本文選題：骨肉瘤 + miRNA-34a��； 參考：《寧夏醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：目的檢測(cè)骨肉瘤miRNA-34a啟動(dòng)子甲基化水平,觀察去甲基化對(duì)人骨肉瘤細(xì)胞增殖及其miRNA-34a表達(dá)的影響,探討骨肉瘤miRNA-34a啟動(dòng)子甲基化的調(diào)控作用。方法運(yùn)用實(shí)時(shí)定量PCR(real-time PCR)檢測(cè)對(duì)比人骨肉瘤細(xì)胞株(MG-63、SAOS-2)及成骨細(xì)胞株(hFOB1.19)中miRNA-34a的表達(dá)差異;采用基質(zhì)輔助激光解吸附電離飛行時(shí)間質(zhì)譜分析質(zhì)譜技術(shù)(MALDI-TOF)檢測(cè)對(duì)比人骨肉瘤細(xì)胞與成骨細(xì)胞、骨肉瘤蠟塊組織與正常骨組織中mi RNA-34a啟動(dòng)子CpG島甲基化水平的差異;用1%5-氮雜-胞苷(5-Aza-2’-deoxycytidine,Aza)對(duì)人骨肉瘤細(xì)胞進(jìn)行去甲基化處理,觀察去甲基化處理后人骨肉瘤細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),并檢測(cè)分析去甲基化處理前后人骨肉瘤細(xì)胞中mi RNA-34a表達(dá)量及其啟動(dòng)子甲基化水平的變化。結(jié)果miRNA-34a在MG-63、SAOS-2細(xì)胞中的表達(dá)量明顯低于hFOB1.19細(xì)胞,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。MG-63、SAOS-2細(xì)胞中miRNA-34a基因啟動(dòng)子CpG島甲基化水平高于hFOB1.19細(xì)胞,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。骨肉瘤組織中mi RNA-34a基因啟動(dòng)子CpG島甲基化水平高于正常骨組織對(duì)照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);MG-63、SAOS-2細(xì)胞經(jīng)去甲基化處理后生長(zhǎng)增殖受限,檢測(cè)miRNA-34a均表達(dá)上調(diào)(P0.05),且miRNA-34a啟動(dòng)子CpG島甲基化水平均降低(P0.05)。結(jié)論骨肉瘤miRNA-34a基因啟動(dòng)子為高甲基化水平,miRNA-34a基因表達(dá)下調(diào)與其啟動(dòng)子高甲基化修飾有關(guān),進(jìn)而影響了其抑制骨肉瘤的生物學(xué)作用;提示miRNA-34a基因與DNA甲基化的調(diào)控修飾可能參與了骨肉瘤的增殖發(fā)展過(guò)程。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of demethylation on the proliferation of human osteosarcoma cells and the expression of miRNA-34a in osteosarcoma by detecting the methylation level of miRNA-34a promoter in osteosarcoma, and to explore the regulation of the methylation of miRNA-34a promoter in osteosarcoma. Methods the expression of miRNA-34a in human osteosarcoma cell line MG-63 (SAOS-2) and osteoblast cell line hFOB1.19 was detected by real-time PCR. Matrix assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry (MALDI-TOF) was used to detect and compare the methylation levels of mi RNA-34a promoter in human osteosarcoma cells and osteoblasts, osteosarcoma wax masses and normal bone tissues. Human osteosarcoma cells were demethylated with 5-Aza-2-aza-cytidine Aza, and the growth status of human osteosarcoma cells after demethylation was observed. The expression of mi RNA-34a and the methylation level of its promoter in human osteosarcoma cells before and after demethylation were detected and analyzed. Results the expression of miRNA-34a in MG-63nSAOS-2 cells was significantly lower than that in hFOB1.19 cells, and the difference was statistically significant. The methylation level of the promoter CpG island of miRNA-34a gene was higher than that of hFOB1.19 cells, and the difference was statistically significant (P 0.05). The methylation level of CpG island promoter of miRNA-34a gene in osteosarcoma tissue was higher than that in normal bone tissue, and the difference was statistically significant. The expression of miRNA-34a was up-regulated, and the methylation level of CpG island of miRNA-34a was decreased. Conclusion the down-regulation of miRNA-34a gene expression in osteosarcoma may be related to the hypermethylation modification of the promoter, which may affect the biological inhibition of osteosarcoma. These results suggest that the regulatory modification of miRNA-34a gene and DNA methylation may be involved in the proliferation and development of osteosarcoma.
【學(xué)位授予單位】：寧夏醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R738.1

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 馮傳漢;群策群力進(jìn)一步開拓骨肉瘤研究[J];中華骨科雜志;2000年01期

2 孫福祥;168例骨肉瘤臨床分析[J];現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生;2002年01期

3 劉國(guó)榮,黃堯生;骨肉瘤的影像診斷[J];影像診斷與介入放射學(xué);2002年01期

4 郭喬楠,陳意生;骨肉瘤多藥耐藥的研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)綜述;2002年08期

5 莫曉東,楊敖霖;胃骨肉瘤1例報(bào)告[J];中國(guó)普外基礎(chǔ)與臨床雜志;2002年05期

6 王亞儒,賀志新,譚軍霞;腹壁骨肉瘤1例[J];中國(guó)腫瘤臨床;2003年06期

7 張立智,蔡宣松,梅炯;血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子與骨肉瘤的研究進(jìn)展[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).骨科學(xué)分冊(cè);2003年03期

8 徐春;骨肉瘤患者的心理支持[J];齊魯護(hù)理雜志;2004年10期

9 李林坤,張濤;皮質(zhì)旁骨肉瘤術(shù)后復(fù)發(fā)1例[J];中國(guó)醫(yī)學(xué)影像技術(shù);2005年10期

10 高紅;皮質(zhì)旁骨肉瘤一例[J];臨床放射學(xué)雜志;2005年03期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 石英愛(ài);高玉輝;趙強(qiáng);單玉興;;端粒延伸替代途徑在骨肉瘤中的表達(dá)及意義[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)病理學(xué)分會(huì)2009年學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2009年

2 李軍;范清宇;;骨肉瘤中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子表達(dá)及微血管密度與患者預(yù)后的關(guān)系[A];西部大開發(fā) 科教先行與可持續(xù)發(fā)展——中國(guó)科協(xié)2000年學(xué)術(shù)年會(huì)文集[C];2000年

3 程虹;張傳山;沈萬(wàn)安;張靜;馬福成;;低級(jí)別中央型骨肉瘤的臨床、影像學(xué)和病理學(xué)特點(diǎn)-附2例報(bào)道[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)病理學(xué)分會(huì)2006年學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2006年

4 袁軍;徐彬;;皮質(zhì)旁骨肉瘤2例報(bào)告[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十三屆全國(guó)放射學(xué)大會(huì)論文匯編（下冊(cè)）[C];2006年

5 吳培玲;;骨肉瘤的影像診斷[A];2003年全國(guó)醫(yī)學(xué)影像技術(shù)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2003年

6 孫成良;劉立成;高聿同;路小勇;;膝關(guān)節(jié)骨肉瘤切除人工關(guān)節(jié)置換的近期隨訪結(jié)果[A];第二屆華東地區(qū)骨科學(xué)術(shù)大會(huì)暨山東省第九次骨科學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2007年

7 張波;龐清江;章海均;袁義;;43例骨肉瘤患者預(yù)后的多因素分析[A];2013中國(guó)工程院科技論壇暨浙江省骨科學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2013年

8 吳春;徐艷;石群立;馬恒輝;夏春;;放療后顱骨骨肉瘤一例報(bào)告附文獻(xiàn)復(fù)習(xí)[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)病理學(xué)分會(huì)2010年學(xué)術(shù)年會(huì)日程及論文匯編[C];2010年

9 朱振華;徐剛;;兒童及青少年骨肉瘤的治療[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第八次全國(guó)小兒外科學(xué)術(shù)會(huì)論文集[C];2010年

10 房永宏;米哲濤;趙志勇;;基因重組人粒細(xì)胞集落刺激因子在骨肉瘤大劑量綜合化療中的臨床應(yīng)用研究[A];山西省抗癌協(xié)會(huì)第六屆腫瘤學(xué)術(shù)交流會(huì)論文匯編[C];2003年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 主任醫(yī)師 陳述長(zhǎng);患了骨肉瘤必須要截肢嗎[N];衛(wèi)生與生活報(bào);2007年

2 本報(bào)特約記者 管九蘋;骨肉瘤盯上青少年[N];保健時(shí)報(bào);2008年

3 董揚(yáng)邋張春林;正確對(duì)待骨肉瘤的治療[N];家庭醫(yī)生報(bào);2008年

4 主持：王健博士;骨肉瘤的綜合治療[N];上海中醫(yī)藥報(bào);2003年

5 保健時(shí)報(bào)記者 吳玲娟 實(shí)習(xí)記者 鄭雯;別把骨肉瘤當(dāng)成生長(zhǎng)痛[N];保健時(shí)報(bào);2007年

6 李曉麗;骨肉瘤青少年患者增多[N];大眾衛(wèi)生報(bào);2007年

7 方志偉;拿下骨肉瘤 也可不截肢[N];健康報(bào);2006年

8 采訪者 李運(yùn)紅邋胡顏 受訪專家：天津市腫瘤醫(yī)院骨與軟組織腫瘤科主任醫(yī)師 楊蘊(yùn);患骨肉瘤 怎樣保留肢體功能[N];健康報(bào);2007年

9 方志偉;青少年無(wú)原因骨痛時(shí)當(dāng)心骨肉瘤[N];農(nóng)村醫(yī)藥報(bào)（漢）;2007年

10 衣曉峰 靳萬(wàn)慶 李曉麗;兒童骨肉瘤患病率呈上升趨勢(shì)[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2007年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前3條

1 陳敏;基于直接電子傳遞型電化學(xué)免疫傳感器和微孔板式化學(xué)發(fā)光免疫分析法快速檢測(cè)骨肉瘤耐藥相關(guān)蛋白的研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2013年

2 黃國(guó)強(qiáng);抗人Ⅰ型和Ⅱ型膠原抗體在骨腫瘤病理中的初步應(yīng)用[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);1985年

3 李怡飛;擔(dān)載順鉑的納米微粒治療骨肉瘤的應(yīng)用研究[D];吉林大學(xué);2015年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 趙晨;骨肉瘤miRNA-34a基因啟動(dòng)子甲基化水平改變及其調(diào)控作用研究[D];寧夏醫(yī)科大學(xué);2017年

2 楊力;P糖蛋白與PCNA、CD34在骨肉瘤中的表達(dá)及臨床意義[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

3 李偉;相變高分子微球增效HIFU消融骨肉瘤的研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2015年

4 呂玲;碘標(biāo)記的血清蛋白釓納米探針用于原位骨肉瘤的MR/CT多模態(tài)成像[D];蘇州大學(xué);2016年

5 尹航;MPPa-PDT抑制骨肉瘤MG63細(xì)胞侵襲和遷移[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2017年

6 劉彥賓;水通道蛋白1在骨肉瘤中的表達(dá)和意義[D];山西醫(yī)科大學(xué);2008年

7 樓妍;骨肉瘤患者家屬壓力測(cè)定及影響因素分析[D];浙江大學(xué);2007年

8 劉守正;骨肉瘤中胸苷磷酸化酶的表達(dá)與血管生成的關(guān)系[D];蘭州大學(xué);2009年

9 李偉栩;骨肉瘤與血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子、基質(zhì)金屬蛋白酶2、9表達(dá)的相關(guān)性研究[D];浙江大學(xué);2002年

10 吳志峰;四肢骨肉瘤臨床治療研究及預(yù)后因素分析[D];吉林大學(xué);2013年

，

本文編號(hào)：1992244