本文選題：非小細胞肺癌 + 橋接整合因子　； 參考：《中國腫瘤生物治療雜志》2017年02期

【摘要】：目的:研究橋接整合因子1(bridging intergrator 1,Bin1)基因過表達后對非小細胞肺癌細胞株H1975細胞周期的影響及其作用機制。方法:構建攜帶Bin1基因的CMV-MCS-GFP-SV40-Neomycin-Bin1質粒,并轉染H1975細胞(Bin1~+組),另設置空白質粒轉染組(Bin1~-組)及空白對照組(Ctrl組),利用RT-PCR和Western blotting分別檢測3組細胞中Bin1在mRNA和蛋白質水平的表達情況。流式細胞術檢測不同處理組H1975細胞周期的變化,Western boltting分別檢測各組中AKT、mTOR磷酸化水平及細胞周期相關蛋白(周期蛋白D1、CDK4、Rb)的表達情況。結果:與Bin1~-組、Ctrl組比較,Bin1~+組H1975細胞中Bin1在mRNA、蛋白水平表達明顯上調(diào)(均P0.05);H1975細胞阻滯在G1期[(60.53±1.89)%vs(46.14±1.56)%、(47.33±2.07)%,均P0.05];Bin1~+組H1975細胞內(nèi)p-AKT、p-mTOR表達下調(diào)(均P0.05),AKT、mTOR表達變化無統(tǒng)計學差異(P0.05);周期蛋白D1、CDK4的表達量均明顯下調(diào)(P0.05),Rb表達量明顯增加(P0.05)。結論:Bin1基因在H1975細胞株過表達后明顯誘導細胞周期阻滯,其機制可能是通過抑制AKT-mTOR通路及其細胞周期相關蛋白實現(xiàn)的。
[Abstract]:Aim: to investigate the effect of over-expression of 1(bridging intergrator _ 1 / Bin1 gene on cell cycle of non-small cell lung cancer (NSCLC) cell line H1975 and its mechanism. Methods: the CMV-MCS-GFP-SV40-Neomycin-Bin1 plasmid carrying Bin1 gene was constructed and transfected into H1975 cell line Bin1- group, and the blank plasmid was added to the control group. The expression of Bin1 in mRNA and protein was detected by RT-PCR and Western blotting, respectively. The changes of H1975 cell cycle in different treatment groups were detected by flow cytometry. The phosphorylation level of AKTnmTOR and the expression of cyclin D1- CDK4- Rb were detected by Western boltting. Results: compared with BIN1M-Ctrl group, the expression of Bin1 in H1975 cells in Bin1 ~ group was significantly up-regulated (P0.05 + H1975 cells were blocked in G1 phase [60.53 鹵1.89)%vs(46.14 鹵1.560.33 鹵2.07, P0.05]. There was no significant difference in the expression of p-AKTmTOR in H1975 cells (P 0.05). The expression of CDK4 in D1 was significantly decreased, and the expression of RB in P0. 05 was significantly increased. Conclusion the cell cycle arrest induced by the overexpression of the cell line is probably due to the inhibition of the AKT-mTOR pathway and its cell cycle associated proteins.
【作者單位】： 河北醫(yī)科大學第四醫(yī)院生物治療科;
【基金】：國家自然科學基金青年科學基金資助項目(No.81201607) 河北省杰出青年基金資助項目(No.H2014206320) 河北省高層次人才培養(yǎng)項目資助(No.A201401040)~~
【分類號】：R734.2

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本文編號：1985905