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bFGF刺激NF-κB活化誘導人胃癌MGC-803細胞對貝伐珠單抗耐藥

發(fā)布時間:2018-06-03 22:48

  本文選題:堿性成纖維生長因子 + 核轉錄因子κB ; 參考:《南華大學》2016年碩士論文


【摘要】:目的:探索堿性成纖維生長因子(bFGF)是否可誘導人胃癌MGC-803細胞對貝伐珠單抗耐藥及其作用機制。方法:1、探索堿性成纖維因子(bFGF)是否可誘導人胃癌MGC-803細胞對貝伐珠單抗耐藥。實驗分為三組:正常對照組、藥物組、實驗組。a、正常對照組為人胃癌MGC-803細胞;b、藥物組為貝伐珠單抗(22ng/ml)處理人胃癌MGC-803細胞12小時;c、實驗組為bFGF(30ng/ml)處理人胃癌MGC-803細胞12小時后,再予以貝伐珠單抗(22ng/ml)處理12小時。CCK-8法檢測人胃癌MGC-803細胞的增殖抑制情況。2、探索bFGF誘導人胃癌MGC-803細胞對貝伐珠單抗耐藥的機制。實驗分為三組:實驗組、陰性對照組、陽性對照組。a、實驗組為bFGF(30ng/ml)預處理人胃癌MGC-803細胞12小時,再予以貝伐珠單抗(22ng/ml)處理12小時;b、陰性對照組為bFGF(30ng/ml)預處理人胃癌MGC-803細胞12小時,加入NF-κB抑制劑二硫氨基甲酸酞吡咯烷(PDTC)(10μmol/L)處理30分鐘,再加入貝伐珠單抗(22ng/ml)作用12小時;c、陽性對照組為NF-κB激動劑腫瘤壞死因子α(TNF-α)(30ng/ml)預處理人胃癌MGC-803細胞30分鐘,再加入貝伐珠單抗(22ng/ml)作用12小時。Western Blot法檢測MGC-803細胞核內及細胞質內NF-κB蛋白的表達情況;用免疫細胞化學法觀察nf-κb核轉位(活化)情況。結果:1、藥物組經貝伐珠單抗處理12小時后,人胃癌mgc-803細胞的相對活力明顯下降,貝伐珠單抗可抑制人胃癌mgc-803細胞的增殖。而經bfgf預處理12小時后,人胃癌mgc-803細胞的相對活力較藥物組明顯增加,其對貝伐珠單抗的敏感性明顯下降;2、經bfgf預處理12小時的人胃癌mgc-803細胞,在nf-κb抑制劑pdtc的作用下,細胞的相對活力較單純bfgf處理12小時的細胞明顯下降,細胞對貝伐珠單抗的敏感性明顯增加,pdtc可逆轉bfgf誘導人胃癌mgc-803細胞對貝伐珠單抗耐藥;經nf-κb激動劑tnf-α處理30分鐘后,人胃癌mgc-803細胞的相對活力較單純貝伐珠單抗處理12小時的細胞明顯增加,細胞對貝伐珠單抗的敏感性明顯下降;3、經bfgf預處理12小時后的細胞及經nf-κb激動劑tnf-α預處理30分鐘后的細胞核內的nf-κb蛋白表達較單純貝伐珠單抗處理12小時的細胞明顯增加,而細胞質內的nf-κb蛋白的表達則恰好相反,bfgf與tnf-α一樣,可誘導nf-κb活化(核轉位);經bfgf預處理12小時的人胃癌mgc-803細胞,在nf-κb抑制劑pdtc作用30分鐘后,細胞核內的nf-κb蛋白的表達較單純bfgf處理12小時的細胞明顯下降,細胞質內的nf-κb蛋白表達則明顯增加,pdtc可逆轉bfgf誘導nf-κb活化(核轉位);4、經bfgf處理12小時的細胞及經nf-κb激動劑tnf-α處理30分鐘的細胞胞核平均光密度值較單純貝伐珠單抗處理12小時的細胞明顯增加,說明bFGF與TNF-α一樣,可誘導NF-κB核轉位(活化);bFGF預處理12小時的細胞,在NF-κB抑制劑PDTC作用30分鐘后,細胞核的平均光密度值較單純bFGF處理12小時的細胞明顯減少,提示PDTC可逆轉NF-κB核轉位(活化)。結論:bFGF可能通過刺激NF-κB活化從而誘導人胃癌MGC-803細胞對貝伐珠單抗耐藥。
[Abstract]:Objective : To investigate whether basic fibroblast growth factor ( bFGF ) can induce gastric cancer MGC - 803 cells to resist drug resistance in human gastric cancer MGC - 803 cells . NF - 魏B activation ( nuclear translocation ) was induced by bfgf in 12 hours after treatment with bfgf . The expression of nf - 魏B protein in the nucleus was significantly decreased after 30 minutes of NF - 魏B inhibitor pdtc . The results showed that bFGF could induce NF - 魏B activation . Conclusion : bFGF could induce NF - 魏B activation and induce the resistance of human gastric cancer MGC - 803 cells to be resistant to Bfgf . Conclusion : bFGF may induce NF - 魏B activation .
【學位授予單位】:南華大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2016
【分類號】:R735.2

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本文編號:1974552

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