發(fā)布時間：2018-05-17 05:25

  本文選題：肝細胞癌 + Cripto-1　； 參考：《安徽醫(yī)科大學(xué)》2015年碩士論文

【摘要】：[背景]肝癌是常見的消化系統(tǒng)腫瘤,低手術(shù)切除率和術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移使其成為病死率最高的惡性腫瘤之一,所以對肝癌侵襲轉(zhuǎn)移方面的研究成為當前肝癌研究的熱點。Cripto-1基因是一種在胚胎干細胞中表達并對其維持自我更新能力至關(guān)重要的調(diào)控基因。最新研究發(fā)現(xiàn)Cripto-1的表達在多種腫瘤中重新出現(xiàn),并調(diào)控腫瘤的增殖、侵襲、血管生成和EMT (epithelial-mesenchymal transition,內(nèi)皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化)等重要事件。因此,研究Cripto-1對肝癌侵襲轉(zhuǎn)移的影響,對探索肝癌的惡性進展機制以及尋找肝癌治療的新靶點具有重要意義。[目的] (1)分析Cripto-1蛋白和mRNA在不同轉(zhuǎn)移潛能人肝癌細胞株、肝癌及癌旁組織中的表達水平,探討Cripto-1與肝癌侵襲轉(zhuǎn)移能力之間的關(guān)系。(2)檢測肝癌組織中Cripto-1蛋白的表達,分析Cripto-1蛋白表達水平與肝癌臨床病理特征的相關(guān)性,探討Cripto-1在肝癌的惡性進展和侵襲轉(zhuǎn)移過程中的作用。(3)檢測Cripto-1過表達肝癌細胞株中EMT相關(guān)標志物和細胞運動能力的變化,探討Cripto-1促進肝癌侵襲轉(zhuǎn)移的分子機制。[方法] (1)通過Western Blot、qPCR (Real-time Quantitative PCR,實時定量PCR)方法,檢測不同轉(zhuǎn)移潛能人肝癌細胞株、肝癌及癌旁組織中Cripto-1的表達水平,分別從蛋白和mRNA水平比較其表達水平與肝癌侵襲轉(zhuǎn)移間的關(guān)系。(2)通過免疫組織化學(xué)染色檢測肝癌患者組織中Cripto-1蛋白的表達并探討其表達與肝癌臨床病理特征之間的關(guān)系。(3)通過重組慢病毒轉(zhuǎn)染技術(shù)構(gòu)建Cripto-1過表達的人肝癌Huh7細胞株,并通過Transwell遷移和侵襲實驗檢測Cripto-1過表達對Huh7細胞株的運動能力的影響。(4)通過qPCR、Westren Blot方法檢測Cripto-1過表達對Huh7細胞株EMT標志物表達的影響。[結(jié)果] (1)與癌旁組織相比,肝癌組織中Cripto-1的蛋白和mRNA表達水平均明顯升高。不同轉(zhuǎn)移潛能的人肝癌細胞株中Cripto-1表達量存在明顯差異。低轉(zhuǎn)移潛能的人肝癌細胞株Cripto-1低表達,高轉(zhuǎn)移潛能人肝癌細胞株Cripto-1高表達。(2)免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示：Cripto-1在肝癌組織中的表達主要定位于胞漿中,Cripto-1在肝癌組織中的高表達率為64.6%(53/82),明顯高于正常肝組織中的0%(0/10)。Cripto-1在肝癌組織中的高表達與腫瘤分化程度、血管侵犯和轉(zhuǎn)移狀態(tài)有關(guān)(P0.05),而與患者性別、年齡、血清AFP水平、HBsAg狀態(tài)、肝硬化及腫瘤的大小、數(shù)目、包膜情況和TNM分級等無明顯相關(guān)性(P0.05)。(3) Transwell小室遷移侵襲實驗結(jié)果顯示：Cripto-1過表達Huh7細胞株穿過Transwell小室的細胞數(shù)目明顯高于空白對照組和空載病毒轉(zhuǎn)染組Huh7細胞株(p0.05)。(4) Cripto-1過表達Huh7細胞株與空載病毒轉(zhuǎn)染組Huh7細胞株相比EMT標志物表達情況存在明顯差異。Cripto-1過表達Huh7細胞株中上皮細胞標志物E-Cadherin表達量降低,而間質(zhì)細胞標志物N-Cadherin和Vimentin表達量升高。[結(jié)論]Cripto-1在肝癌中高表達,并且其表達量與肝癌的侵襲轉(zhuǎn)移能力呈正相關(guān)。Cripto-1過表達Huh7細胞株表現(xiàn)出EMT趨勢,并且獲得了更強的侵襲轉(zhuǎn)移能力,Cripto-1可能通過促進肝癌的EMT進程使其獲得更強的侵襲轉(zhuǎn)移能力。
[Abstract]:Objective : To investigate the relationship between the expression level of Crispr - 1 protein and its expression level in hepatocellular carcinoma ( HCC ) , and to investigate the relationship between the expression level of Crispr - 1 and the invasion and metastasis of liver cancer . ( 2 ) The expression of Crispr - 1 in HCC tissues was significantly higher than that in normal liver tissues ( P 0.05 ) .
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R735.7

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 李雁,湯釗猷,葉勝龍,劉銀坤,陳潔,薛瓊,黃曉武,陳軍,鮑衛(wèi)華,楊炯,高東梅;體內(nèi)連續(xù)篩選法建立自發(fā)性肺轉(zhuǎn)移人肝癌細胞系[J];中華醫(yī)學(xué)雜志;2002年09期

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本文編號：1900113