本文選題：堿性成纖維生長因子 + 核轉(zhuǎn)錄因子κB��； 參考：《南華大學(xué)》2016年碩士論文

【摘要】：目的:探索堿性成纖維生長因子(bFGF)是否可誘導(dǎo)人胃癌MGC-803細(xì)胞對貝伐珠單抗耐藥及其作用機制。方法:1、探索堿性成纖維因子(bFGF)是否可誘導(dǎo)人胃癌MGC-803細(xì)胞對貝伐珠單抗耐藥。實驗分為三組:正常對照組、藥物組、實驗組。a、正常對照組為人胃癌MGC-803細(xì)胞;b、藥物組為貝伐珠單抗(22ng/ml)處理人胃癌MGC-803細(xì)胞12小時;c、實驗組為bFGF(30ng/ml)處理人胃癌MGC-803細(xì)胞12小時后,再予以貝伐珠單抗(22ng/ml)處理12小時。CCK-8法檢測人胃癌MGC-803細(xì)胞的增殖抑制情況。2、探索bFGF誘導(dǎo)人胃癌MGC-803細(xì)胞對貝伐珠單抗耐藥的機制。實驗分為三組:實驗組、陰性對照組、陽性對照組。a、實驗組為bFGF(30ng/ml)預(yù)處理人胃癌MGC-803細(xì)胞12小時,再予以貝伐珠單抗(22ng/ml)處理12小時;b、陰性對照組為bFGF(30ng/ml)預(yù)處理人胃癌MGC-803細(xì)胞12小時,加入NF-κB抑制劑二硫氨基甲酸酞吡咯烷(PDTC)(10μmol/L)處理30分鐘,再加入貝伐珠單抗(22ng/ml)作用12小時;c、陽性對照組為NF-κB激動劑腫瘤壞死因子α(TNF-α)(30ng/ml)預(yù)處理人胃癌MGC-803細(xì)胞30分鐘,再加入貝伐珠單抗(22ng/ml)作用12小時。Western Blot法檢測MGC-803細(xì)胞核內(nèi)及細(xì)胞質(zhì)內(nèi)NF-κB蛋白的表達情況;用免疫細(xì)胞化學(xué)法觀察nf-κb核轉(zhuǎn)位(活化)情況。結(jié)果:1、藥物組經(jīng)貝伐珠單抗處理12小時后,人胃癌mgc-803細(xì)胞的相對活力明顯下降,貝伐珠單抗可抑制人胃癌mgc-803細(xì)胞的增殖。而經(jīng)bfgf預(yù)處理12小時后,人胃癌mgc-803細(xì)胞的相對活力較藥物組明顯增加,其對貝伐珠單抗的敏感性明顯下降;2、經(jīng)bfgf預(yù)處理12小時的人胃癌mgc-803細(xì)胞,在nf-κb抑制劑pdtc的作用下,細(xì)胞的相對活力較單純bfgf處理12小時的細(xì)胞明顯下降,細(xì)胞對貝伐珠單抗的敏感性明顯增加,pdtc可逆轉(zhuǎn)bfgf誘導(dǎo)人胃癌mgc-803細(xì)胞對貝伐珠單抗耐藥;經(jīng)nf-κb激動劑tnf-α處理30分鐘后,人胃癌mgc-803細(xì)胞的相對活力較單純貝伐珠單抗處理12小時的細(xì)胞明顯增加,細(xì)胞對貝伐珠單抗的敏感性明顯下降;3、經(jīng)bfgf預(yù)處理12小時后的細(xì)胞及經(jīng)nf-κb激動劑tnf-α預(yù)處理30分鐘后的細(xì)胞核內(nèi)的nf-κb蛋白表達較單純貝伐珠單抗處理12小時的細(xì)胞明顯增加,而細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的nf-κb蛋白的表達則恰好相反,bfgf與tnf-α一樣,可誘導(dǎo)nf-κb活化(核轉(zhuǎn)位);經(jīng)bfgf預(yù)處理12小時的人胃癌mgc-803細(xì)胞,在nf-κb抑制劑pdtc作用30分鐘后,細(xì)胞核內(nèi)的nf-κb蛋白的表達較單純bfgf處理12小時的細(xì)胞明顯下降,細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的nf-κb蛋白表達則明顯增加,pdtc可逆轉(zhuǎn)bfgf誘導(dǎo)nf-κb活化(核轉(zhuǎn)位);4、經(jīng)bfgf處理12小時的細(xì)胞及經(jīng)nf-κb激動劑tnf-α處理30分鐘的細(xì)胞胞核平均光密度值較單純貝伐珠單抗處理12小時的細(xì)胞明顯增加,說明bFGF與TNF-α一樣,可誘導(dǎo)NF-κB核轉(zhuǎn)位(活化);bFGF預(yù)處理12小時的細(xì)胞,在NF-κB抑制劑PDTC作用30分鐘后,細(xì)胞核的平均光密度值較單純bFGF處理12小時的細(xì)胞明顯減少,提示PDTC可逆轉(zhuǎn)NF-κB核轉(zhuǎn)位(活化)。結(jié)論:bFGF可能通過刺激NF-κB活化從而誘導(dǎo)人胃癌MGC-803細(xì)胞對貝伐珠單抗耐藥。
[Abstract]:Objective : To investigate whether basic fibroblast growth factor ( bFGF ) can induce gastric cancer MGC - 803 cells to resist drug resistance in human gastric cancer MGC - 803 cells . NF - 魏B activation ( nuclear translocation ) was induced by bfgf in 12 hours after treatment with bfgf . The expression of nf - 魏B protein in the nucleus was significantly decreased after 30 minutes of NF - 魏B inhibitor pdtc . The results showed that bFGF could induce NF - 魏B activation . Conclusion : bFGF could induce NF - 魏B activation and induce the resistance of human gastric cancer MGC - 803 cells to be resistant to Bfgf . Conclusion : bFGF may induce NF - 魏B activation .
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R735.2

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本文編號：1974552