發(fā)布時間：2018-06-07 23:31

  本文選題：RNA + 聚合酶鏈反應　； 參考：《重慶醫(yī)學》2017年01期

【摘要】：目的研究在缺氧環(huán)境下靶向針對解聚素-金屬蛋白酶17(ADAM17)的短發(fā)夾狀RNA(shRNA)對人乳腺癌MCF-7細胞增殖的影響。方法針對ADAM17設計4個特異性的ADAM17-shRNA,經電穿孔法轉染MCF-7細胞。缺氧條件下培養(yǎng)細胞。試驗分為:對照組(空白磷酸鹽緩沖液)、無義序列組(轉染無義序列ADAM17-shRNA)和shRNA轉染組(轉染ADAM17-shRNA,選擇沉默ADAM17基因效率最高的shRNA用于后續(xù)試驗)。分別采用實時熒光定量PCR、iCELLigence、流式細胞儀檢測細胞ADAM17mRNA的表達水平、細胞增殖活性和細胞周期變化。結果 4個shRNA轉染組對MCF-7細胞的ADAM17基因表達均有沉默作用,與對照組及無義序列組相比,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05),尤以shRNA1219抑制率最高(F=5.11,P0.01)。shRNA轉染組的細胞生長速度和增殖活性較對照組和無義序列組顯著降低,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。shRNA轉染組的絕大多數(shù)細胞停留在G0/G1期(73.35±2.45),與對照組(62.56±2.35)、無義序列組(62.68±1.20)相比較,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),細胞周期進展明顯延緩。結論 ADAM17-shRNA在缺氧條件下抑制乳腺癌細胞MCF-7的增殖。
[Abstract]:Objective to study the effects of short hairpin RNA-shRNAs targeting depolymerin-metalloproteinase-17 (ADAM17) on the proliferation of human breast cancer MCF-7 cells under hypoxia. Methods four specific ADAM17-shRNAs were designed for ADAM17 and transfected into MCF-7 cells by electroporation. Cells were cultured under anoxic conditions. The experiment was divided into three groups: control group (blank phosphate buffer solution), nonsense sequence group (transfected with ADAM17-shRNAs) and shRNA transfection group (transfected with ADAM17-shRNAs). The shRNA with the highest efficiency of silencing ADAM17 gene was selected for further experiment. The expression of ADAM17 mRNA, cell proliferation activity and cell cycle were measured by flow cytometry. Results the expression of ADAM17 gene in MCF-7 cells was silenced in the four shRNA transfection groups, compared with the control group and the nonsense sequence group. The difference was statistically significant (P 0.05). The cell growth rate and proliferation activity of shRNA1219 group were significantly lower than those of control group and nonsense sequence group. The difference was statistically significant in the majority of cells in the G _ 0 / G _ 1 phase (73.35 鹵2.45), compared with the control group (62.56 鹵2.35) and the nonsense sequence group (62.68 鹵1.20). The difference was statistically significant (P 0.05), and the progress of cell cycle was significantly delayed. Conclusion ADAM17-shRNA inhibits the proliferation of breast cancer cell line MCF-7 under hypoxia.
【作者單位】： 華北理工大學附屬醫(yī)院腫瘤外科;
【基金】：河北省自然科學基金資助項目(C2010001767) 唐山市科學技術研究與發(fā)展計劃項目(14130256B)
【分類號】：R737.9

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 錢宏美;張亞男;李俊生;;ADAM9與惡性腫瘤[J];腫瘤防治研究;2009年11期

2 凌家艷;沈霖;劉慶;薛莎;馬威;吳輝;李子希;朱銳;;Changes in Platelet GPIbα and ADAM17 during the Acute Stage of Atherosclerotic Ischemic Stroke among Chinese[J];Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences);2013年03期

3 蔡靜莉,楊凌峰,王蓉;ADAM家族研究進展[J];國外醫(yī)學(分子生物學分冊);2000年04期

4 ;ADAM17 mRNA expression and pathological features of hepatocellular carcinoma[J];World Journal of Gastroenterology;2004年18期

5 Shintani Y;Higashiyama S;Ohta M;Hirabayashi H;Yamamoto S;Yoshimasu T;Matsuda H;Matsuura N;;Overexpression of ADAM9 in non-small cell lung cancer correlates with brain metastasis[J];中國神經腫瘤雜志;2004年02期

6 喬純忠;卞倩;戚宇華;焦永軍;李俊生;;ADAM9基因真核表達質粒的構建及表達[J];東南大學學報(醫(yī)學版);2011年03期

7 關艷;鄺曉聰;姚金光;黃敏;;ADAM10在舌癌中的表達及其意義[J];口腔醫(yī)學研究;2011年11期

8 ;Role of ADAM10 and ADAM17 in CD16b Shedding Mediated by Different Stimulators[J];Chinese Medical Sciences Journal;2012年02期

9 劉爽;馬榮;;ADAM17在惡性腫瘤中的研究及其進展[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學進展;2013年17期

10 劉傳文;陳飛鵬;鄔勇堅;陽雋;;ADAM10在肺癌中的表達及其臨床病理學意義[J];南方醫(yī)科大學學報;2008年05期

相關會議論文 前7條

1 陳勤;蒙凌華;丁健;;ADAM15蛋白在腫瘤轉移過程中的作用及其機理研究[A];2007醫(yī)學前沿論壇暨第十屆全國腫瘤藥理與化療學術會議論文集[C];2007年

2 戴潔;劉真權;黃志紓;;小分子結合ADAM10基因5′-UTR區(qū)富G序列對蛋白表達的影響[A];中國化學會第29屆學術年會摘要集——第22分會：化學生物學[C];2014年

3 J.Norman Balfour-McKie;;IL10,IL4和PMA對U937細胞系ADAM表達的調節(jié)作用(英文)[A];生命科學與生物技術：中國科協(xié)第三屆青年學術年會論文集[C];1998年

4 陳俊;段翼遠;龍皎月;張海龍;蔣雪梅;林峰;龍曉茹;劉恩梅;Joerg Bartsch;鄧林紅;;ADAM8肽抑制劑對氣道高反應性等的抑制作用研究[A];第十屆全國生物力學學術會議暨第十二屆全國生物流變學學術會議論文摘要匯編[C];2012年

5 孫慶玲;;ADAM-4000在QCS生料質量控制系統(tǒng)中的應用[A];水泥生料質量控制應用技術研討會交流會論文集[C];2006年

6 劉暉暉;;基于ADAM模塊的核設施監(jiān)測系統(tǒng)設計[A];第十七屆全國測控計量儀器儀表學術年會（MCMI'2007）論文集（上冊）[C];2007年

7 劉曉麗;張龍舉;;COPD患者血清ADAM-17和趨化因子FKN的變化和意義[A];中華醫(yī)學會呼吸病學年會——2011（第十二次全國呼吸病學學術會議）論文匯編[C];2011年

相關重要報紙文章 前3條

1 宋家雨;惠普ADAM“坐診”也“巡診”[N];網絡世界;2007年

2 倪洪章;惠普ADAM解決方案為企業(yè)數(shù)據“體檢”[N];計算機世界;2007年

3 汪蔚;用ADAM給信息系統(tǒng)體檢[N];中國計算機報;2007年

相關博士學位論文 前10條

1 郭震;ADAM-17在腎透明細胞癌中的表達及靶向抑制ADAM-17對腎癌Notch通路的特異性影響以及分子機制的研究[D];山東大學;2015年

2 常亮;RNA干擾介導非小細胞肺癌ADAM9和Stat3基因沉默的研究[D];吉林大學;2016年

3 馬波;ADAM10在食管鱗癌浸潤轉移中的作用及機制研究[D];鄭州大學;2015年

4 潘源;ADAM10參與垂體腺瘤海綿竇侵襲性行為的實驗研究[D];第二軍醫(yī)大學;2011年

5 趙征;牙胚發(fā)育中ADAM28基因的克隆、表達和功能研究[D];第四軍醫(yī)大學;2006年

6 吳靜;重組人ADAM15去整合素結構域蛋白的制備及其作用機理[D];江南大學;2008年

7 遲翔宇;ADAM33基因在支氣管哮喘發(fā)病中的研究[D];山東大學;2011年

8 陳操;克—雅病患者腦脊液蛋白質組學分析及朊病毒感染中ADAM10變化的研究[D];中國疾病預防控制中心;2014年

9 房文錚;FoxM1調控ADAM17促進胃癌發(fā)生發(fā)展的機制研究[D];第二軍醫(yī)大學;2014年

10 龔理;發(fā)展“快”、“慢”COPD患者中醫(yī)體質、Th17/Treg平衡及ADAM33基因多態(tài)性差異研究[D];新疆醫(yī)科大學;2013年

相關碩士學位論文 前10條

1 吳麗君;缺氧條件下沉默ADAM17基因對人乳腺癌MCF-7細胞增殖的影響[D];河北聯(lián)合大學;2014年

2 丁華;轉染ADAM17-shRNA的BMSC對MCF-7人乳腺癌細胞的影響[D];河北聯(lián)合大學;2014年

3 張媛媛;缺氧條件下ADAM17-shRNA對人MCF-7乳腺癌細胞侵襲力和遷移力的影響[D];河北聯(lián)合大學;2014年

4 牛軍偉;ADAM17介導的CD163表達調控對PRRSV感染的影響[D];中國農業(yè)科學院;2015年

5 郝娥娥;ADAM33基因S1、S2位點多態(tài)性與新疆維吾爾族慢性阻塞性肺疾病易感性研究[D];石河子大學;2015年

6 李擎瑜;探索ADAM17在小鼠大腦皮層發(fā)育中對細胞遷移和分化作用的分子機制[D];復旦大學;2014年

7 馬f，

本文編號：1993291