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基于豬細(xì)小病毒病毒樣顆粒的結(jié)腸癌靶向納米載體的構(gòu)建

發(fā)布時(shí)間:2018-05-11 05:28

  本文選題:TK肽 + 納米載體 ; 參考:《微生物學(xué)通報(bào)》2017年10期


【摘要】:【目的】獲得具有結(jié)腸靶向的納米載體。【方法】采用SOE-PCR方法將具有結(jié)腸靶向的TK肽序列插入到豬細(xì)小病毒(PPV)結(jié)構(gòu)蛋白VP2的環(huán)2和環(huán)4區(qū)域得到TK-vp2(?vp2)基因,在Bac-to-Bac?桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)中構(gòu)建、表達(dá)和自組裝。【結(jié)果】通過(guò)SOE-PCR方法擴(kuò)增獲得?vp2基因,在Bac-to-Bac?桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)中構(gòu)建得到Bacmid-?vp2,經(jīng)脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染至Sf9昆蟲(chóng)細(xì)胞得到重組桿狀病毒。直接免疫熒光試驗(yàn)、SDS-PAGE和Western blot檢測(cè)結(jié)果表明?VP2蛋白在Bac-to-Bac?桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)中獲得融合表達(dá),目的蛋白約70 k D;透射電子顯微鏡結(jié)果顯示?VP2能自組裝形成病毒樣顆粒(TK-VLPs),直徑范圍在22 nm-30 nm!窘Y(jié)論】獲得納米載體TK-VLPs,為進(jìn)一步研究其作為結(jié)腸靶向的納米載體奠定物質(zhì)基礎(chǔ)。
[Abstract]:[objective] to obtain colon-targeting nanocarriers. [methods] the colon-targeted TK peptide sequence was inserted into the ring 2 and ring 4 region of porcine parvovirus (PPV) structural protein VP2 by SOE-PCR method, and the TK-vp2 / VP2) gene was obtained in Bac-to-Bac. The baculovirus expression system was constructed, expressed and self-assembled. [results] VP2 gene was amplified by SOE-PCR. Bacmid-VP2 was constructed from baculovirus expression system and transfected into Sf9 insect cells by liposome to obtain recombinant baculovirus. The results of SDS-PAGE and Western blot showed that VP2 protein was detected in Bac-to-Bac. Fusion expression was obtained in baculovirus expression system. The results of transmission electron microscopy (TEM) showed that VP2 could self-assemble into virus-like particles TK-VLPsN with a diameter range of 22 nm-30 nm. [conclusion] Nano-carrier TK-VLPswas obtained, which laid a solid foundation for further study of its role as colon-targeted nano-carrier.
【作者單位】: 黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué);哈爾濱醫(yī)科大學(xué);
【基金】:黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)研究生創(chuàng)新科研資助項(xiàng)目(No.YJSCX2016-Y22) 黑龍江省自然基金-青年項(xiàng)目(No.QC2013C029) 哈爾濱醫(yī)科大學(xué)伍連德基金(No.WLD-QN1111)~~
【分類號(hào)】:Q78;R73-36

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2 王,

本文編號(hào):1872590


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