本文選題：組蛋白去甲基化酶 + H3K27　； 參考：《第三軍醫(yī)大學》2017年博士論文

【摘要】：一、研究背景:細胞發(fā)生上皮-間質轉化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)是結腸癌細胞獲得侵襲和轉移能力的主要原因。癌細胞發(fā)生EMT的主要生物學標志之一是上皮鈣粘蛋白(epithelial cadherin,E-cadherin)表達降低。以往對結腸癌細胞發(fā)生EMT的機制研究主要集中在相關轉錄因子對E-cadherin的基因轉錄水平調節(jié),而對于組蛋白結構重塑的表觀遺傳調控機制尚未完全闡明。本研究證明,組蛋白去甲基化酶UTX(ubiquitously transcribed tetratricopeptide repeat on chromosome X)通過催化三甲基化的組蛋白H3賴氨酸K27(tri-methylated histone 3 lysine 27,H3K27me3)發(fā)生去甲基化,正向調控了人結腸癌細胞HCT-116中E-cadherin的表達,即抑制UTX表達后,E-cadherin的表達下調,而過表達UTX可以促進E-cadherin的表達。此外,過表達UTX能夠抑制HCT-116細胞的遷移和侵襲能力。我們證明了UTX能夠通過對H3K27me3的去甲基化作用抑制H3K27me3在E-cadherin基因啟動子區(qū)的富集,進而激活E-cadherin的表達。同時,UTX能夠通過與組蛋白乙酰轉移酶CBP(CREB-binding protein)的相互作用促進CBP與E-cadherin基因啟動子的結合,進而促進乙�；腍3K27(acetylated histone 3 lysine27,H3K27ac)與E-cadherin基因啟動子結合并激活E-cadherin的表達。由此我們得出結論,UTX促進E-cadherin表達的分子機制是通過促進H3K27me3去甲基化和H3K27乙�；�,進而將E-cadherin基因啟動子的轉錄抑制狀態(tài)轉變?yōu)檗D錄激活狀態(tài)實現(xiàn)的。本研究不僅探索了在HCT-116細胞中UTX調控E-cadherin的分子機制,而且也為未來開展以UTX為靶點的結腸癌分子靶向治療提供新的理論依據(jù)。二、目的:明確UTX對人結腸癌細胞E-cadherin表達的調控作用并探索其分子機制。三、材料和方法:1、人結腸癌細胞株HCT-116用于相關表型研究;2、UTX過表達質粒、si RNA-UTX用于相關功能研究;3、染色質免疫沉淀、蛋白質免疫共沉淀用于分子機制研究。四、結果:1、UTX正向調控人結腸癌細胞E-cadherin的表達。在HCT-116細胞中檢測的十四種組蛋白甲基化修飾酶中,有五種組蛋白甲基轉移酶和三種組蛋白去甲基化酶相對高表達。抑制UTX表達后,E-cadherin的m RNA和蛋白質表達顯著降低,而過表達UTX則能夠顯著促進E-cadherin的m RNA和蛋白質表達。2、UTX抑制人結腸癌細胞的遷移和侵襲能力。抑制UTX表達后,HCT-116細胞的遷移和侵襲能力顯著增強。然而,過表達UTX后,HCT-116細胞的遷移和侵襲能力被顯著抑制。3、H3K27me3介導了UTX對E-cadherin的調控作用。抑制UTX表達后,H3K27me3的表達顯著上調。相反,過表達UTX能夠顯著抑制H3K27me3的表達,說明H3K27me3可能是介導UTX調控E-cadherin表達的下游分子。實驗結果也說明了抑制UTX表達能夠促進H3K27me3與E-cadherin基因啟動子的結合,而過表達UTX則能夠抑制H3K27me3與E-cadherin基因啟動子的結合。4、UTX抑制EZH2/SUZ12與E-cadherin基因啟動子的結合。抑制UTX表達能夠促進組蛋白甲基轉移酶EZH2和SUZ12與E-cadherin基因啟動子的結合。相反,過表達UTX則能夠抑制EZH2和SUZ12與E-cadherin基因啟動子的結合。5、UTX促進H3K27ac和CBP與E-cadherin基因啟動子的結合。抑制UTX表達能夠抑制H3K27ac與E-cadherin基因啟動子的結合。相反,過表達UTX則能夠促進H3K27ac與E-cadherin基因啟動子的結合。此外,抑制UTX表達能夠抑制組蛋白乙酰轉移酶CBP與E-cadherin基因啟動子的結合,而過表達UTX則能夠促進CBP與E-cadherin基因啟動子的結合。免疫共沉淀結果說明,UTX與CBP存在蛋白質分子間的相互作用。五、結論:1、UTX正向調控人結腸癌細胞E-cadherin的表達;2、UTX通過調控E-cadherin的表達抑制人結腸癌細胞的遷移和侵襲能力;3、UTX是治療結腸癌侵襲轉移的潛在靶點。
[Abstract]:We have concluded that UTX can inhibit the expression of E - cadherin in human colon cancer cell line HCT - 116 , and further promote the expression of E - cadherin in human colon cancer cell HCT - 116 . The expression of E - cadherin in human colon cancer cells was inhibited by UTX , and the expression of H3K27me3 and E - cadherin was inhibited by UTX .
【學位授予單位】：第三軍醫(yī)大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R735.35

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 傅晨薇 ,郎景和;SERUM SOLUBLE E-CADHERIN LEVEL IN PATIENTS WITH ENDOMETRIOSIS[J];Chinese Medical Sciences Journal;2002年02期

2 夏紅強;E-cadherin在腫瘤組織的檢測及意義[J];臨床腫瘤學雜志;2003年06期

3 ;Expression of TGF-β1,Snail,E-cadherin and N-cadherin in Gastric Cancer and Its Significance[J];Chinese Journal of Clinical Oncology;2007年06期

4 熊小蔚;崔明;;T-cadherin與腫瘤[J];醫(yī)學綜述;2010年08期

5 ;E－Cadherin在膀胱乳頭狀移行細胞癌的表達[J];國外醫(yī)學(生理、病理科學與臨床分冊);1996年02期

6 張文軍,張志謙,林仲翔,王耐勤,胡穎;Correlation between expression of cadherin and gap junctional communication in human lung carcinoma cells[J];Science in China(Series C:Life Sciences);1998年04期

7 ;The expression of N-cadherin/catenins/actin complex in human lung normal and carcinoma cells[J];Chinese Science Bulletin;1998年09期

8 ;Quantitative analysis of E-cadherin expression and clinicopathologic evaluation in gastric cancer[J];Chinese Medical Journal;1998年01期

9 Ge-Liang Liu;Han-Jie Yang;Tian Liu;Yun-Zhao Lin;;Expression and significance of E-cadherin,N-cadherin,transforming growth factor-β1 and Twist in prostate cancer[J];Asian Pacific Journal of Tropical Medicine;2014年01期

10 王曦,吳人亮,郝天玲,陳芳;Effects of Cigarette Smoke Extract on E-cadherin Expression in Cultured Airway Epithelial Cells[J];Journal of Tongji Medical University;2000年01期

相關會議論文 前10條

1 ;Core Fucosylation Regulates E-cadherin Binding Affinity in Human Lung Cancer Cells[A];2008年全國生物化學與分子生物學學術大會論文摘要[C];2008年

2 ;Epigenetic regulation of E-cadherin in HBV associate human Hepatocellular carcinoma[A];江蘇省遺傳學會第八屆會員代表大會暨學術研討會論文集[C];2010年

3 王冰晶;張志謙;;癌細胞cadherin亞型轉變及其分子機制[A];中國細胞生物學學會2005年學術大會、青年學術研討會論文摘要集[C];2005年

4 ;Suppressed survival and proliferation of ovarian cancer cells by repressed MEK-ERK activation via knocking-down of E-cadherin[A];中華醫(yī)學會腫瘤學分會第七屆全國中青年腫瘤學術會議——中華醫(yī)學會腫瘤學分會“中華腫瘤 明日之星”大型評選活動暨中青年委員全國遴選論文匯編[C];2011年

5 ;N-cadherin:a potential receptor of GDNF[A];Proceedings of the 8th Biennial Conference of the Chinese Society for Neuroscience[C];2009年

6 Zhiyang Xu;Dechang Li;Baohua Ji;;Quantification of the stiffness and strength of cadherin ectodomain binding with different ions[A];北京力學會第20屆學術年會論文集[C];2014年

7 賈文亮;張慶瑜;;關于E-cadherin在胃癌和肺癌中表達情況的研究[A];天津市生物醫(yī)學工程學會第三十三屆學術年會論文集[C];2013年

8 烏新春;倪志超;段昕所;宋有鑫;;綠色熒光蛋白標記的T-cadherin基因穩(wěn)定轉染黑素瘤細胞株的建立[A];第五屆全國中醫(yī)藥免疫學術研討會——暨環(huán)境·免疫與腫瘤防治綜合交叉會議論文匯編[C];2009年

9 ;Manipulation of N-cadherin level and function through different methods results in distinct functional changes in hippocampal neurons[A];Proceedings of the 7th Biennial Meeting and the 5th Congress of the Chinese Society for Neuroscience[C];2007年

10 張憲真;陳隨芹;耿秀東;;N-Cadherin與E-Cadherin在非小細胞肺癌中的表達及相關性研究[A];中國腫瘤內科進展 中國腫瘤醫(yī)師教育（2014）[C];2014年

相關博士學位論文 前10條

1 查林;組蛋白去甲基化酶UTX促進人結腸癌細胞E-cadherin表達的分子機制研究[D];第三軍醫(yī)大學;2017年

2 楊俊俊;Rab5 GTPase介導的VE-cadherin內吞調控肺微血管內皮細胞屏障功能的機制[D];第三軍醫(yī)大學;2015年

3 張紅燕;STAT3/ZEB1/E-cadherin信號軸在食管鱗癌上皮間質轉化中的作用及機制研究[D];鄭州大學;2016年

4 陶祥;SNAI2—E-cadherin軸在LRIG1調節(jié)人腦膠質瘤細胞侵襲和轉移中的作用研究[D];武漢大學;2016年

5 王唯一;雙氫青蒿素對喉癌干細胞侵襲和轉移的影響及其相關機制研究[D];河北醫(yī)科大學;2017年

6 宋小珍;Par3-aPKC與Vangl2相互作用并參與調節(jié)E-cadherin-based粘附連接和管腔化形成[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2017年

7 馬福哲;12-脂氧化酶對糖尿病腎病腎小球P-cadherin表達的影響及其機制研究[D];吉林大學;2017年

8 瞿金妙;E-cadherin，CD44和MSH2相關的列線圖預測Ⅱ和Ⅲ期結直腸癌預后[D];南方醫(yī)科大學;2017年

9 黎景佳;E-cadherin在喉鱗狀細胞癌中的表達及其與腫瘤侵襲轉移的關系[D];中南大學;2010年

10 吳揚;VE-cadherin重組腺病毒偶聯(lián)氧化型甘露聚糖抗腫瘤實驗研究[D];四川大學;2005年

相關碩士學位論文 前10條

1 衷燦梅;12-脂氧合酶通過上皮間質轉化促進胃癌侵襲轉移的機制研究[D];福建醫(yī)科大學;2015年

2 高玉梅;探索N-cadherin在卵巢癌發(fā)生和進展中的作用及意義[D];石河子大學;2015年

3 林路;E-cadherin,β-catenin,N-cadherin在漿液性卵巢癌中的表達及意義[D];安徽醫(yī)科大學;2015年

4 辛明;Galectin-3通過EGFR介導調控腫瘤細胞E-cadherin表達的機制研究[D];山東大學;2015年

5 孟梅;VE-cadherin對血管穩(wěn)態(tài)的作用及調控機制[D];蘇州大學;2015年

6 汪威;丙泊酚對荷瘤大鼠MADB106腫瘤細胞肺轉移及E-cadherin和β-catenin的影響[D];南方醫(yī)科大學;2015年

7 孫琳;ALCAM、E-cadherin和β-catenin在甲狀腺乳頭狀癌中的表達及意義[D];河北醫(yī)科大學;2014年

8 于海峰;FOXQ1和E-cadherin在食管鱗狀細胞癌中的表達及臨床意義[D];天津醫(yī)科大學;2015年

9 何宏月;EMT相關蛋白E-cadherin、N-cadherin、Snail和Slug在子宮內膜異位癥中的表達及意義[D];天津醫(yī)科大學;2015年

10 劉超;EMX2和E-cadherin在食管鱗癌中的表達及臨床病理意義[D];天津醫(yī)科大學;2015年

，

本文編號：2037924