【摘要】：目的探討腫瘤轉(zhuǎn)移抑制因子kisspeptin(KISS-1)在胃腺癌組織中的表達(dá)及對(duì)胃腺癌細(xì)胞增殖、遷移能力的影響。方法實(shí)時(shí)定量PCR和Western blot法分別檢測(cè)50例胃腺癌組織和對(duì)應(yīng)的癌旁組織中kisspeptin的mRNA和蛋白水平。分別將kisspeptin小干擾RNA(kisspeptin-siRNA)和對(duì)照小RNA(control-siRNA)、kisspeptin過(guò)表達(dá)載體(p EGFP-N1-kisspeptin)和對(duì)照空載體(p EGFP-N1)轉(zhuǎn)染至MKN-45胃腺癌細(xì)胞中,培養(yǎng)48 h后,Western blot法檢測(cè)細(xì)胞中kisspeptin、基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)、MMP-2、β聯(lián)蛋白(β-catenin)、C-myc蛋白水平,MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖能力,細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移能力。用Wnt/β-catenin信號(hào)通路抑制劑FH535作用于胃腺癌細(xì)胞后,MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖、流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況。結(jié)果 Kisspeptin在胃腺癌組織中的表達(dá)水平明顯低于癌旁組織。與空載體組相比,過(guò)表達(dá)kisspeptin后,MKN-45細(xì)胞存活率和遷移率、MMP-9、MMP-2、β-catenin、C-myc水平均明顯降低;與control-siRNA組細(xì)胞相比,敲低kisspeptin水平后,細(xì)胞存活率和遷移率、MMP-9、MMP-2、β-catenin、C-myc水平明顯增加。FH535處理后的胃腺癌細(xì)胞增殖、遷移趨勢(shì)與過(guò)表達(dá)kisspeptin細(xì)胞一致。結(jié)論Kisspeptin在胃腺癌組織中低表達(dá),kisspeptin通過(guò)Wnt/β-catenin信號(hào)通路抑制胃腺癌細(xì)胞增殖遷移能力。
[Abstract]:Objective to investigate the expression of tumor metastasis inhibitor kisspeptin (KISS-1) in gastric adenocarcinoma and its effect on the proliferation and migration of gastric adenocarcinoma cells. Methods Real-time quantitative PCR and Western blot were used to detect the mRNA and protein levels of kisspeptin in 50 gastric adenocarcinoma tissues and corresponding paracancerous tissues. Kisspeptin small interfering RNA (kisspeptin-siRNA), control small RNA (control-siRNA) kisspeptin overexpression vector (p EGFP-N1-kisspeptin) and control empty vector (p EGFP-N1) were transfected into MKN-45 gastric adenocarcinoma cells, respectively. After 48 h culture, kisspeptinin, matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) MMP-2, 尾 -catenin and C-myc protein levels were detected by Western blot assay, and cell migration was detected by cell scratch assay. Wnt/ 尾 -catenin signaling pathway inhibitor FH535 was used to detect the proliferation of gastric adenocarcinoma cells and apoptosis by flow cytometry. Results the expression of Kisspeptin in gastric adenocarcinoma was significantly lower than that in paracancerous tissues. Compared with empty vector group, the survival rate and mobility of MKN-45 cells were significantly lower than those of empty vector group, and the levels of MMP-9, MMP-2, 尾 -cateninine C-myc were significantly decreased after overexpression of kisspeptin, and the survival rate and mobility of MMP-9, MMP-2 and 尾 -cateninine C-myc were significantly increased after treatment with .FH535 compared with those in control-siRNA group. The migration trend was consistent with overexpression of kisspeptin cells. Conclusion the low expression of Kisspeptin in gastric adenocarcinoma inhibits the proliferation and migration of gastric adenocarcinoma cells through Wnt/ 尾 -catenin signaling pathway.
【作者單位】： 河北醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院病理科;河北醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院骨科;
【基金】：河北省衛(wèi)計(jì)委青年科技課題(20150642)
【分類號(hào)】：R735.2

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本文編號(hào)：2144809