Smad1在胃腺癌組織中的表達(dá)及對(duì)胃腺癌細(xì)胞遷移能力的影響研究
本文選題:胃腺癌 + Akt信號(hào)通路; 參考:《中國(guó)免疫學(xué)雜志》2017年06期
【摘要】:目的:研究Smad1在胃腺癌組織中的表達(dá)及對(duì)胃腺癌細(xì)胞遷移能力的影響。方法:提取收集的胃腺癌組織及對(duì)應(yīng)的癌旁組織中的蛋白,Western blot檢測(cè)Smad1的表達(dá)水平。以胃腺癌細(xì)胞HGC-27為研究對(duì)象,細(xì)胞轉(zhuǎn)染過(guò)表達(dá)Smad1的載體(p-EGFP-C1/Smad1)和Smad1小干擾RNA(Smad1 siRNA),同時(shí)轉(zhuǎn)染p-EGFP-C1和siRNA control為對(duì)照。細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移能力。Western blot檢測(cè)細(xì)胞中MMP-9、MMP-2、p-Akt、Akt的表達(dá)水平。Akt信號(hào)通路抑制劑LY294002(20μg/ml)作用于胃腺癌細(xì)胞HGC-27,MTT檢測(cè)細(xì)胞增殖情況,細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移能力。Western blot檢測(cè)MMP-9、MMP-2、p-Akt、Akt蛋白表達(dá)水平。結(jié)果:胃腺癌組織中Smad1的水平明顯低于癌旁組織(P0.01)。p-EGFP-C1/Smad1組細(xì)胞存活率和遷移率均明顯低于p-EGFP-C1組(P0.01)。Smad1 siRNA組細(xì)胞存活率和遷移率均明顯高于siRNA control組(P0.01)。p-EGFP-C1、p-EGFP-C1/Smad1、siRNA control、Smad1 siRNA組細(xì)胞中Akt蛋白表達(dá)水平?jīng)]有變化。p-EGFP-C1/Smad1組細(xì)胞MMP-9、MMP-2、p-Akt蛋白表達(dá)水平明顯低于p-EGFP-C1組(P0.01)。Smad1 siRNA組細(xì)胞MMP-9、MMP-2、p-Akt蛋白表達(dá)水平明顯高于siRNA control(P0.01)。胃腺癌細(xì)胞與Akt信號(hào)通路抑制劑作用后細(xì)胞增殖和遷移趨勢(shì)與p-EGFP-C1/Smad1組一致。結(jié)論:Smad1在胃腺癌組織中低表達(dá)。Smad1能夠抑制胃腺癌細(xì)胞增殖和遷移,作用機(jī)制與Akt信號(hào)通路有關(guān)。
[Abstract]:Aim: to study the expression of Smad1 in gastric adenocarcinoma tissues and its effect on the migration ability of gastric adenocarcinoma cells. Methods: Western blot was used to detect the expression of Smad1 in gastric adenocarcinoma tissues and adjacent tissues. Gastric adenocarcinoma cells (HGC-27) were transfected with pEGFP-C1 / Smad1) and Smad1 small interfering RNA(Smad1 siRNAs, and p-EGFP-C1 and siRNA control were transfected as controls. The effect of LY294002(20 渭 g / ml, an Akt signaling pathway inhibitor, on the proliferation of gastric adenocarcinoma cells was detected by HGC-27MTT assay. Western blot was used to detect the expression level of MMP-9, MMP-2MMP, p-AktAMT, and LY294002(20 渭 g / ml, an inhibitor of Akt signaling pathway, to detect the proliferation of gastric adenocarcinoma cells. The cell migration ability was detected by cell scratch assay. The expression of MMP-9 and MMP-2p-Akt protein was detected by Western blot. Results: the level of Smad1 in gastric adenocarcinoma tissues was significantly lower than that in the adjacent tissues (P 0.01). P-EGFP-C 1 / Smad1 group. The cell survival rate and migration rate were significantly lower than those in the p-EGFP-C1 group P0.01 Smad1 siRNA group. P-EGFP-C1p-EGFP-C1% Smad1 siRNA control Smad1 siRNA group was significantly higher than the siRNA control group in cell viability and mobility. The expression level of MMP-9, MMP-2mp-Akt protein in the pEGFP-C1 / Smad1 group was significantly lower than that in the p-EGFP-C1 group (P0.01and Smad1 siRNA group), and the expression level of MMP-9MP-Akt protein was significantly higher than that in the siRNA control group (P0.01). The proliferation and migration of gastric adenocarcinoma cells treated with Akt signaling pathway inhibitor were consistent with those of p-EGFP-C1/Smad1 group. Conclusion the low expression of Smad1 in gastric adenocarcinoma can inhibit the proliferation and migration of gastric adenocarcinoma cells, and the mechanism is related to the Akt signaling pathway.
【作者單位】: 河北醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院病理科;河北醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院骨科;
【基金】:河北省衛(wèi)計(jì)委青年科技課題(20150642)項(xiàng)目
【分類(lèi)號(hào)】:R735.2
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本文編號(hào):1963217
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