發(fā)布時間：2018-05-04 06:54

  本文選題：中介體 + 乳腺癌　； 參考：《中國腫瘤生物治療雜志》2017年04期

【摘要】：目的:研究中介體(mediator,Med)19對乳腺癌化療敏感性的影響并分析其分子機(jī)制。方法:選用多柔比星(adriamycin,ADM)耐藥的人乳腺癌細(xì)胞MCF-7/ADM和親本細(xì)胞MCF-7(NC組),采用慢病毒載體介導(dǎo)RNA干擾方法構(gòu)建Med19穩(wěn)定低表達(dá)的MCF-7/ADM與MCF-7細(xì)胞株(KD組),并用Real-time PCR和Western blotting方法驗(yàn)證干擾效果。CCK-8法檢測慢病毒介導(dǎo)的Med19敲減前后兩種細(xì)胞對ADM、順鉑(cisplatin,DDP)和紫杉醇(taxinol,TAX)藥物敏感性的變化。Real-time PCR和Western blotting檢測Med19敲減對多藥耐藥基因1(multidrug resistance 1,MDR1)和細(xì)胞凋亡基因Bcl2、Bax及Caspase-3、active Caspase-3的表達(dá)的影響。流式細(xì)胞術(shù)檢測敲減Med19及ADM處理對細(xì)胞凋亡的影響。結(jié)果:與MCF-7相比,MCF-7/ADM細(xì)胞對ADM、DDP和TAX均具有耐藥性。成功構(gòu)建Med19穩(wěn)定低表達(dá)的MCF-7/ADM與MCF-7細(xì)胞株,并且其對ADM、DDP、TAX的敏感性增加,藥物作用IC_(50)顯著降低(均P0.05)。MCF-7/ADM細(xì)胞Med19 mRNA和蛋白表達(dá)顯著高于MCF-7細(xì)胞,Med19的敲減可降低MCF-7/ADM細(xì)胞中MDR1 mRNA與蛋白表達(dá)水平(均P0.05)并可增加MCF-7/ADM及MCF-7細(xì)胞中凋亡相關(guān)active Caspase-3、Bax的蛋白表達(dá),降低Bcl2的蛋白表達(dá)(均P0.05)。此外,與NC及NC+ADM組相比,KD組及KD+ADM組凋亡水平顯著增加(均P0.05)。結(jié)論:Med19高表達(dá)參與乳腺癌化療耐藥,其機(jī)制可能與Med19調(diào)節(jié)MDR1的表達(dá)并影響細(xì)胞凋亡有關(guān)。
[Abstract]:Aim: to study the effect of mediatorus Medan19 on the chemosensitivity of breast cancer and analyze its molecular mechanism. Methods: human breast cancer cell line MCF-7/ADM and parent cell line MCF-7(NC were used to construct stable and low expression MCF-7/ADM and MCF-7 cell line of Med19 by RNA interference mediated by lentivirus vector. Real-time PCR and Western blotting methods were used to test the results. The effect of CCK-8 on the sensitivity of Lentivirus mediated Med19 knockout to Adm, Cisplatin cisplatin (DDP) and taxinolus (TAX). Real-time PCR and Western blotting Detection of Med19 knock down multidrug Resistance Gene 1(multidrug resistance 1 MDR1) and apoptosis Gene Bcl2Bax And the expression of Caspase-3 active Caspase-3. The effects of knockout Med19 and ADM on apoptosis were detected by flow cytometry. Results: compared with MCF-7, MCF-7 / ADM cells were resistant to ADMN DDP and TAX. MCF-7/ADM and MCF-7 cell lines with stable and low expression of Med19 were successfully constructed, and their sensitivity to ADMS-DDPTAX was increased. The expression of Med19 mRNA and protein in P0.05).MCF-7/ADM cells was significantly higher than that in MCF-7 cell line Med19 (P 0.05) and the protein expression of active Caspase-3 was increased in MCF-7/ADM and MCF-7 cells. The protein expression of Bcl2 was decreased (P 0.05). In addition, compared with NC and NC ADM groups, apoptosis levels in KD and KD ADM groups were significantly increased (P 0.05). ConclusionThe high expression of w / Med19 may be involved in the chemotherapeutic resistance of breast cancer, and its mechanism may be related to the regulation of MDR1 expression by Med19 and its effect on apoptosis.
【作者單位】： 江南大學(xué)附屬醫(yī)院腫瘤研究所;江南大學(xué)附屬醫(yī)院腫瘤外科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目資助(No.81472485) 無錫市衛(wèi)計(jì)委資助項(xiàng)目(No.Q201615,YGZXM14038No.YGZXQ1311)~~
【分類號】：R730.5;;R737.9

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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本文編號：1842042