本文選題：PD-L + 單克隆抗體��； 參考：《中國(guó)免疫學(xué)雜志》2017年06期

【摘要】：目的:獲得能應(yīng)用于臨床診斷以及阻斷PD-L1與PD-1結(jié)合的抗人PD-L1單克隆抗體。方法:采用重組表達(dá)的人PD-L1蛋白免疫BALB/c小鼠,通過(guò)雜交瘤細(xì)胞融合技術(shù)獲得穩(wěn)定分泌抗人PD-L1單抗的陽(yáng)性細(xì)胞株,ELISA方法鑒定抗體的特異性、親和力、亞型等方面特性;免疫印跡、間接免疫熒光方法對(duì)腫瘤細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè);腫瘤殺傷實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證抗體阻斷活性。結(jié)果:共獲得2株抗人PD-L1單抗,抗體效價(jià)分別為1∶2.56×10~6和1∶3×10~5,親和力分別為1.5×10~9L/mol和2.5×10~8L/mol,均與PD-L2蛋白無(wú)交叉反應(yīng)。免疫印跡、間接免疫熒光證實(shí)抗體有診斷作用。殺傷實(shí)驗(yàn)顯示抗體有阻斷作用。結(jié)論:共獲得兩株穩(wěn)定分泌高效價(jià)、高特異性的抗人PD-L1單抗的雜交瘤細(xì)胞株,能作為診斷抗體應(yīng)用于腫瘤表型檢測(cè)和預(yù)后有效性的評(píng)估�？贵w的阻斷功能可應(yīng)用于聯(lián)合CIK細(xì)胞免疫治療。
[Abstract]:Objective: to obtain anti-human PD- L1 monoclonal antibody which can be used in clinical diagnosis and block the binding of PD- L1 to PD-1. Methods: BALB / c mice were immunized with recombinant human PD-L1 protein. Immunoblotting was used to identify the specificity, affinity and subtype of antibody by Elisa, which secreted anti-PD-L1 monoclonal antibody stably by hybridoma cell fusion technique. Indirect immunofluorescence assay was used to detect tumor cells, and tumor killing assay was used to verify the blocking activity of antibody. Results: two monoclonal antibodies against human PD-L1 were obtained. The titers of the antibodies were 1: 2.56 脳 10 ~ (-6) and 1:3 脳 10 ~ (5), respectively. The affinity was 1.5 脳 10 ~ (9) L / mol and 2.5 脳 10 ~ (8) L / mol, respectively. Immunoblotting, indirect immunofluorescence confirmed the antibody has diagnostic effect. The killing test showed that the antibody had blocking effect. Conclusion: two hybridoma cell lines secreting stable high titer and high specificity anti-human PD-L1 monoclonal antibodies were obtained, which can be used as diagnostic antibodies for the evaluation of tumor phenotype and prognosis. The blocking function of antibody can be used in combination with CIK cell immunotherapy.
【作者單位】： 暨南大學(xué)抗體工程研究中心廣東省分子免疫與抗體工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;暨南大學(xué)轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)轉(zhuǎn)化研究院國(guó)際免疫學(xué)中心;
【基金】：廣東省人才引進(jìn)創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)項(xiàng)目《重大疾病的臨床診斷試劑研發(fā)》(2013S028)
【分類號(hào)】：R730.51

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本文編號(hào)：2039707