本文選題：青蒿琥酯 + 卡鉑　； 參考：《西南醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：目的:晚期非小細(xì)胞肺癌的標(biāo)準(zhǔn)一線治療方案中,以鉑類為主或聯(lián)合鉑類的方案仍占較高比例,但與其他化療藥物聯(lián)用時(shí),極易引發(fā)嚴(yán)重的不良反應(yīng),包括腎毒性,胃腸道反應(yīng),耳毒性及血液系統(tǒng)毒性等。本研究以卡鉑聯(lián)合吉西他濱作為參照,通過多種體外實(shí)驗(yàn),研究青蒿琥酯單藥聯(lián)合鉑類化療藥物卡鉑對(duì)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞A549細(xì)胞增殖、凋亡及細(xì)胞周期的作用,旨在探討青蒿琥酯聯(lián)合卡鉑應(yīng)用于非小細(xì)胞肺癌治療的可行性,為尋找新的臨床治療非小細(xì)胞肺癌化療方案提供科學(xué)的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:1.應(yīng)用MTT法初步測(cè)定青蒿琥酯(Artesunate,ART),卡鉑(Carboplatin,CBP),吉西他濱(Gemcitabine,Gem)抑制A549細(xì)胞增殖的半數(shù)抑制濃度(half maximal inhibitory concentration,IC50)。2.選擇低毒單藥劑量(抑制率≤30%的單藥濃度),作為聯(lián)合用藥實(shí)驗(yàn)濃度,應(yīng)用MTT法測(cè)定青蒿琥酯聯(lián)合卡鉑,吉西他濱聯(lián)合卡鉑對(duì)A549細(xì)胞增殖的影響。繼而評(píng)估聯(lián)合用藥組的作用類型,為后續(xù)實(shí)驗(yàn)選定藥物分組((1)ART單藥組,(2)CBP單藥組,(3)Gem單藥組,(4)ART+CBP聯(lián)合用藥組,(5)Gem+CBP聯(lián)合用藥組)。3.采用平板克隆形成實(shí)驗(yàn)觀察三種低劑量單藥及聯(lián)合用藥后對(duì)A549細(xì)胞克隆增殖能力的影響。4.應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)上述各組藥物對(duì)A549肺癌細(xì)胞凋亡和細(xì)胞周期的影響。5.采用Tunel法觀察各組藥物對(duì)A549細(xì)胞凋亡形態(tài)的改變。6.應(yīng)用Western Blot技術(shù)檢測(cè)上述選定藥物分組對(duì)A549凋亡相關(guān)蛋白(Bax、Bcl-2、P53、Casepase-3)的表達(dá)水平的影響及ART單藥組,CBP單藥組,ART+CBP聯(lián)合用藥組對(duì)A549在G2/M期相關(guān)蛋白(Cyclin B1、P21、P34)的表達(dá)水平的影響。結(jié)果:1.青蒿琥酯抑制A549細(xì)胞體外增殖,且呈現(xiàn)一定的濃度依賴性,經(jīng)SPSS22.0計(jì)算,IC50為22.3μg/ml。低劑量青蒿琥酯與卡鉑聯(lián)合應(yīng)用,對(duì)A549的增殖抑制作用具有協(xié)同或相加效應(yīng)。2.青蒿琥酯及卡鉑單藥對(duì)A549細(xì)胞克隆形成率較對(duì)照組分別降低了15.7%,29.3%,ART聯(lián)合CBP對(duì)A549的克隆形成率則顯著降低了40.8%。3.青蒿琥酯單藥主要誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生早期凋亡,與CBP聯(lián)合作用后,與單藥組相比,能誘導(dǎo)更多的細(xì)胞凋亡,且凋亡細(xì)胞主要處于凋亡早期。4.青蒿琥酯單藥將A549細(xì)胞周期阻滯在G2/M期,卡鉑單藥阻滯在S期,兩藥聯(lián)合作用時(shí)在G2/M期細(xì)胞比例較陰性對(duì)照組有明顯增加。5.Tunel鏡檢結(jié)果可見:ART單藥組及ART+CBP聯(lián)合用藥組與對(duì)照組細(xì)胞相比,可見明顯凋亡細(xì)胞,形態(tài)見核固縮,邊聚較為明顯。6.Western Blot結(jié)果顯示:與對(duì)照組相比,ART+CBP組中促凋亡蛋白Bax、P53、caspase-3的表達(dá)顯著升高,凋亡抑制相關(guān)蛋白Bcl-2的表達(dá)明顯降低;G2/M期相關(guān)周期抑制蛋白P53、P21表達(dá)明顯升高,而促細(xì)胞周期蛋白Cyclin B1表達(dá)則明顯下降。結(jié)論:青蒿琥酯單藥對(duì)A549細(xì)胞增殖有顯著的抑制作用,同時(shí)青蒿琥酯還能顯著增強(qiáng)化療藥物卡鉑對(duì)A549細(xì)胞增殖的抑制,具有化療增敏作用。青蒿琥酯單藥及聯(lián)合卡鉑對(duì)A549細(xì)胞增殖的抑制作用可能與誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡,上調(diào)細(xì)胞周期抑制蛋白P53和P21、下調(diào)Cyclin B1的表達(dá),阻滯細(xì)胞周期進(jìn)程于G2/M期相關(guān)。
[Abstract]:Objective : To study the effects of carboplatin and carboplatin on the proliferation , apoptosis and cell cycle of A549 cells by combination of carboplatin and carboplatin in the treatment of non - small cell lung cancer . Compared with control group , the expression of pro - apoptotic protein Bax , P53 and caspase - 3 in A549 cells was significantly higher than that of control group .

【學(xué)位授予單位】：西南醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R734.2

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1843410