本文選題：非小細(xì)胞肺癌 + 橋接整合因子��； 參考：《中國(guó)腫瘤生物治療雜志》2017年02期

【摘要】：目的:研究橋接整合因子1(bridging intergrator 1,Bin1)基因過(guò)表達(dá)后對(duì)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株H1975細(xì)胞周期的影響及其作用機(jī)制。方法:構(gòu)建攜帶Bin1基因的CMV-MCS-GFP-SV40-Neomycin-Bin1質(zhì)粒,并轉(zhuǎn)染H1975細(xì)胞(Bin1~+組),另設(shè)置空白質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組(Bin1~-組)及空白對(duì)照組(Ctrl組),利用RT-PCR和Western blotting分別檢測(cè)3組細(xì)胞中Bin1在mRNA和蛋白質(zhì)水平的表達(dá)情況。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)不同處理組H1975細(xì)胞周期的變化,Western boltting分別檢測(cè)各組中AKT、mTOR磷酸化水平及細(xì)胞周期相關(guān)蛋白(周期蛋白D1、CDK4、Rb)的表達(dá)情況。結(jié)果:與Bin1~-組、Ctrl組比較,Bin1~+組H1975細(xì)胞中Bin1在mRNA、蛋白水平表達(dá)明顯上調(diào)(均P0.05);H1975細(xì)胞阻滯在G1期[(60.53±1.89)%vs(46.14±1.56)%、(47.33±2.07)%,均P0.05];Bin1~+組H1975細(xì)胞內(nèi)p-AKT、p-mTOR表達(dá)下調(diào)(均P0.05),AKT、mTOR表達(dá)變化無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05);周期蛋白D1、CDK4的表達(dá)量均明顯下調(diào)(P0.05),Rb表達(dá)量明顯增加(P0.05)。結(jié)論:Bin1基因在H1975細(xì)胞株過(guò)表達(dá)后明顯誘導(dǎo)細(xì)胞周期阻滯,其機(jī)制可能是通過(guò)抑制AKT-mTOR通路及其細(xì)胞周期相關(guān)蛋白實(shí)現(xiàn)的。
[Abstract]:Aim: to investigate the effect of over-expression of 1(bridging intergrator _ 1 / Bin1 gene on cell cycle of non-small cell lung cancer (NSCLC) cell line H1975 and its mechanism. Methods: the CMV-MCS-GFP-SV40-Neomycin-Bin1 plasmid carrying Bin1 gene was constructed and transfected into H1975 cell line Bin1- group, and the blank plasmid was added to the control group. The expression of Bin1 in mRNA and protein was detected by RT-PCR and Western blotting, respectively. The changes of H1975 cell cycle in different treatment groups were detected by flow cytometry. The phosphorylation level of AKTnmTOR and the expression of cyclin D1- CDK4- Rb were detected by Western boltting. Results: compared with BIN1M-Ctrl group, the expression of Bin1 in H1975 cells in Bin1 ~ group was significantly up-regulated (P0.05 + H1975 cells were blocked in G1 phase [60.53 鹵1.89)%vs(46.14 鹵1.560.33 鹵2.07, P0.05]. There was no significant difference in the expression of p-AKTmTOR in H1975 cells (P 0.05). The expression of CDK4 in D1 was significantly decreased, and the expression of RB in P0. 05 was significantly increased. Conclusion the cell cycle arrest induced by the overexpression of the cell line is probably due to the inhibition of the AKT-mTOR pathway and its cell cycle associated proteins.
【作者單位】： 河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院生物治療科;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金青年科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.81201607) 河北省杰出青年基金資助項(xiàng)目(No.H2014206320) 河北省高層次人才培養(yǎng)項(xiàng)目資助(No.A201401040)~~
【分類號(hào)】：R734.2

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本文編號(hào)：1985905