雷替曲塞及其聯(lián)合PD98059對HT-29細胞的影響
本文選題:結(jié)腸癌 + 雷替曲塞 ; 參考:《安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報》2017年05期
【摘要】:目的研究雷替曲塞及其聯(lián)合PD98059對結(jié)腸癌細胞HT-29增殖及凋亡的影響,并探討其分子機制。方法①在倒置顯微鏡下觀察處理24 h后各組細胞的形態(tài)及數(shù)量變化;②使用細胞計數(shù)法檢測不同處理條件下的細胞數(shù);③使用流式細胞術(shù)檢測各處理組細胞的凋亡率;④使用RT-PCR法檢測各組K-RAS、ERK1、ERK2 mRNA的相對表達量。結(jié)果①倒置顯微鏡下觀察可見與對照組相比,除PD98059組外,其他各組細胞數(shù)量均減少,形態(tài)均發(fā)生凋亡變化,且隨雷替曲塞濃度增高,變化程度增加;聯(lián)合組細胞形態(tài)及數(shù)量變化較對應(yīng)雷替曲塞組程度更深。②細胞計數(shù)法顯示各組細胞數(shù)均明顯低于對照組的細胞數(shù),且隨著雷替曲塞濃度的增加,細胞數(shù)呈遞減趨勢;聯(lián)合組與其他各組間均存在明顯差異;③流式細胞儀檢測顯示和對照組相比,各組凋亡率均明顯上升,在雷替曲塞組中存在濃度依賴性;聯(lián)合組與其他各組的細胞凋亡率均存在差異;④ RT-PCR結(jié)果顯示:與對照組相比,PD98059組、雷替曲塞組及聯(lián)合組在K-RAS、ERK1、ERK2 mRNA的表達上均未表現(xiàn)出明顯的差異。結(jié)論①雷替曲塞對結(jié)腸癌細胞HT-29增殖及凋亡的影響呈濃度依賴性;②雷替曲塞聯(lián)合ERK抑制劑對HT-29細胞具有協(xié)同作用;③ ERK抑制劑不是在基因表達水平影響細胞的增殖及凋亡。
[Abstract]:Aim to study the effects of retitrexide and PD98059 on the proliferation and apoptosis of colon cancer cell line HT-29 and its molecular mechanism. Methods 1 the morphologic and quantitative changes of cells in each group were observed under inverted microscope for 24 h. Cell count was used to detect the number of cells under different treatment conditions and flow cytometry was used to detect the apoptosis rate of each treatment group. (4) the relative expression of ERK1 ERK2 mRNA in each group was detected by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR). Results 1Compared with the control group under inverted microscope, the number of cells decreased and the morphology of all the cells in each group decreased, and the change degree increased with the increase of letitrexed concentration. The changes of cell morphology and quantity in the combined group were deeper than those in the corresponding group. 2 cell count method showed that the number of cells in each group was significantly lower than that in the control group, and the number of cells decreased with the increase of the concentration of letitrezel. Compared with the control group, the apoptosis rate of the combined group was significantly higher than that of the control group, and there was a concentration-dependent relationship between the combined group and the other groups. The results of RT-PCR showed that there was no significant difference in the expression of ERK1ERK2 mRNA between PD98059 group, Ratitrexed group and combined group. Conclusion (1) the effect of retitrexide on the proliferation and apoptosis of colon cancer cell line HT-29 was concentration-dependent. The synergistic effect of retitrexide combined with ERK inhibitor on HT-29 cell line was not at the level of gene expression, but also affected the proliferation and apoptosis of HT-29 cell line.
【作者單位】: 安徽醫(yī)科大學(xué)附屬巢湖醫(yī)院消化內(nèi)科;
【基金】:安徽省高等學(xué)校自然科學(xué)研究項目(編號:KJ2015A334)
【分類號】:R735.35
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,本文編號:2004412
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