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CCND1表達沉默促進膠質(zhì)母細胞瘤細胞株對替莫唑胺的敏感性

發(fā)布時間:2018-05-23 09:24

  本文選題:細胞周期蛋白D基因 + 膠質(zhì)母細胞瘤 ; 參考:《第二軍醫(yī)大學學報》2017年12期


【摘要】:目的利用已構(gòu)建的CCND1表達沉默及過表達的人源性膠質(zhì)母細胞瘤細胞株SHG-44,篩選能夠與CCND1協(xié)同抑制膠質(zhì)母細胞瘤細胞增殖的化學治療藥物。方法用蛋白質(zhì)印跡法檢測CCND1表達沉默及過表達的人源性膠質(zhì)母細胞瘤細胞株SHG-44中多藥耐藥基因MDR1的表達產(chǎn)物P-糖蛋白(P-gp)及凋亡因子Bcl-2、Caspase-3的表達。使用卡莫司汀(BCNU)、洛莫司汀(CCNU)、替莫唑胺(TMZ)3種化學治療藥物分別處理CCND1過表達或表達沉默的SHG-44細胞,篩選能夠與CCND1表達沉默協(xié)同抑制腫瘤細胞生長的化學治療藥物,并在人源性膠質(zhì)母細胞瘤細胞株系U251中進一步驗證。結(jié)果蛋白質(zhì)印跡結(jié)果示CCND1表達沉默能夠下調(diào)P-gp、Bcl-2的表達,上調(diào)Caspase-3的表達(P均0.01)。BCNU(0.05、0.25μg/mL)、CCNU(20、80μg/mL)處理CCND1過表達或表達沉默的SHG-44細胞的第2、3、4、5天時,細胞生長曲線的差異均無統(tǒng)計學意義;而在藥物處理后細胞培養(yǎng)的第4、5天,CCND1表達沉默SHG-44細胞的生長受到TMZ(9.1μg/mL)的抑制作用較親代SHG-44細胞強(P0.05)。U251細胞實驗證實CCND1表達沉默促進TMZ的化學治療敏感性。結(jié)論 CCND1表達沉默聯(lián)合TMZ較兩者單獨作用能更有效地抑制人源性膠質(zhì)母細胞瘤細胞株SHG-44的增殖,提示CCND1可能參與TMZ化學治療耐藥機制。
[Abstract]:Objective to screen the chemotherapeutic drugs which can inhibit the proliferation of glioblastoma cells in cooperation with CCND1 by using SHG-44, a human glioblastoma cell line with silencing and overexpression of CCND1. Methods the expression of multidrug resistance gene (MDR1) and apoptosis factor Bcl-2Caspase-3 in human glioblastoma cell line SHG-44 were detected by Western blot. Three chemotherapeutic agents, Carmosine, Lomoxetine, and temozolidazole, were used to treat SHG-44 cells with overexpression or silencing of CCND1, respectively, and to screen chemotherapeutic drugs which could inhibit the growth of tumor cells synergistically with CCND1 expression silencing. It was further verified in human glioblastoma cell line U251. Results Western blotting showed that CCND1 expression silencing could down-regulate the expression of P-gpnc-Bcl-2, and there was no significant difference in the growth curve of SHG-44 cells with CCND1 overexpression or silencing on the 2nd day after treatment of CCND1 overexpression or silencing SHG-44 cells (P < 0.01, P = 0.05, P < 0.05 or 0.25 渭 g / mL). On the 5th day after drug treatment, the growth of SHG-44 cells was inhibited by TMZ(9.1 渭 g / mL. the results showed that CCND1 expression silencing promoted the chemotherapeutic sensitivity of TMZ. Conclusion CCND1 expression silencing combined with TMZ can inhibit the proliferation of human glioblastoma cell line SHG-44 more effectively than both alone, suggesting that CCND1 may be involved in the mechanism of TMZ chemotherapeutic resistance.
【作者單位】: 第二軍醫(yī)大學長征醫(yī)院神經(jīng)外科上海市神經(jīng)外科研究所;火箭軍總醫(yī)院普外科;
【分類號】:R739.4

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