各組移植瘤裸鼠生存狀態(tài)及腫瘤轉(zhuǎn)移情況。實(shí)驗(yàn)終點(diǎn)處死小鼠,切開胸腹,在開放熒光體視顯微鏡下檢查移植瘤轉(zhuǎn)移情況,計(jì)算轉(zhuǎn)移率,并留取原位移植瘤和轉(zhuǎn)移瘤組織行病理檢查。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay, ELISA)檢測裸鼠血清中VEGF-C、TGF-β1表達(dá)。結(jié)果:1、成功建立裸鼠原位熒光胃癌模型,部分裸鼠出現(xiàn)轉(zhuǎn)移,生理鹽水組、5-FU組、VRIN低劑量組、VRIN高劑量組的轉(zhuǎn)移率分別為:87.5%、50%、37.5%和12.5%。VRIN高劑量組和生理鹽水組比較,有統(tǒng)計(jì)學(xué)上的意義(P0.05)。2、5-FU組、VRIN低劑量組、VRIN高劑量組均能明顯降低胃癌血清中VEGF-C、TGF-p1的表達(dá),與生理鹽水組對照均具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。其中尤以5-FU組、VRIN高劑量組下調(diào)VEGF-C、TGF-β1的表達(dá)較為明顯,與VRIN低劑量組相比有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。VRIN高劑量組與5-FU組比較,無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。VEGF-C、TGF—β1在發(fā)生轉(zhuǎn)移胃癌裸鼠組中的表達(dá)顯著高于未轉(zhuǎn)移組(P0.05)。結(jié)論:1.用穩(wěn)定表達(dá)紅色熒光的細(xì)胞系NUGC-4胃癌細(xì)胞成功建立裸鼠原位熒光胃癌模型,人參皂苷免疫納米(VRIN)能顯著抑制人胃癌裸鼠原位移植瘤轉(zhuǎn)移。2. VEGF-C、TGF-β1水平與胃癌的轉(zhuǎn)移密切相關(guān);VRIN能顯著下調(diào)胃癌裸鼠血清中VEGF-C、TGF-β1的水平,可能是其抑制胃癌轉(zhuǎn)移的機(jī)制。
[Abstract]:Objective: to establish an in situ fluorescence gastric cancer model in nude mice. Objective: to investigate the effects of ginsenoside immune nanoparticles (VEGFR3-mediated immune-nanoemulsion of ginsenoside Rg3, VRIN) on the expression of vascular endothelial growth factor-C (Vascular endothelial growth factor-C, VEGF-C and transforming growth factor-尾-1 (Transforming growth factor-beta1, TGF- 尾 _ 1 in the serum of nude mice with human gastric cancer after orthotopic transplantation. Methods: the in situ fluorescence gastric cancer model of nude mice was successfully established by using NUGC-4 gastric cancer cell line which expressed red fluorescence stably. On the 9th day after modeling, 32 nude mice were randomly divided into 4 groups, each group (n = 8), which were treated with saline 5-FUU VRIN low dose and high dose VRIN, respectively, to observe the survival status and tumor metastasis of nude mice in each group. The mice were sacrificed at the end of the experiment. The tumor metastasis was examined under the open fluorescence stereoscopic microscope and the metastasis rate was calculated. The orthotopic transplanted tumor and the metastatic tumor tissue were taken for pathological examination. Enzyme linked immunosorbent assay (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay, ELISA) was used to detect the expression of VEGF-C,TGF- 尾 1 in nude mice serum. Results one of the nude mice successfully established an in situ fluorescent gastric cancer model. Some of the nude mice showed metastasis. The metastatic rates of the low dose 12.5%.VRIN group and the 12.5%.VRIN high dose group were 37. 5% and 37. 5%, respectively, compared with those of the normal saline group. There was statistical significance (P0.05). 2FU low dose group could significantly reduce the expression of VEGF-C,TGF-p1 in the serum of gastric cancer (P0.05), and normal saline group had significant statistical significance (P0.05). The down-regulation of VEGF-C,TGF- 尾 _ 1 expression was more obvious in the 5-FU group than in the VRIN low-dose group (P0.05). The expression of VEGF-C,TGF- 尾 _ 1 in the high-dose VRIN group was significantly lower than that in the 5-FU group. The expression of TGF- 尾 1 in metastatic gastric cancer group was significantly higher than that in non-metastasis group (P0.05). Conclusion 1. NUGC-4 gastric cancer cell line with stable expression of red fluorescence was successfully used to establish nude mice model of in situ fluorescence gastric cancer. Ginsenoside immunized nano (VRIN) could significantly inhibit the metastasis of human gastric cancer xenografts in nude mice. The level of VEGF-C,TGF- 尾 1 was closely related to the metastasis of gastric cancer. The level of VEGF-C,TGF- 尾 1 in serum of nude mice with gastric cancer was significantly down-regulated by VEGF-C,TGF- 尾 1, which may be the mechanism of inhibiting the metastasis of gastric cancer.
【學(xué)位授予單位】:南京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R735.2

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本文編號:2223608

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