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T細胞浸潤在肺腺癌發(fā)生中的意義以及與MicroRNA21的關系

發(fā)布時間:2018-08-23 12:57
【摘要】:背景肺癌的發(fā)生機制迄今尚未明了,是導致臨床上對肺癌的防治不力的原因之一,因此肺癌成為危害人們身體健康的重大危險疾病。信號傳導與轉錄激活因子3(Signal transducers and activators of transcription,STAT)是生物體內許多生長因子和細胞因子的主要信號傳導蛋白,它在細胞的分化、功能、免疫平衡以及腫瘤發(fā)生中起著重要的作用。MicroRNA21(miR-21)是一種非編碼的小分子RNA,參與機體內生長代謝、發(fā)育與疾病,并且與多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、侵襲、轉移有關。近年來關于miRNAs與STAT家族成員之間的信號轉導之間的相互關系研究越來越多,尤其miR-21和STAT3信號通路的相互作用機制得到大多數(shù)人的認同。那么Mi R-21/STAT3信號轉導通路在肺癌發(fā)生發(fā)展中的意義如何?以及對腫瘤內環(huán)境中,T淋巴細胞浸潤的影響如何?對臨床上治療肺腺癌有何意義?目前尚未見公開報道。本課題通過采用實時熒光定量PCR(quantificational real-time polymerase chain reaction,q RT-PCR)等方法,檢測人肺腺癌組織中STAT3、miR-21的表達情況,通過免疫組化檢測肺腺癌組織中T4、T8細胞的浸潤情況,分析二者之間的關系,探討miR-21/STAT3信號轉導通路異常與肺腺癌發(fā)生發(fā)展以及T細胞浸潤之間的影響以及臨床意義,為臨床上進一步防治肺癌提供新思路。目的通過檢測STAT3和miR-21在肺腺癌發(fā)生發(fā)展過程中的動態(tài)表達,腫瘤內環(huán)境中T4、T8細胞的浸潤情況,探討miR-21/STAT3在肺腺癌發(fā)生和對腫瘤內環(huán)境中淋巴細胞的浸潤之間的作用與意義。方法所有標本均來自于2013年6月到2015年6月間,解放軍第91中心醫(yī)院檢驗病理科、河南焦作市人民醫(yī)院病理科,手術切除的46例肺腺癌組織和癌旁組織,其中有34例轉移癌;12例正常肺組織做為陰性對照。所取的肺腺癌組織、癌旁組織(需癌組織邊緣以外約2-5cm)及正常的肺組織均為新鮮的組織標本,并將其放置于-80℃冰箱或液氮中進行保存。肺腺癌組織、癌旁組織及正常肺組織均經(jīng)過高級職稱病理醫(yī)師確診。實驗所收集的上述標本不包括手術前已經(jīng)過化學藥物治療的肺腺癌患者或復發(fā)的肺腺癌患者。采取q RT-PCR方法檢測miR-21及STAT3基因表達情況,免疫組化方法檢測T4、T8細胞的表達情況。采用SPSS17.0軟件對實驗結果進行t檢驗及單因素方差分析等相關統(tǒng)計分析。結果1常規(guī)病理診斷在此次收集的肺腺癌組織共46例,其中發(fā)生淋巴結轉移癌34例;12例正常肺組織作為對照。所有組織均經(jīng)過病理診斷。2 STAT3mRNA表達通過q RT-PCR方法檢測STAT3mRNA在上述組織中的表達結果如下:正常肺組織為0.319±0.015;癌旁組織為0.631±0.020;肺腺癌組織為1.046±0.042;轉移癌組織為1.235±0.015。正常肺組織、肺癌旁組織、肺腺癌組織、轉移癌組織,組內之間基因表達的差異具有顯著性(P0.01),肺腺癌組織中STAT3基因表達高于正常及癌旁組織。其中,肺腺癌與和正常肺組織比較,兩者之間具有極顯著性差異(P0.01)。3 miR-21的表達情況我們通過運用qRT-PCR方法檢測了,miR-21在上述各類組織中的表達情況,實驗結果顯示如下:正常組0.0018±0.001;癌旁組0.017±0.005;腺癌組0.098±0.036;轉移癌組0.126±0.134,組間方差分析F=17.016,P0.05,正常肺組織和肺腺癌組織之間存在極顯著性差異(P0.01),肺腺癌與轉移癌之間存在顯著性差異(P0.05)。正常肺組織中miR-21呈現(xiàn)低表達,肺腺癌組織中miR-21呈現(xiàn)高表達。4 CD3+、CD4+、CD8+淋巴細胞在腫瘤組織中的占比情況腫瘤組織中CD3+細胞數(shù)量占比在正常組織中為76.12%,癌旁組與正常組比較,沒有明顯改變,腺癌組則出現(xiàn)明顯降低;CD4+細胞數(shù)量占比在正常組中為45.17%,癌旁和腺癌組均低于正常組,具有顯著性差異P0.05;CD8+細胞數(shù)量在正常組中為28.78%,腺癌組高于正常組,具有顯著性差異P0.05。結論肺腺癌的發(fā)生與演進可能與miR-21升高以及體內免疫功能紊亂有關。
[Abstract]:BACKGROUND The pathogenesis of lung cancer is still unknown, which is one of the causes of poor clinical prevention and treatment of lung cancer. Lung cancer has become a major dangerous disease endangering people's health. Signal transducers and activators of transcription (STAT) are many growth factors and thin cells in organisms. MicroRNA21 (microRNA21) is a non-coding small molecule RNA involved in the body's growth, metabolism, development and disease, and is associated with the occurrence, development, invasion and metastasis of a variety of tumors. The relationship between signal transduction among members of STAT family is becoming more and more interrelated, especially the interaction mechanism between microRNAs-21 and STAT3 signaling pathways is widely recognized. What is the significance of the Mi R-21/STAT3 signaling pathway in the development of lung cancer and the effect on T lymphocyte infiltration in the tumor environment? In this study, the expression of STAT3 and microRNA-21 in human lung adenocarcinoma was detected by quantitative real-time polymerase chain reaction (q RT-PCR), and the immersion of T4 and T8 cells in lung adenocarcinoma was detected by immunohistochemistry. Objective To investigate the relationship between the expression of STAT3 and microRNAs-21 in lung adenocarcinoma and the development of lung adenocarcinoma and the infiltration of T cells. Methods From June 2013 to June 2015, 46 specimens were collected from the Department of Laboratory Pathology, 91 Central Hospital of PLA, Department of Pathology, Jiaozuo People's Hospital, Henan Province. Lung adenocarcinoma tissues and paracancerous tissues, including 34 cases of metastatic carcinoma and 12 cases of normal lung tissues as negative control. The lung adenocarcinoma tissues, paracancerous tissues (about 2-5 cm away from the margin of the tumor tissue) and normal lung tissues were fresh tissue specimens and stored in refrigerator or liquid nitrogen at - 80 C. Lung adenocarcinoma tissues, paracancerous tissues The specimens collected did not include patients with lung adenocarcinoma who had undergone chemotherapy before operation or patients with recurrent lung adenocarcinoma. Results 1 46 cases of lung adenocarcinoma tissues were collected by routine pathological diagnosis, including 34 cases of lymph node metastatic carcinoma, 12 cases of normal lung tissues as control. All tissues were pathologically diagnosed. 2 STAT3 mRNA expression was detected by Q RT-PCR. The results of AT3 mRNA expression in the above tissues were as follows: normal lung tissue was 0.319+0.015; paracancerous tissue was 0.631+0.020; lung adenocarcinoma tissue was 1.046+0.042; metastatic cancer tissue was 1.235+0.015. There were significant differences in gene expression between normal lung tissue, para-lung cancer tissue, lung adenocarcinoma tissue and metastatic cancer tissue (P 0.01). The expression of STAT3 gene in lung adenocarcinoma was significantly higher than that in normal and adjacent tissues (P 0.01). 3 The expression of microRNA-21 in lung adenocarcinoma and normal lung tissues was detected by qRT-PCR. The results showed that the expression of microRNA-21 in all kinds of tissues in normal group was 0.0018 (+0.001). There were significant differences between normal lung tissues and lung adenocarcinoma tissues (P 0.01). There were significant differences between lung adenocarcinoma and metastatic carcinoma tissues (P 0.05). The expression of microRNA-21 in normal lung tissues was low, and that in lung adenocarcinoma tissues was high (P 0.05). The proportion of CD3 +, CD4 +, CD8 + lymphocytes in tumor tissues was 76.12% in normal tissues. The number of CD3 + cells in tumor tissues was 76.12% in paracancerous group and normal group. There was no significant change in paracancerous group, but the number of CD4 + cells in adenocarcinoma group was significantly decreased. The proportion of CD4 + cells in normal group was 45.17%, and that in paracancerous and adenocarcinoma group was lower than normal group. The number of CD8 + cells in normal group was 28.78%, and that in adenocarcinoma group was higher than that in normal group, P 0.05. Conclusion The occurrence and evolution of lung adenocarcinoma may be related to the increase of microRNA-21 and the disturbance of immune function in vivo.
【學位授予單位】:新鄉(xiāng)醫(yī)學院
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2016
【分類號】:R734.2

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