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干擾組蛋白賴氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶SET8對腎透明細胞癌786-O細胞增殖的影響

發(fā)布時間:2018-06-11 12:27

  本文選題:腎腫瘤 + SET。 參考:《中華腫瘤防治雜志》2017年08期


【摘要】:目的細胞增殖是影響腎細胞癌進展的重要因素,本研究旨在探討組蛋白賴氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶SET8在調(diào)節(jié)腎透明細胞癌786-O細胞增殖中的作用。方法將體外培養(yǎng)腎透明細胞癌786-O細胞隨機分為空白對照組、空質(zhì)粒組和SET8-shRNA組3組。采用四甲基偶氮唑藍(MTT)法檢測3組細胞的增殖能力;RT-PCR和蛋白質(zhì)印跡法檢測3組細胞Survivin和Caspase-3的表達水平,分析干擾SET8對腎透明細胞癌786-O細胞增殖及相關(guān)基因和蛋白表達的影響。結(jié)果 shRNA-SET8可成功抑制786-O細胞中SET8蛋白的表達。MTT檢測結(jié)果顯示,0、12、24、36和48 h SET8-shRNA組增殖抑制率分別為(10.97±2.68)%、(20.38±7.12)%、(25.03±7.60)%、(30.35±1.97)%和(31.33±1.04)%,SET8-shRNA組786-O細胞的增殖能力較空白對照組和空質(zhì)粒組明顯降低,P0.05。RT-PCR和蛋白質(zhì)印跡法結(jié)果顯示,SET8-shRNA組Survivin mRNA相對表達量為0.257±0.024,較空白對照組(1.046±0.041)和空質(zhì)粒組(0.994±0.018)明顯下降(P0.05),其蛋白的相對表達量為0.834±0.072,較空白對照組(0.951±0.047)和空質(zhì)粒組(1.203±0.092)明顯下降,P0.05;而Caspase-3mRNA的相對表達量為0.921±0.072,較空白對照組(0.421±0.022)和空質(zhì)粒組(0.439±0.007)明顯上升(P0.05),蛋白的相對表達量為1.188±0.022,較空白對照組(0.541±0.060)和空質(zhì)粒組(0.617±0.028)明顯上升,P0.05。結(jié)論干擾SET8可以有效抑制腎透明細胞癌786-O細胞SET8蛋白表達,從而抑制Survivin和上調(diào)Caspase-3的表達而抑制腎透明細胞癌786-O細胞增殖能力。
[Abstract]:Objective to investigate the role of histone lysine methyltransferase SET8 in regulating the proliferation of renal clear cell carcinoma 786-O cells. Methods 786-O cells of renal clear cell carcinoma were randomly divided into three groups: blank control group, empty plasmid group and SET8-shRNA group. The expression of survivin and Caspase-3 was detected by RT-PCR and Western blotting, and the effects of interfering SET8 on proliferation of 786-O cells and expression of related genes and proteins in renal clear cell carcinoma (RCC) were analyzed by MTT assay. Results: shRNA-SET8 could successfully inhibit the expression of SET8 protein in 786-O cells. MTT assay showed that the proliferation inhibition rates of SET8-shRNA group were 10.97 鹵2.68%, 25.03 鹵7.60% and 31.33 鹵1.04% respectively. The proliferation ability of 786-O cells in SET8-shRNA group was significantly lower than that in blank control group and empty plasmid group. The relative expression of survivin mRNA in SET8-shRNA group was 0.257 鹵0.024, which was significantly lower than that in blank control group (1.046 鹵0.041) and empty plasmid group (0.994 鹵0.018). The relative expression level of Caspase-3 mRNA was 0.834 鹵0.072, which was significantly lower than that in blank control group (0.951 鹵0.047) and empty plasmid group (1.203 鹵0.092), while the expression of Caspase-3 mRNA was significantly lower than that in blank control group (0.834 鹵0.072) and blank plasmid group (1.203 鹵0.092). The relative expression was 0.921 鹵0.072, which was significantly higher than that of blank control group (0.421 鹵0.022) and empty plasmid group (0.439 鹵0.007). The relative expression of protein was 1.188 鹵0.022, which was significantly higher than that of blank control group (0.541 鹵0.060) and blank plasmid group (0.617 鹵0.028). Conclusion interference of SET8 can effectively inhibit the expression of SET8 protein in 786-O cell line of renal clear cell carcinoma, thus inhibit the expression of survivin and up-regulate Caspase-3, and inhibit the proliferation of 786-O cell line of renal clear cell carcinoma.
【作者單位】: 河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院腎內(nèi)科;
【基金】:河北省科技計劃(16397733D)
【分類號】:R737.11

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本文編號:2005249

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