本文選題：上皮性卵巢癌 + 腫瘤干細胞��； 參考：《河北醫(yī)科大學》2016年博士論文

【摘要】：目的:上皮性卵巢癌(Epithelia ovarian cancer,以下簡稱卵巢癌)是嚴重威脅廣大婦女健康的婦科惡性腫瘤之一。由于該疾病早期臨床癥狀不明顯,多數(shù)患者發(fā)現(xiàn)時已處晚期。雖然經(jīng)過規(guī)范的腫瘤細胞減滅術以及術后輔以鉑類為主的藥物聯(lián)合化療能夠改善患者預后,但是由于其較易發(fā)生侵襲轉(zhuǎn)移和腫瘤復發(fā),嚴重影響患者的生活質(zhì)量。因此,對卵巢癌的發(fā)病、復發(fā)以及耐藥機制做深入的研究已成為婦科惡性腫瘤研究領域的難點與熱點問題。腫瘤干細胞(cancer stem cells,CSCs)是一類可復制或者再生的腫瘤細胞,數(shù)量較少,具有無限增殖、自我更新、高致瘤性等特點,可成功地進行異種移植并呈現(xiàn)與原腫瘤相同的具有異質(zhì)性的細胞表面標志物或表型。CSCs在腫瘤的發(fā)生、侵襲轉(zhuǎn)移以及腫瘤復發(fā)、化療耐藥中起至關重要的作用。目前用于CSCs研究的的腫瘤干細胞標記分子有CD133、CD117、CD24、CD44和乙醛脫氫酶(acetaldehyde dehydrogenase,ALDH)等。因卵巢癌CSCs至今尚未分離鑒定,我們將此種具有CSCs生物學特性的卵巢癌細胞稱之為腫瘤干細胞樣細胞。血管生成擬態(tài)(Vasculogenic mimicry,VM)結(jié)構(gòu)自發(fā)現(xiàn)至今已有10多年的歷史。該結(jié)構(gòu)由經(jīng)過塑形的腫瘤細胞和能夠被過碘酸雪夫氏試劑(Periodic acid Schiff,PAS)染色陽性的物質(zhì)圍成管道樣結(jié)構(gòu),血液流淌其中,能夠為腫瘤的生長提供營養(yǎng)。VM是腫瘤血液供應除血管外的另一重要結(jié)構(gòu)。研究發(fā)現(xiàn)VM與眾多惡性腫瘤預后密切相關。CSCs不僅參與血管的發(fā)生,還可能通過諸如信號轉(zhuǎn)導通路使腫瘤干細胞的塑形、橫向分化等,參與惡性腫瘤VM的形成,共同影響腫瘤的發(fā)生、侵襲以及轉(zhuǎn)移。本研究第一部分收集術后隨訪資料完整的卵巢癌患者石蠟標本120例,采用CD31/過碘酸雪夫氏試劑(Periodic acid Schiff,PAS)雙重染色法鑒定VM結(jié)構(gòu);采用免疫組織化學SP法檢測CD133的表達�；仡櫺苑治鯟D133、VM與卵巢癌患者臨床病理資料的關系及二者對患者生存時間的影響。探討cd133、vm在上皮性卵巢癌中的表達及其與臨床病理特征和患者預后的關系。第二部分采用無血清懸浮培養(yǎng)法培養(yǎng)人卵巢癌skov3細胞,分離獲得懸浮生長的細胞球,經(jīng)過傳代培養(yǎng)觀察其生物學特性及此類細胞的形態(tài)學變化。采用流式細胞儀檢測第1、3、5、7代分選細胞cd133陽性細胞比例,采用平板克隆形成實驗和小鼠體內(nèi)成瘤實驗鑒定第7代分選細胞生物學特性;通過matrigel三維立體培養(yǎng)比較第7代分選細胞與親代skov3細胞的vm形成能力,采用rt-pcr的方法,檢測第7代分選細胞與親代skov3細胞的vm形成關鍵因子基質(zhì)金屬蛋白酶2,9(matrixmetalloproteinases-2,9,mmp-2,mmp-9)含量的差異性,初步探討卵巢癌干細胞樣細胞在vm形成機制中的作用。第三部分將無血清懸浮培養(yǎng)的第7代分選細胞接種于裸鼠,建立卵巢癌移植瘤模型,分別給予順鉑(cisplatin,ddp)最大耐受劑量化療(mtd-ddp)和低劑量節(jié)拍化療(ldm-ddp)。采用cd31/pas雙重染色法鑒定卵巢癌組織中vm的結(jié)構(gòu),顯微鏡下分別計數(shù)vm和微血管數(shù)量,比較其差異性。采用western-blot方法檢測兩種化療方式裸鼠皮下移植瘤組織中vm信號通路上皮細胞激酶(epithelialcellkinase,epha2)、磷脂酰肌醇3-激酶(phosphoinositide-3-kinase,pi3k)、層黏連蛋白-5γ2鏈(laminin-5γ2,ln-5γ2)表達的差異性。分析兩種化療方式對于裸鼠移植瘤模型vm及微血管形成的影響,初步探討mtd-ddp與ldm-ddp對于vmepha2信號通路的影響,為卵巢癌的靶向治療提供新的臨床思路。第一部分腫瘤干細胞標志物cd133在上皮性卵巢癌血管生成擬態(tài)中的表達及意義方法:收集術后隨訪資料完整的上皮性卵巢癌患者石蠟標本120例,采用cd31/pas雙重染色法鑒定卵巢癌組織中vm的結(jié)構(gòu);采用免疫組織化學sp法檢測cd133的表達�；仡櫺苑治鯿d133表達、vm形成與患者臨床病理資料的關系,以及cd133表達和vm形成對患者生存時間的影響。結(jié)果:1120例上皮性卵巢癌患者的臨床病理資料特點120例上皮性卵巢癌患者中,小于60歲的患者為78例(65.0%),大于等于60歲患者為42例(35.0%);按組織學分類分為漿液性癌74例(61.7%),黏液性癌35例(29.2%),子宮內(nèi)膜樣癌11例(9.1%);按照figo(2009年)手術-病理分期:i期28例(23.3%),Ⅱ期10例(8.3%),iii期60例(50.0%),iv期22例(18.4%);按照組織分化程度:高分化(g1)17例(14.2%),中分化(g2)59例(49.2%),低分化(g3)44例(36.6%);發(fā)生淋巴轉(zhuǎn)移者為51例(42.5%),無淋巴轉(zhuǎn)移者為69例(57.5%)。39例(32.5%)患者產(chǎn)生鉑類耐藥,81例(67.5%)患者為鉑敏感患者。2上皮性卵巢癌組織中vm結(jié)構(gòu)以及cd133的表達情況120例上皮性卵巢癌組織中,vm結(jié)構(gòu)陽性(vm+)為52例,占總數(shù)的43.3%,vm陰性(vm-)68例,占總數(shù)的56.7%。cd133表達陽性(cd133+)56例,占總數(shù)的46.7%,陰性(cd133-)64例,占總數(shù)的53.3%。其中,cd133+vm+38例,占總數(shù)的31.7%,cd133-vm+14例,占總數(shù)的11.7%,cd133+vm-18例,占總數(shù)的15.0%,cd117-vm-50例,占總數(shù)的41.6%。3上皮性卵巢癌組織中vm形成、cd133的表達與患者臨床病理資料的關系上皮性卵巢癌組織中vm的形成與患者的年齡、組織類型及淋巴結(jié)有無轉(zhuǎn)移均無關(χ2值分別為0.722、1.660和0.501,p值分別為0.395、0.436和0.479);vm的形成與卵巢癌手術-病理分期、組織分化程度及鉑類化療敏感性均密切相關,差異有統(tǒng)計學意義(χ2值分別為8.744、41.903和15.781,p值分別為0.003、0.001和0.001)。cd133的表達與卵巢癌患者的年齡、組織類型及淋巴結(jié)有無轉(zhuǎn)移均無關(χ2值分別為0.024、0.031和0.005,p值分別為0.878、0.985和0.941);其與手術-病理分期、組織分化程度及鉑類化療敏感性均明顯相關,差異有統(tǒng)計學意義(χ2值分別為8.744、19.944和10.690,p值分別為0.003、0.001和0.001)。4具有vm的上皮性卵巢癌組織中cd133表達與患者臨床病理資料的關系按cd133表達與vm形成的關系將120例卵巢癌患者分為cd133+vm+、cd133-vm+、cd133+vm-和cd133-vm-共4組。統(tǒng)計分析發(fā)現(xiàn),cd133在上皮性卵巢癌vm+組和vm-組的表達分別與年齡、組織類型及淋巴有無轉(zhuǎn)移均無關(χ2值分別為0.434、8.344及2.900,p值分別為0.933、0.214及0.407)。cd133在上皮性卵巢癌vm+組和vm-組的表達分別與手術-病理分期、組織分化程度及鉑類化療敏感性密切相關,差異有統(tǒng)計學意義(χ2值分別為14.683、51.577及25.533,p值分別為0.002、0.001及0.001)。在手術-病理分期較晚(iii~iv期)、組織分化程度較低(g3)以及鉑類耐藥的患者中cd133+vm+組比例明顯高于其他3組,差異均有統(tǒng)計學意義(p值0.05)。而cd133-vm+、cd133+vm-、cd133-vm-這3組患者比例在手術-病理分期、組織分化程度及化療敏感性方面均無明顯差異(p值0.05)。5上皮性卵巢癌中vm形成與cd133表達之間的關系sepearman相關分析顯示,上皮性卵巢癌組織中vm的形成與cd133的表達呈正相關關系(r=0.463,p≤0.001)。即在上皮性卵巢癌組織中,vm結(jié)構(gòu)陽性中cd133的表達率較vm結(jié)構(gòu)陰性者更高。6上皮性卵巢癌組織vm中cd133的表達與及患者生存率的關系120例卵巢癌患者術后進行隨訪,隨訪時間6月~72月。隨訪結(jié)果顯示58例刪失,死亡53例,死亡率為44.2%。按有無vm結(jié)構(gòu)繪制kaplan-meier曲線;分析顯示vm+組生存時間中位數(shù)為25.0個月,vm-組生存時間中位數(shù)為63.0個月,兩組患者的生存曲線分布差異有統(tǒng)計學意義(χ2=29.559,p0.001)。按cd133的表達繪制kaplan-meier曲線;分析顯示cd133+組生存時間中位數(shù)為25.0個月,vm-組生存時間中位數(shù)為63.0個月,兩組患者的生存曲線分布差異有統(tǒng)計學意義(χ2=25.408,p0.001)。進一步以cd133+vm+、cd133-vm+、cd133+vm-和cd133-vm-這4組繪制kaplan-meier曲線;經(jīng)log-rank檢驗結(jié)果顯示,各組生存時間存在差異性(χ2=51.941,p0.001),其中cd133+vm+組生存時間最短,為22.0個月。第二部分人卵巢癌skov3細胞分選出的腫瘤干細胞樣細胞在血管生成擬態(tài)形成中作用的初步探討方法:采用無血清懸浮培養(yǎng)法培養(yǎng)人卵巢癌skov3細胞,分離獲得懸浮生長的細胞球,經(jīng)過傳代培養(yǎng)觀察其生物學特性及此類細胞的形態(tài)學變化。采用流式細胞儀檢測第1、3、5、7代分選細胞cd133、cd117陽性細胞比例,采用平板克隆形成實驗和小鼠體內(nèi)成瘤實驗鑒定第7代分選細胞生物學特性;通過matrigel三維立體培養(yǎng)比較第7代分選細胞與親代skov3細胞的vm形成能力,采用rt-pcr的方法,檢測第7代分選細胞與親代skov3細胞的vm形成關鍵因子基質(zhì)金屬蛋白酶2,9(matrixmetalloproteinases-2,9,mmp-2,mmp-9)含量差異性。以上實驗均重復三次。結(jié)果:1采用無血清懸浮培養(yǎng)人卵巢癌skov3細胞的形態(tài)學觀察將skov3細胞接種于無血清培養(yǎng)基中,大部分沉積于培養(yǎng)板底,并有部分呈貼壁生長,初始形態(tài)各異,呈現(xiàn)圓形或者橢圓形,透明折光性較強,此后貼壁細胞逐漸增多,可形成細胞島樣結(jié)構(gòu),散布于培養(yǎng)瓶底部,有的細胞形成較為短小的偽足,折光性逐漸降低,24小時左右大部分skov3細胞死亡,僅小部分細胞存活并呈懸浮生長。2-4天后可見少量的懸浮細胞球形成,由3-8個細胞組成,外觀不規(guī)則,細胞大小一致,且結(jié)合較為松散,具有一定的折光性。5-7天后,懸浮球細胞數(shù)量增多達數(shù)十個,體積增大,呈現(xiàn)圓球狀外觀,細胞間連接緊密,界限不清,折光性增強。隨著細胞傳代,懸浮細胞球數(shù)量不斷增加,且體積不斷增大。2流式細胞儀檢測結(jié)果流式檢測結(jié)果表明cd133陽性和cd117陽性細胞在skov3球形體細胞親代skov3和每一代分選細胞中含量變化很大,親代skov3細胞cd133陽性細胞率為0.25%,cd117陽性細胞率為0.01%;而第1、3、5、7代分選細胞中的cd133陽性細胞率分別為40.41%、70.00%、84.69%和91.58%;cd117陽性細胞率分別為14.96%、25.14%、37.73%和49.58%,cd133和cd117陽性細胞率隨著分選細胞傳代次數(shù)的增加明顯呈上升趨勢。3克隆形成實驗無血清培養(yǎng)基中培養(yǎng)的第7代分選細胞和親代skov3細胞均具有克隆形成能力,第7代分選細胞的克隆形成率為50.33%,而親代skov3的克隆形成率為5.33%。第7代分選細胞與親代skov3細胞克隆形成率比較差異具有統(tǒng)計學意義(t=15.093,p0.001)。表明第7代分選細胞具有更強的克隆形成能力。4裸鼠體內(nèi)成瘤能力實驗采用無血清懸浮培養(yǎng)的第7代分選細胞和普通培養(yǎng)基培養(yǎng)的親代skov3細胞分別以不同的細胞密度注射于6只balb/c雌性裸鼠左、右側(cè)大腿皮下。結(jié)果顯示,接種第7代分選細胞的裸鼠右側(cè)大腿在3周左右即可觀察到腫瘤生長,而接種親代skov3細胞的裸鼠左側(cè)大腿在同一時期未觀察到腫瘤生長。至6周時,接種第7代分選細胞的裸鼠右側(cè)大腿均能見到腫瘤形成(6/6),成瘤率為100%,而接種親代skov3細胞的裸鼠始終左側(cè)大腿未見成瘤(0/6),成瘤率為0,懸浮細胞球比親代細胞更具成瘤能力。5分選細胞與親代skov3細胞形成vm的能力的比較matrigel基質(zhì)膠中,分選細胞在1.5h開始形成vm管狀結(jié)構(gòu),部分細胞伸長呈長梭形,形成突起,細胞間突起彼此連接,構(gòu)成網(wǎng)格狀。此后細胞間連接逐漸增多,管道縱橫交錯,連接緊密,4h后形成較為規(guī)則的網(wǎng)格狀結(jié)構(gòu),持續(xù)時間較長,至30h結(jié)構(gòu)方開始松散凋落;而skov3細胞于接種后3h才開始出現(xiàn)vm管狀結(jié)構(gòu),部分細胞亦產(chǎn)生突起,但與分選細胞相比,突起數(shù)量不多。細胞間連接形成緩慢,至6h后管狀樣結(jié)構(gòu)達最多,但規(guī)則的網(wǎng)格形成不多,細胞間連接不規(guī)則。6real-timepcr檢測第7代分選細胞和親代skov3細胞mmp2、mmp9的表達采用實時熒光定量pcr方法,以gapdh為內(nèi)參基因,對2條目的rna進行歸一化處理,分析親代skov3細胞與懸浮細胞球中mmp-2、mmp-9基因的表達水平。根據(jù)熔解曲線,在基因擴增過程中沒有明顯的引物二聚體形成,證明引物的特異性較好;根據(jù)擴增曲線,隨著循環(huán)數(shù)的增加熒光信號具有明顯的對數(shù)期,且擴增曲線平滑,檢測到的各目的基因rna的ct值在20-30之間,屬于正常檢測值范圍,其值可信。經(jīng)統(tǒng)計學分析懸浮細胞球的mmp-2、mmp-9基因較skov3細胞分別增高了2倍、7.6倍,差異具有統(tǒng)計學意義(t=-21.96,p0.001;t=-6.94,p=0.016)。第三部分不同化療模式對裸鼠卵巢癌移植瘤血管生成擬態(tài)epha2信號通路影響的研究方法:體外無血清懸浮培養(yǎng)skov3細胞至第7代,將1×107細胞重懸于0.2mlpbs中,接種于6-8周齡雌性裸鼠大腿外側(cè)皮下,接種于裸鼠,建立卵巢癌移植瘤模型。待移植瘤體積生長至150mm3-200mm3時,隨機將36只裸鼠分為三組,每組12只,給予不同方式化療,即順鉑最大可耐受劑量組(mtd-ddp組),ddp3mg/kg,1次/3日,腹腔注射,共6次;順鉑低劑量節(jié)拍化療組(ldm-ddp組),ddp1mg/kg,1次/日,腹腔注射,共18次;對照組,等量生理鹽水腹腔注射,1次/日,共計18次。采用cd31/pas雙重染色法鑒定卵巢癌組織中vm和微血管結(jié)構(gòu),顯微鏡下分別計數(shù)vm和微血管數(shù)量,比較其差異性。采用western-blot方法檢測兩種化療方式裸鼠皮下移植瘤組織中vm信號通路epha2、pi3k、ln-5γ2蛋白表達的差異性。結(jié)果:1裸鼠的一般情況45只雌性裸鼠的體重為18-20g,平均體重為(18.96±0.62)g,按照化療方式的不同將其隨機分為三組即mtd-ddp組、ldm-ddp組和對照組,mtd-ddp組裸鼠體重為(19.03±0.67)g;ldm-ddp組裸鼠體重為(18.97±0.61)g;對照組裸鼠體重為(18.87±0.62)g。三組雌性裸鼠體重比較無明顯差異,無統(tǒng)計學意義(f=0.263,p=0.770)�；熃Y(jié)束后,三組裸鼠化療后移植瘤體重相比有統(tǒng)計學差異(f=32.697,p0.001),與對照組相比,mtd-ddp組裸鼠體重最輕,為(16.85±0.69)g;lsd-ddp組裸鼠體重[(17.77±0.61)g]介于mtd-ddp組與對照組[(18.65±0.51)g]之間。2裸鼠卵巢癌移植瘤模型形成情況將富集無血清懸浮培養(yǎng)的第7代分選細胞稀釋至1×107個接種于所有雌性裸鼠右側(cè)大腿皮下,10-14d左右均可形成卵巢癌移植瘤,45只裸鼠均能成瘤(45/45),成瘤率為100%,且隨著腫瘤的生長,腫瘤體積均能達到150mm3-200mm3。其中mtd-ddp組移植瘤體積為(176.27±15.46)mm3,ldm-ddp組移植瘤體積為(178.73±14.40)mm3,對照組體積為(174.60±16.02)mm3。三組比較裸鼠移植瘤體積無顯著性差異(f=0.277,p=0.760)�；熯^程中,三組裸鼠皮下移植瘤處于持續(xù)增長狀態(tài),至化療結(jié)束后,測量剝下腫瘤體積,結(jié)果發(fā)現(xiàn),三組裸鼠化療后移植瘤體積相比有統(tǒng)計學差異(f=105.883,p0.001)。與對照組相比,ldm-ddp組移植瘤體積最小,為(436.33±68.29)mm3;mtd-ddp組移植瘤體積(650.93±69.60)mm3介于ldm-ddp組與對照組(802.40±69.79)mm3之間。3三組裸鼠移植瘤微血管計數(shù)、vm的差異性的比較經(jīng)過cd31/pas染色,微血管由內(nèi)皮細胞圍成,經(jīng)cd31免疫組織化學染色后,著色于血管內(nèi)皮細胞膜,呈棕黃色,胞漿可見棕黃色顆粒,且過碘酸雪夫(pas)染色為陽性。若血管腔大于8個紅細胞直徑,且有較厚肌層的血管及硬化區(qū)域的血管視為較大血管,均不納入計算。而vm則由cd31染色結(jié)果陰性的腫瘤細胞構(gòu)成管腔樣結(jié)構(gòu),pas染色陽性物質(zhì)襯附其周圍,未見cd31陽性的內(nèi)皮細胞,部分管腔內(nèi)可見紅細胞。三組經(jīng)過比較,結(jié)果發(fā)現(xiàn),三組微血管密度比較存在差異性,具有統(tǒng)計學意義(f=21.115,p0.001)。經(jīng)兩兩比較,ldm-ddp組移植瘤內(nèi)微血管為(10.87±3.70),數(shù)量最少,對照組微血管最多(23.13±6.58),而mtd-ddp組微血管數(shù)量(16.33±4.85)介于ldm-ddp組與對照組之間。三組vm數(shù)量亦存在差異性,具有統(tǒng)計學意義(f=10.551,p0.001)。ldm-ddp組移植瘤內(nèi)vm為(13.53±3.96),數(shù)量最少,mtd-ddp組vm最多(21.20±5.23),而對照組vm數(shù)量(17.33±4.44)介于ldm-ddp組與對照組之間。4移植瘤組織中調(diào)節(jié)vm生成的epha2信號通路相關蛋白的表達三組移植瘤中epha2的表達存在差異性,具有統(tǒng)計學意義(f=66.130,p0.001)。ldm-ddp組epha2的表達最低,mtd-ddp組epha2的表達最高,而對照組epha2的表達介于兩組之間。三組移植瘤中pi3k的表達存在差異性,具有統(tǒng)計學意義(f=40.132,p0.001)。ldm-ddp組pi3k的表達最低,mtd-ddp組pi3k的表達最高,而對照組pi3k的表達介于兩組之間。三組移植瘤中l(wèi)n-5γ2的表達存在差異性,具有統(tǒng)計學意義(f=32.921,p0.001)。ldm-ddp組ln-5γ2的表達最低,mtd-ddp組ln-5γ2的表達最高,而對照組pi3k的表達介于兩組之間。結(jié)論:1cd133在上皮性卵巢癌vm中的表達與腫瘤惡性度有關,是患者預后的重要指標。2cd133+腫瘤干細胞可能參與上皮性卵巢癌vm的發(fā)生。3采用無血清懸浮培養(yǎng)法培養(yǎng)的skov3能夠分選出懸浮細胞球4經(jīng)過生物學鑒定,第7代分選細胞具有腫瘤干細胞的生物學特性。5第7代分選細胞與親代skov3細胞相比具有較強的vm形成能力,可能在vm形成中發(fā)揮作用。6ldm-ddp與mtd-ddp相比,能夠更為有效的殺滅卵巢癌細胞,減少VM及微血管的形成,使腫瘤的生長受到抑制。7 LDM-DDP與MTD-DDP相比,能夠抑制EphA2信號通路的EphA2、PI3K、LN-5γ2蛋白表達,可能影響VM形成。
[Abstract]:......
【學位授予單位】：河北醫(yī)科大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R737.31

【參考文獻】

相關期刊論文 前10條

1 梁軍;楊波;吳小華;;腫瘤干細胞標志物CD117在上皮性卯巢癌血管生成擬態(tài)中的表達及意義[J];腫瘤;2016年01期

2 吳小華;張彩虹;曹琴英;孫亞楠;周楠;;順鉑低劑量節(jié)拍化療對荷人卵巢癌裸鼠及其移植瘤生長的影響[J];腫瘤;2015年01期

3 岳冬麗;韓交玲;關方霞;張毅;;腫瘤干細胞的研究進展及臨床意義[J];鄭州大學學報(醫(yī)學版);2013年01期

4 楊茗鈁;劉絲蓀;胡嘉;;二氧化硒和順鉑聯(lián)合作用對于人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的影響[J];江西醫(yī)學院學報;2009年05期

5 涂華;歐陽學農(nóng);;腫瘤血管生成方式的研究進展[J];中國醫(yī)藥導報;2008年04期

6 趙珊;榮風年;周婷;;丙戊酸對人卵巢癌裸鼠移植瘤的抑制作用[J];山東大學學報(醫(yī)學版);2007年03期

7 張詩武;郭華;張丹芳;谷彥軍;趙秀蘭;孫保存;;黑色素瘤組織內(nèi)三種血液供應模式時間關系的初步探討[J];中國腫瘤臨床;2007年02期

8 張凡;趙秀蘭;劉易欣;孫保存;張詩武;;小鼠黑色素移植瘤血管生成擬態(tài)CD31、MMP2、MMP9、Cathepsin D的表達[J];臨床與實驗病理學雜志;2006年05期

9 郄碩;孫保存;;EphA2在血管生成擬態(tài)中的作用機制[J];國際腫瘤學雜志;2006年07期

10 高燕;趙秀蘭;古強;王俊艷;張詩武;張丹芳;王星輝;趙楠;高玉彤;孫保存;;卵巢癌組織中血管生成擬態(tài)觀測及其與臨床病理特征和預后的關系[J];中華病理學雜志;2009年09期

，

本文編號：2046182