BCL6B對人結直腸癌LoVo細胞增殖和遷移的影響及機制
本文選題:BCLB + 結直腸癌; 參考:《中國病理生理雜志》2017年01期
【摘要】:目的:研究B細胞白血病/淋巴瘤6B(BCL6B)在人正常腸上皮細胞FHC及結直腸癌細胞LoVo中的表達水平及BCL6B對LoVo細胞增殖和遷移的影響,并探討其相關分子機制。方法:采用RT-PCR及Western blot檢測FHC細胞和LoVo細胞中BCL6B的內源性表達;用脂質體法將重組質粒pc DNA3.1-BCL6B轉入LoVo細胞,運用MTT、集落形成、細胞劃痕及Transwell小室實驗檢測BCL6B對LoVo細胞增殖和遷移的影響,采用RT-PCR及Western blot檢測細胞周期蛋白D1(cyclin D1)和基質金屬蛋白酶9(MMP-9)的表達,Western blot檢測蛋白激酶B(AKT)的磷酸化水平。結果:與正常腸上皮細胞FHC相比,BCL6B在LoVo細胞中呈明顯低表達;轉染pc DNA3.1-BCL6B后的LoVo細胞內BCL6B水平顯著增高。過表達BCL6B的實驗組細胞72 h的增殖活性及劃痕愈合力分別較對照組降低28.33%(P0.01)和36.11%(P0.05)。實驗組細胞cyclin D1和MMP-9的m RNA水平分別降低39.90%(P0.01)和77.36%(P0.05),同時cyclin D1、MMP-9和磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)的蛋白水平分別降低44.00%(P0.05)、47.06%(P0.01)和32.88%(P0.05)。結論:BCL6B可抑制結直腸癌LoVo細胞的增殖和遷移,其機制可能涉及PI3K/AKT信號通路的抑制。
[Abstract]:Aim: to investigate the expression of B-cell leukemia / lymphoma 6BCL6B in human normal intestinal epithelial cells (FHC) and colorectal cancer cells (LoVo) and the effect of BCL6B on the proliferation and migration of LoVo cells. Methods: the endogenous expression of BCL6B in FHC cells and LoVo cells was detected by RT-PCR and Western blot, and the recombinant plasmid pcDNA3.1-BCL6B was transfected into LoVo cells by liposome method. The effects of BCL6B on the proliferation and migration of LoVo cells were detected by cell scratch and Transwell chamber assay. The expression of cyclin D1 and matrix metalloproteinase 9 (MMP-9) were detected by RT-PCR and Western blot. The phosphorylation of protein kinase (BK) was detected by Western blot. Results: the expression of BCL6B in LoVo cells was significantly lower than that in normal intestinal epithelial cells, and the level of BCL6B in LoVo cells transfected with pcDNA3.1-BCL6B was significantly higher than that in normal intestinal epithelial cells. Compared with the control group, the proliferation activity and scratch healing ability of the experimental group were lower than that of the control group (P 0.01) and 36.11% P 0.05 respectively. The mRNA levels of cyclin D1 and MMP-9 in the experimental group were decreased by 39.90 and 77.36, respectively, while the protein levels of cyclin D1MP-9 and phosphorylated protein kinase BP-AKT were decreased by 44.00 and 47.06 and 32.88P0.05, respectively. Conclusion: BCL6B can inhibit the proliferation and migration of LoVo cells in colorectal cancer, and its mechanism may be related to the inhibition of PI3K / AKT signaling pathway.
【作者單位】: 重慶醫(yī)科大學檢驗醫(yī)學院臨床檢驗診斷學教育部重點實驗室;
【分類號】:R735.3
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,本文編號:1998703
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