發(fā)布時(shí)間：2018-05-05 20:23

  本文選題：大腸癌 + miRNA-331　； 參考：《安徽醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：目的:將人大腸癌細(xì)胞株HCT116進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),再進(jìn)行miRNA-331mimics轉(zhuǎn)染,采用平板克隆形成實(shí)驗(yàn)、MTT法和Transwell小室實(shí)驗(yàn)檢測(cè)miRNA-331對(duì)人大腸癌細(xì)胞HCT116的增殖能力、克隆形成、遷移能力、侵襲能力的影響。闡明miRNA-331對(duì)大腸癌的發(fā)生、發(fā)展的影響,探討miRNA-331作為腫瘤基因標(biāo)記物對(duì)大腸癌診斷的價(jià)值,為大腸癌的早期診斷、早期治療提供理論和依據(jù)。方法:1、選取中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué)生命科學(xué)院分子病理實(shí)驗(yàn)室提供的大腸癌細(xì)胞株HCT116進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。2、將HCT116細(xì)胞進(jìn)行miRNA-331mimics轉(zhuǎn)染,設(shè)實(shí)驗(yàn)組(轉(zhuǎn)染miRNA-331mimics組)和對(duì)照組(negative control,NC)。3、應(yīng)用平板克隆形成實(shí)驗(yàn)觀察轉(zhuǎn)染miRNA-331mimics后HCT116細(xì)胞集落形成情況。4、采用MTT法觀察轉(zhuǎn)染miRNA-331mimics后第1天、第2天、第3天、第4天、第5天分別檢測(cè)5個(gè)同一時(shí)段的OD值,并繪制細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線。5、通過Transwell小室實(shí)驗(yàn)觀察HCT116細(xì)胞轉(zhuǎn)染miRNA-331mimics后其遷移能力及侵襲能力的變化。6、采用SPSS20.0軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)對(duì)比分析,數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,兩組間配對(duì)樣本采用配對(duì)t檢驗(yàn),兩組間獨(dú)立樣本采用非配對(duì)t檢驗(yàn),均以P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果:1、在平板克隆形成實(shí)驗(yàn)中,兩組間細(xì)胞集落形成的數(shù)量和體積均有明顯差異,實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞集落形成數(shù)量較對(duì)照組減少,集落形成體積明顯小于對(duì)照組。2、HCT116細(xì)胞轉(zhuǎn)染mi RNA-331mimics后第1天、2天、3天、4天、5天,采用MTT比色分析法檢測(cè)OD值,實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組結(jié)果分別為第1天:(0.08±0.07、0.10±0.08),(t=-3.42,P0.05);第2天:(0.11±0.01、0.16±0.04),(t=-3.33,P0.05);第3天:(0.39±0.10、0.62±0.21),(t=-2.49,P0.05);第4天:(0.75±0.10、1.20±1.94),(t=-5.05,P0.05);第5天:(1.13±0.23、2.23±0.30),(t=-7.19,P0.05)。通過對(duì)比發(fā)現(xiàn)隨著HCT116細(xì)胞中miRNA-331mimics的含量增多可抑制細(xì)胞的增殖,結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3、HCT116細(xì)胞轉(zhuǎn)染miRNA-331mimics后,通過Transwell實(shí)驗(yàn)觀察發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞進(jìn)入下方培養(yǎng)液數(shù)量減少,表明轉(zhuǎn)染后的HCT116細(xì)胞的遷移能力減弱。4、HCT116細(xì)胞轉(zhuǎn)染miRNA-331mimics后,通過Transwell實(shí)驗(yàn)觀察實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組均未發(fā)現(xiàn)細(xì)胞進(jìn)入下方培養(yǎng)液中,兩組結(jié)果為陰性,表明轉(zhuǎn)染后的HCT116細(xì)胞的侵襲能力無(wú)明顯變化。結(jié)論:miRNA-331mimics有抑制大腸癌HCT116細(xì)胞的克隆形成、細(xì)胞增殖及遷移能力,表明miRNA-331可能在大腸癌的發(fā)生、發(fā)展過程中起著抑癌基因作用。
[Abstract]:Objective : To investigate the effect of miRNA - 331 on the proliferation , cloning , migration and invasion of human colorectal carcinoma cell line HCT116 . The results showed that miRNA - 331 could inhibit the clonal formation , cell proliferation and migration of HCT116 cells .

【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R735.34

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本文編號(hào)：1849169