本文選題：宮頸癌 + Lnc��； 參考：《貴州醫(yī)科大學(xué)》2017年博士論文

【摘要】：第一部分長鏈非編碼RNA芯片篩選及篩選基因的表達(dá)驗證目的:應(yīng)用微陣列芯片技術(shù)檢測宮頸癌組織中長鏈非編碼RNA的表達(dá)譜,通過觀察長鏈非編碼RNA在宮頸癌及癌旁組織中的表達(dá)差異。方法:1.應(yīng)用微陣列芯片技術(shù)檢測宮頸癌與癌旁組織中長鏈非編碼RNA的表達(dá)譜。2.通過Realtime-PCR檢測篩選分子對表達(dá)譜芯片結(jié)果進(jìn)行驗證;3.根據(jù)表達(dá)差異,選擇相應(yīng)候選分子開展后續(xù)研究。結(jié)果:1.長鏈非編碼RNA表達(dá)譜芯片分析顯示,宮頸癌與癌旁組織相中長鏈非編碼RNA表達(dá)譜存在顯著差異。結(jié)果顯示表達(dá)差異有4倍以上的長鏈非編碼RNA有47條,其中上調(diào)的有26條,下調(diào)的有21條。(P0.05);2.通過UCSC數(shù)據(jù)庫分析統(tǒng)計,Real-time-PCR檢測驗證篩選芯片結(jié)果中表達(dá)上調(diào)的8條Lnc RNA在宮頸癌及癌旁組織中表達(dá)水平,驗證結(jié)果分析與芯片結(jié)果相一致;3.Real-time-PCR檢測結(jié)果顯示篩選驗證Lnc RNA中UCA1在宮頸癌組織中明顯高表達(dá),結(jié)合UCA1與細(xì)胞凋亡關(guān)系密切,選取UCA1作為候選分子開展后續(xù)研究。第二部分宮頸癌組織中Lnc RNA UCA1的表達(dá)差異及臨床意義目的:探討在宮頸癌組織中Lnc RNA UCA1的表達(dá)差異及臨床相關(guān)性;方法:1.利用PCR技術(shù)檢測Lnc RNA UCA1在宮頸癌各組織中的表達(dá);2.結(jié)合臨床信息分析患者宮頸癌組織中UCA1表達(dá)差異與FIGO分期,病理分型,腫瘤浸潤程度相關(guān)性。結(jié)果:1.q PCR檢測宮頸癌組織中l(wèi)nc RNA UCA1的相對表達(dá)量分別為:宮頸癌組:28.4±7.8;癌旁組:10.9±3.8;非瘤變組:4.2±2.3;宮頸CIN組:12.2±16.9。UCA1的表達(dá)在宮頸癌組織中高于宮頸癌旁組及宮頸非瘤變組的表達(dá)(p0.05);2.UCA1的表達(dá)與腫瘤病理類型,FIGO分期,腫瘤浸潤深度顯著正相關(guān)(p0.01)。第三部分探討長鏈非編碼RNA UCA1在宮頸癌順鉑化療耐受中的作用及相關(guān)的機(jī)制目的:探討長鏈非編碼RNA UCA1對宮頸癌細(xì)胞順鉑耐藥的影響,初步分析其相關(guān)的分子機(jī)制。方法:1.通過被動增加順鉑劑量刺激建立順鉑耐受He La細(xì)胞株He La/DDP;2.利用Real-Time PCR檢測宮頸癌He La細(xì)胞及順鉑耐藥He La/DDP細(xì)胞中Lnc RNA UCA1的表達(dá)水平;3.通過構(gòu)建pc DNA3.0-UCA1載體和UCA1si RNA,在宮頸癌He La細(xì)胞中分別進(jìn)行UCA1基因過表達(dá)及基因沉默,采用CCK-8、Edu法及流式細(xì)胞術(shù)分析He La細(xì)胞的增殖活性;4.利用Westernblotting方法檢測UCA1調(diào)節(jié)宮頸癌He La細(xì)胞株中細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白Caspase-3、p21、survivin及CDK2表達(dá)水平。結(jié)果:1.PCR結(jié)果顯示宮頸癌順鉑耐藥He La/DDP細(xì)胞中UCA1表達(dá)明顯上調(diào);2.CCK-8、Edu法及流式細(xì)胞術(shù)的結(jié)果顯示UCA1過表達(dá)在He La細(xì)胞中顯著降低由順鉑引起的細(xì)胞凋亡;3.Western-blotting的結(jié)果顯示UCA1過表達(dá)能夠下調(diào)細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白Caspase-3及p21的水平,同時上調(diào)細(xì)胞周期蛋白survivin及CDK2的水平。對UCA1沉默后進(jìn)一步驗證了以上結(jié)果。結(jié)論:1.通過芯片篩查及Realtime-PCR驗證長鏈非編碼RNA UCA1在宮頸癌組織中高表達(dá);2.長鏈非編碼RNA UCA1在宮頸癌組織中高表達(dá);結(jié)合臨床資料分析UCA1表達(dá)量與宮頸癌患者FIGO分期及腫瘤浸潤深度相關(guān);3.長鏈非編碼RNA UCA1促進(jìn)順鉑耐藥的作用可能是通過下調(diào)Caspase-3,p21的水平,同時上調(diào)survivin及CDK2細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白實現(xiàn)的。
[Abstract]:The expression profiles of long - chain non - coding RNA in cervical cancer and adjacent tissues were examined by microarray chip technique . The expression of Lnc RNA UCA1 in cervical cancer tissues was significantly higher than that in cervical cancer tissues . Results : 1 . The expression of caspase - 3 , p21 , survivin and CDK2 in human cervical cancer cells was significantly decreased by using Western blotting .
【學(xué)位授予單位】：貴州醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R737.33

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前3條

1 Shi-Ping Liu;Jia-Xin Yang;Dong-Yan Cao;Keng Shen;;Identification of differentially expressed long non-coding RNAs in human ovarian cancer cells with different metastatic potentials[J];Cancer Biology & Medicine;2013年03期

2 崔玲;謝曉硯;王和;陳新蓮;劉珊玲;胡麗娜;;長鏈非編碼RNA HOTAIR mRNA在卵巢癌中的表達(dá)[J];四川大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2013年01期

3 Joe Y.Chang;;Proton therapy in clinical practice[J];癌癥;2011年05期

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本文編號：2018497