【摘要】：第一部分長(zhǎng)鏈非編碼RNA對(duì)肝癌干細(xì)胞的調(diào)控作用及分子機(jī)制研究背景和目的肝癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)是全球范圍內(nèi)最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一,每年有超過(guò)700,000例病人被確診為肝癌,而這一數(shù)字仍呈現(xiàn)上升態(tài)勢(shì)。雖然近年來(lái)肝癌的預(yù)防、診斷和治療水平有了長(zhǎng)足的進(jìn)步,但由于肝癌發(fā)病機(jī)制十分復(fù)雜,治療效果仍然不理想。早期發(fā)現(xiàn)的肝癌病人,可以采取手術(shù)切除的治療方法,而大部分患者在確診時(shí)已經(jīng)處于中晚期,失去了手術(shù)機(jī)會(huì),只能采取化療或靶向治療等方法。肝癌對(duì)化療并不敏感,而索拉非尼的靶向治療效果也非常有限,使得肝癌預(yù)后差、復(fù)發(fā)高的現(xiàn)狀并沒(méi)有根本改觀。因此,尋找可靠有效的肝癌治療新靶點(diǎn)已迫在眉睫。隨著腫瘤研究的深入,科學(xué)家發(fā)現(xiàn)腫瘤組織是由處于不同分化階段的細(xì)胞組成的,其中存在極少量具有自我更新能力和多向分化潛能的細(xì)胞,被稱為“腫瘤干細(xì)胞”(cancer stem cells,CSCs)。目前,在白血病、膠質(zhì)瘤、乳腺癌、肺癌和結(jié)腸癌等多種腫瘤中均發(fā)現(xiàn)了CSCs的存在。有研究證實(shí),在肝癌中也存在肝癌干細(xì)胞(liver cancer stem cells,LCSCs),并可以利用CD133、CD90、Ep CAM、OV6和CD24等表面標(biāo)志物鑒定。LCSCs被認(rèn)為是肝癌發(fā)生發(fā)展、復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移和耐藥的根源,靶向LCSCs已經(jīng)成為肝癌治療的熱點(diǎn)和新方向。但LCSCs的調(diào)控機(jī)制目前仍十分不清楚,闡明LCSCs的調(diào)控機(jī)制對(duì)了解肝癌的發(fā)病機(jī)理和尋找新的治療策略具有十分重要的作用。長(zhǎng)鏈非編碼RNA(long noncoding RNA,lnc RNA)是指長(zhǎng)度大于200 nt,開放閱讀編碼框短于50~100 nt的RNA,具有m RNA樣結(jié)構(gòu),部分lnc RNA經(jīng)過(guò)剪切加工可以產(chǎn)生poly A尾,其表達(dá)具有時(shí)間特異性和空間特異性。lnc RNA在真核生物中廣泛存在,參與了多種生理、病理過(guò)程的調(diào)節(jié)。已有研究顯示,在肝癌中存在多種lnc RNA的表達(dá)改變,比如lnc RNA MVIH、MALAT-1、HULC和H19等,這些lnc RNA通過(guò)不同方式調(diào)控基因表達(dá),參與了肝癌的發(fā)生發(fā)展。LCSCs在肝癌的發(fā)生發(fā)展、復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移和化療耐藥中都發(fā)揮了關(guān)鍵作用,但目前l(fā)nc RNA在LCSCs中的調(diào)控作用研究仍處于起步階段,需要進(jìn)行更全面更深入的探索。深入探究lnc RNA在LCSCs調(diào)控中的生物學(xué)作用及分子機(jī)制,必然會(huì)為尋找肝癌新的預(yù)后判定標(biāo)志物及治療靶點(diǎn)帶來(lái)新方向和新希望。本課題擬通過(guò)高通量的lnc RNA芯片結(jié)合經(jīng)典的分子生物學(xué)篩選出LCSCs特異性lnc RNA,并結(jié)合體外、體內(nèi)實(shí)驗(yàn)探明其對(duì)LCSCs的調(diào)控作用;進(jìn)一步從腫瘤干細(xì)胞調(diào)控網(wǎng)絡(luò)入手,結(jié)合lnc RNA獨(dú)特的作用方式,尋找其作用靶點(diǎn)和調(diào)控的信號(hào)通路,進(jìn)而闡明其調(diào)控LCSCs的分子機(jī)制;開展臨床相關(guān)研究,分析lnc RNA與肝癌臨床病理及患者預(yù)后的相關(guān)性,探討其作為肝癌預(yù)后判定標(biāo)志物及治療靶點(diǎn)的可行性。希望通過(guò)本課題的實(shí)施,為肝癌的診療提供新思路和新靶標(biāo)。研究方法1.肝癌干細(xì)胞特異性lnc RNA的篩選鑒定:(1)利用多種肝癌細(xì)胞系富集LCSCs,進(jìn)行高通量lnc RNA芯片和m RNA芯片檢測(cè),通過(guò)生物信息學(xué)分析進(jìn)行分層聚類,并構(gòu)建基因共表達(dá)網(wǎng)絡(luò),篩選得到感興趣的LCSCs特異性lnc RNA(lnc-DILC)。(2)在利用多種分選技術(shù)從多種細(xì)胞系中富集的LCSCs樣本中,通過(guò)real-time PCR技術(shù)驗(yàn)證lnc-DILC的表達(dá)。(3)通過(guò)5’及3’c DNA末端快速擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)確定lnc-DILC的轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)和終止位點(diǎn),并獲得lnc-DILC全長(zhǎng)序列。(4)克隆并構(gòu)建含增加ATG密碼子的lnc-DILC全長(zhǎng)的表達(dá)質(zhì)粒,并通過(guò)western blot實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證lnc-DILC的蛋白編碼能力。2.lnc-DILC調(diào)控肝癌干細(xì)胞生物學(xué)作用的研究:(1)利用慢病毒建立穩(wěn)定干擾/過(guò)表達(dá)lnc-DILC的肝癌細(xì)胞系。(2)采用上述細(xì)胞系通過(guò)低粘附成球培養(yǎng)富集LCSCs,進(jìn)行LCSCs特異性標(biāo)志物檢測(cè)、干性相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)檢測(cè)和成球?qū)嶒?yàn)等實(shí)驗(yàn),明確lnc-DILC對(duì)LCSCs的調(diào)控作用。(3)采用NOD-SCID小鼠體內(nèi)有限稀釋實(shí)驗(yàn)及皮下荷瘤實(shí)驗(yàn),檢測(cè)lnc-DILC對(duì)LCSCs在小鼠體內(nèi)成瘤性和腫瘤生長(zhǎng)的影響。(4)利用特異針對(duì)lnc-DILC的si RNAs重復(fù)上述實(shí)驗(yàn),驗(yàn)證lnc-DILC調(diào)控LCSCs的生物學(xué)作用。3.lnc-DILC的作用機(jī)制探究:(1)利用干擾lnc-DILC的肝癌細(xì)胞系通過(guò)成球培養(yǎng)富集LCSCs后,進(jìn)行干細(xì)胞相關(guān)信號(hào)通路PCR芯片檢測(cè),篩選LCSCs中受lnc-DILC調(diào)控的干細(xì)胞相關(guān)信號(hào)通路。(2)通過(guò)western blot、報(bào)告基因檢測(cè)、細(xì)胞免疫熒光和免疫組化染色實(shí)驗(yàn),檢測(cè)干擾/過(guò)表達(dá)lnc-DILC細(xì)胞系中IL-6/STAT3信號(hào)通路的變化。(3)使用JAK2和STAT3的特異性抑制劑進(jìn)行成球?qū)嶒?yàn)和克隆形成實(shí)驗(yàn),明確lnc-DILC通過(guò)抑制IL-6/STAT3信號(hào)通路調(diào)控LCSCs擴(kuò)增。(4)通過(guò)real-time PCR和ELISA檢測(cè)干擾/過(guò)表達(dá)lnc-DILC系中IL-6表達(dá)和分泌水平的變化。(5)使用IL-6受體的競(jìng)爭(zhēng)性抗體進(jìn)行成球?qū)嶒?yàn)和克隆形成實(shí)驗(yàn),明確lnc-DILC通過(guò)抑制IL-6自分泌調(diào)控LCSCs擴(kuò)增。(6)將LM3細(xì)胞進(jìn)行核漿分離,抽提RNA后PCR檢測(cè)lnc-DILC的亞細(xì)胞定位。(7)通過(guò)IL-6啟動(dòng)子區(qū)序列分析和Biotin pull down實(shí)驗(yàn),檢測(cè)lnc-DILC直接結(jié)合IL-6啟動(dòng)子。(8)向干擾/過(guò)表達(dá)lnc-DILC的肝癌細(xì)胞系轉(zhuǎn)入lnc-DILC的mimics/decoy及突變體,進(jìn)行成球?qū)嶒?yàn),驗(yàn)證lnc-DILC與IL-6啟動(dòng)子的結(jié)合位點(diǎn),并證明lnc-DILC通過(guò)直接結(jié)合IL-6啟動(dòng)子抑制LCSCs擴(kuò)增。(9)采用特異針對(duì)lnc-DILC的si RNAs,驗(yàn)證lnc-DILC調(diào)控LCSCs的分子機(jī)制。4.檢測(cè)lnc-DILC在TNF-α/NF-κB與IL-6/STAT3兩條信號(hào)通路間的作用:(1)干擾lnc-DILC的細(xì)胞系給予TNF-α和IL-1β刺激,檢測(cè)IL-6的變化。(2)過(guò)表達(dá)lnc-DILC的細(xì)胞系給予TNF-α和IL-1β刺激,檢測(cè)IL-6的變化。5.lnc-DILC的臨床相關(guān)研究:(1)通過(guò)real-time PCR檢測(cè)lnc-DILC在癌旁和肝癌組織中的表達(dá)水平。(2)分離原代肝癌細(xì)胞,成球富集原代LCSCs,檢測(cè)lnc-DILC在原代LCSCs中的表達(dá)情況,并分析lnc-DILC與Ep CAM、CD24等LCSC標(biāo)志物的相關(guān)性。(3)利用原代肝癌組織,分析lnc-DILC與患者預(yù)后的關(guān)系,探討lnc-DILC作為肝癌預(yù)后判定標(biāo)志物的可行性。研究結(jié)果1.lnc-DILC在LCSCs中表達(dá)特異性降低。2.lnc-DILC全長(zhǎng)2394 nt,不能編碼產(chǎn)生蛋白。3.干擾lnc-DILC可促進(jìn)LCSCs的擴(kuò)增,而過(guò)表達(dá)lnc-DILC則抑制LCSCs的擴(kuò)增。4.小鼠體內(nèi)實(shí)驗(yàn)證實(shí)lnc-DILC可抑制LCSCs的成瘤性及小鼠皮下荷瘤的生長(zhǎng)。5.在LCSCs中l(wèi)nc-DILC調(diào)控JAK2/STAT3信號(hào)通路。6.JAK2和STAT3的特異性抑制劑均可消除lnc-DILC對(duì)LCSCs的調(diào)控作用。7.lnc-DILC通過(guò)調(diào)控IL-6的表達(dá)及自分泌抑制LCSCs的擴(kuò)增。8.IL-6受體的競(jìng)爭(zhēng)性抗體可消除lnc-DILC對(duì)LCSCs的調(diào)控作用。9.lnc-DILC通過(guò)序列互補(bǔ)結(jié)合IL-6啟動(dòng)子。10.lnc-DILC mimics及其decoy均可以消除lnc-DILC對(duì)LCSCs的調(diào)控作用。11.lnc-DILC可能通過(guò)與NF-κB競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合IL-6啟動(dòng)子,抑制TNF-α和IL-1β對(duì)IL-6表達(dá)的誘導(dǎo)。12.lnc-DILC在原代肝癌干細(xì)胞球中表達(dá)降低。13.在原代肝癌干細(xì)胞球中,lnc-DILC與LCSCs表面標(biāo)志物Ep CAM、CD24、CD133、CD90的表達(dá)呈較強(qiáng)的負(fù)相關(guān)。14.臨床研究表明,lnc-DILC低表達(dá)的肝癌患者明顯比lnc-DILC高表達(dá)的肝癌患者預(yù)后差。15.多因素分析結(jié)果顯示lnc-DILC是影響肝癌患者生存期的獨(dú)立風(fēng)險(xiǎn)因素。結(jié)論本研究發(fā)現(xiàn)了首個(gè)在肝癌干細(xì)胞中表達(dá)降低并具有負(fù)調(diào)控作用的lnc RNA,命名為lnc-DILC,并證實(shí)lnc-DILC通過(guò)結(jié)合IL-6的啟動(dòng)子,調(diào)控IL-6/STAT3自分泌信號(hào)通路,抑制肝癌干細(xì)胞的擴(kuò)增。我們還發(fā)現(xiàn)lnc-DILC可以調(diào)節(jié)TNF-α/NF-κB和IL-6/STAT3信號(hào)通路間的crosstalk,將肝臟炎癥與肝癌干細(xì)胞有機(jī)的聯(lián)結(jié)起來(lái)。臨床相關(guān)研究顯示lnc-DILC低表達(dá)的肝癌患者明顯比lnc-DILC高表達(dá)的肝癌患者預(yù)后差。這些研究結(jié)果為肝癌干細(xì)胞的調(diào)控機(jī)制和lnc RNA的功能提供了新的理論,也為lnc RNA作為新的肝癌預(yù)后標(biāo)志物和治療靶點(diǎn)提供了有力證據(jù)。第二部分Shp2激活β-catenin信號(hào)通路促進(jìn)肝癌干細(xì)胞擴(kuò)增研究背景和目的肝癌是世界范圍內(nèi)第六大惡性腫瘤,其死亡率居世界第二位。盡管近年來(lái)肝癌的診療技術(shù)不斷發(fā)展,但其早期診斷率低的現(xiàn)狀沒(méi)有根本改觀,相當(dāng)一部分患者在確診時(shí)已經(jīng)失去手術(shù)機(jī)會(huì),只能采取肝動(dòng)脈化療栓塞(transcatheter arterial chemoembolization,TACE)或分子靶向治療等。但是,肝癌對(duì)常規(guī)化療方法很不敏感,療效極差。對(duì)于術(shù)后患者而言,肝癌的復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移率依然居高不下。所以深入研究肝癌復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移和化療耐藥的機(jī)制,尋找新的治療靶點(diǎn)和干預(yù)策略非常重要。肝癌干細(xì)胞(liver cancer stem cells,LCSCs)具有自我更新能力和多向分化的特性,不但影響肝癌的發(fā)生發(fā)展,也是肝癌復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移和化療耐藥的根源。但LCSCs的調(diào)控機(jī)制目前仍不清楚,這既是以LCSCs為靶標(biāo)抑制肝癌復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移和化療耐藥的瓶頸,也是目前肝癌研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)和重大科學(xué)問(wèn)題。Shp2屬于非受體型蛋白酪氨酸磷酸酶,由PTPN11基因編碼,含有2個(gè)SH2(Src-homology2)結(jié)構(gòu)域。細(xì)胞內(nèi)蛋白酪氨酸磷酸酶在細(xì)胞增殖中往往發(fā)揮負(fù)向調(diào)控作用,而不同的是,Shp2可以促進(jìn)細(xì)胞生存和生長(zhǎng)。有研究發(fā)現(xiàn)細(xì)胞受到細(xì)胞因子等增殖信號(hào)刺激后,胞內(nèi)ERK信號(hào)通路的完全活化必須依賴Shp2。我們科室和國(guó)外合作單位前期建立了Shp2肝細(xì)胞特異性敲除的小鼠,卻發(fā)現(xiàn)Shp2敲除可以促進(jìn)DEN誘導(dǎo)的肝癌發(fā)生。然而我們最近的研究發(fā)現(xiàn)在大部分肝癌組織中Shp2表達(dá)升高且與肝癌的分化、轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。進(jìn)一步研究證實(shí)Shp2通過(guò)激活Ras/Raf/Erk和PI3-K/Akt/m TOR信號(hào)通路促進(jìn)肝癌細(xì)胞的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移。事實(shí)上,像Shp2、JNK、STAT3、β-catenin等原癌基因在肝細(xì)胞內(nèi)發(fā)揮了促生存的作用,因此在肝細(xì)胞特異性敲除這些分子后會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡和繼發(fā)性炎癥,最終促進(jìn)肝癌的發(fā)生。Shp2在LCSCs中的調(diào)控作用目前仍不清楚,本課題擬結(jié)合體外、體內(nèi)實(shí)驗(yàn)探明Shp2在LCSCs中的生物學(xué)作用;進(jìn)一步采用報(bào)告基因、免疫共沉淀等手段,分析Shp2對(duì)β-catenin信號(hào)通路的調(diào)控作用,尋找其直接作用靶點(diǎn),進(jìn)而闡明Shp2調(diào)控LCSCs的分子機(jī)制;開展臨床相關(guān)研究,分析Shp2與肝癌患者對(duì)術(shù)后TACE治療反應(yīng)性的關(guān)系,探討其作為肝癌治療靶點(diǎn)及肝癌個(gè)體化治療標(biāo)志物的可行性。希望通過(guò)本課題的實(shí)施,為肝癌的診療提供新思路和新靶標(biāo)。研究方法1.分析Shp2與肝癌化療抵抗和復(fù)發(fā)的關(guān)系:(1)利用real-time PCR和免疫組化技術(shù),檢測(cè)化療抵抗肝癌移植瘤中Shp2的表達(dá)。(2)利用免疫組化技術(shù)檢測(cè)肝癌原發(fā)組織與復(fù)發(fā)組織中Shp2的表達(dá)。(3)根據(jù)免疫組化染色評(píng)分,分析病人肝癌組織中Shp2的表達(dá)與肝癌復(fù)發(fā)的關(guān)系。2.檢測(cè)Shp2在肝癌干細(xì)胞中的表達(dá)及生物學(xué)作用:(1)在利用多種分選技術(shù)從多種細(xì)胞系中富集的LCSCs樣本中,通過(guò)real-time PCR技術(shù)檢測(cè)Shp2的表達(dá)。(2)在原代LCSCs中檢測(cè)Shp2的表達(dá),并分析Shp2與LCSCs表面標(biāo)志物和干性相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)相關(guān)性。(3)采用干擾Shp2細(xì)胞系,通過(guò)LCSCs標(biāo)志物檢測(cè)、成球?qū)嶒?yàn)和化療藥敏感性等實(shí)驗(yàn),明確Shp2對(duì)LCSCs的調(diào)控作用。(4)通過(guò)體外有限稀釋和體內(nèi)有限稀釋實(shí)驗(yàn),檢測(cè)Shp2對(duì)LCSCs比例及成瘤性的影響。3.Shp2的作用機(jī)制探究:(1)檢測(cè)HGDNs樣本及原代肝癌組織樣本中Shp2的表達(dá),分析與肝癌分化的關(guān)系。(2)利用real-time PCR,檢測(cè)干擾Shp2細(xì)胞系與對(duì)照細(xì)胞系中肝細(xì)胞特異表達(dá)基因與干性相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)。(3)通過(guò)核漿分離、報(bào)告基因、real-time PCR實(shí)驗(yàn),檢測(cè)Shp2對(duì)β-catenin入核和活化的調(diào)控。(4)通過(guò)western blot、免疫共沉淀實(shí)驗(yàn),明確Shp2在肝癌細(xì)胞和LCSCs中調(diào)控β-catenin信號(hào)通路的分子機(jī)制。(5)使用FH535抑制β-catenin活性,通過(guò)LCSCs表面標(biāo)志物檢測(cè)和成球?qū)嶒?yàn),明確Shp2通過(guò)激活β-catenin調(diào)控LCSCs擴(kuò)增。4.Shp2在肝癌病人個(gè)體化治療中的應(yīng)用研究:在原代肝癌組織中分析Shp2表達(dá)與病人對(duì)術(shù)后TACE治療反應(yīng)性的關(guān)系。研究結(jié)果1.Shp2在化療抵抗肝癌移植瘤中表達(dá)升高。2.與肝癌原發(fā)組織性比,Shp2在肝癌復(fù)發(fā)組織表達(dá)增加,與肝癌復(fù)發(fā)相關(guān)。3.Shp2在LCSCs中表達(dá)特異性升高。4.體外研究發(fā)現(xiàn)干擾Shp2抑制LCSCs的自我更新和擴(kuò)增。5.體內(nèi)有限稀釋實(shí)驗(yàn)證實(shí)干擾Shp2可抑制肝癌細(xì)胞的體內(nèi)成瘤性。6.Shp2的表達(dá)與肝癌組織分化程度相關(guān)。7.在肝癌細(xì)胞中,Shp2通過(guò)抑制CDC73磷酸化激活β-catenin,促進(jìn)肝癌細(xì)胞去分化。8.在LCSCs中Shp2通過(guò)促進(jìn)GSK3βSer9磷酸化,穩(wěn)定β-catenin蛋白,促進(jìn)LCSCs自我更新。9.FH535阻斷β-catenin信號(hào)通路,可抑制Shp2對(duì)LCSCs擴(kuò)增的調(diào)控。10.Shp2低表達(dá)的患者對(duì)術(shù)后TACE治療反應(yīng)性更好。結(jié)論在本研究中我們發(fā)現(xiàn)Shp2在肝癌細(xì)胞和LCSC中通過(guò)不同的分子機(jī)制激活β-catenin信號(hào)通路,促進(jìn)LCSC的擴(kuò)增。在肝癌細(xì)胞中,Shp2通過(guò)抑制CDC73的磷酸化激活β-catenin,促進(jìn)細(xì)胞發(fā)生去分化;而在LCSC中,Shp2通過(guò)GSK3βSer9的磷酸化抑制β-catenin的蛋白降解,從而促進(jìn)LCSC的自我更新。臨床相關(guān)研究還發(fā)現(xiàn)肝癌組織中Shp2的表達(dá)水平與病人對(duì)術(shù)后TACE治療的反應(yīng)性相關(guān),提示其可能可以作為肝癌個(gè)體化治療的標(biāo)志物。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：第二軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R735.7

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3 殷勝勇;陳新華;胡晨;;CD133陽(yáng)性肝癌干細(xì)胞在肝癌肝移植術(shù)后腫瘤復(fù)發(fā)中的作用及納秒脈沖進(jìn)行干預(yù)的初步實(shí)驗(yàn)研究[A];2013中國(guó)器官移植大會(huì)論文匯編[C];2013年

4 杜智;宋文芹;張世光;高英堂;朱爭(zhēng)艷;王毅軍;只丹琮;;人原發(fā)性肝癌細(xì)胞建系及其生物學(xué)特性的初步鑒定[A];天津市生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)會(huì)2007年學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2007年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前1條

1 本報(bào)記者 王雪敏;肝癌干細(xì)胞及其分化治療[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2010年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 雷增杰;組蛋白去甲基化酶LSD1促進(jìn)腫瘤細(xì)胞“干性”和侵襲轉(zhuǎn)移的機(jī)制研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

2 張克志;三氧化二砷抑制GLI1表達(dá)誘導(dǎo)肝癌干細(xì)胞分化延長(zhǎng)術(shù)后生存期的實(shí)驗(yàn)研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

3 劉輝琦;肝癌干細(xì)胞相關(guān)功能性基因的研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2015年

4 戎曉祥;CIK細(xì)胞對(duì)肝癌干細(xì)胞的殺傷作用及其相關(guān)機(jī)制研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2015年

5 朱平平;肝癌干細(xì)胞相關(guān)基因和長(zhǎng)鏈非編碼RNA調(diào)控自我更新的分子機(jī)制研究[D];中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué);2016年

6 羅勇利;Nanog~-非肝癌干細(xì)胞維持Nanog~+肝癌干細(xì)胞自我更新作用的分子機(jī)制研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2016年

7 劉春剛;Sox9調(diào)控肝癌干細(xì)胞對(duì)稱非對(duì)稱分裂影響自我更新及腫瘤發(fā)生的研究[D];浙江大學(xué);2016年

8 劉顏敏;超聲靶向微泡介導(dǎo)CD133-shRNA轉(zhuǎn)染對(duì)CD133~+肝癌干細(xì)胞生物學(xué)特性及上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的影響[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2016年

9 朱新鋒;全反式維甲酸誘導(dǎo)分化肝癌干細(xì)胞作用研究[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2016年

10 王雪;長(zhǎng)鏈非編碼RNA對(duì)肝癌干細(xì)胞的調(diào)控作用及分子機(jī)制[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2016年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 王璐;抑瘤素M與鹽霉素聯(lián)用對(duì)肝癌干細(xì)胞作用的研究[D];吉林大學(xué);2016年

2 陸世東;CD90陽(yáng)性細(xì)胞篩選及PI3K/AKT通路對(duì)其干細(xì)胞樣特性影響的初步研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2016年

3 楊帥;基于耐藥和單細(xì)胞全克隆構(gòu)建肝癌干細(xì)胞體外富集模式的實(shí)驗(yàn)研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2016年

4 何永燕;抗人肝癌干細(xì)胞功能性單抗的研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2016年

5 楊婧;肝癌干細(xì)胞靶向治療的研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2016年

6 曹璐;球培養(yǎng)法富集肝癌干細(xì)胞樣亞群及其特征鑒定[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2010年

7 楊軍;肝癌干細(xì)胞特異性標(biāo)志物的實(shí)驗(yàn)研究及其臨床病理聯(lián)系[D];中南大學(xué);2009年

8 常文娟;低劑量順鉑富集肝癌干細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2011年

9 容雁;抗人肝癌干細(xì)胞功能性單抗的研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2012年

10 陶璐;基于腫瘤耐藥特性構(gòu)建肝癌干細(xì)胞富集模式的實(shí)驗(yàn)研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2012年

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本文編號(hào)：2140600