本文選題：結(jié)直腸癌 + 化療耐藥��； 參考：《蘭州大學》2017年碩士論文

【摘要】：研究背景與目的結(jié)直腸癌(Colorectal cancer,CRC)是目前威脅人類生命健康最常見的惡性腫瘤之一,分別位列男性腫瘤第二位和女性腫瘤第三位,約50%以上的結(jié)直腸癌于發(fā)現(xiàn)時已有轉(zhuǎn)移。手術切除輔助化學藥物治療是臨床治療CRC的重要方式,但多藥耐藥(Multidrug resisitance,MDR)嚴重影響了CRC的臨床療效。MDR的形成及相關機制長期以來都是結(jié)直腸癌研究中的熱點和前沿問題。MicroRNAs(miRNAs)廣泛參與著多種生命活動過程。在腫瘤中,miRNAs的異常表達涉及多種類型腫瘤的進展和轉(zhuǎn)移。新近的研究發(fā)現(xiàn),上調(diào)或下調(diào)某些特定miRNAs的表達能直接影響腫瘤對化療藥物的反應,其作為關鍵的調(diào)節(jié)因子,參與了多種腫瘤MDR的形成,其中就包括結(jié)直腸癌。let-7家族通過調(diào)節(jié)多種致癌信號轉(zhuǎn)導,在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中起到了廣泛而重要的作用;還有報道指出,let-7/Lin28與乳腺癌細胞化療耐藥密切相關;此外let-7可通過IL-6/STAT3通路調(diào)控食管鱗狀細胞癌的化療耐藥性,提示let-7家族與腫瘤耐藥形成關系密切,但其在結(jié)直腸癌的化療耐藥形成中是否具有作用及其相關機制尚不明確。本研究以化療耐藥的人結(jié)直腸癌為切入點,探討let-7f-5p對結(jié)直腸癌化療耐藥的影響及相關分子機制,旨在為臨床治療化療耐藥型結(jié)直腸癌提供新的靶點。方法1.通過TCGA數(shù)據(jù)庫,分析對比化療耐藥與化療敏感的人結(jié)直腸癌組織中l(wèi)et-7f-5p的表達差異,了解高表達與低表達let-7f-5p與結(jié)直腸癌化療耐藥的相互關系。2.Lipofectamine 3000轉(zhuǎn)染人結(jié)直腸癌HCT116和SW480細胞系,分別構(gòu)建過表達、抑制表達let-7f-5p細胞模型;利用5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)處理相應細胞系,Western-blot檢測過表達、抑制表達let-7f-5p后細胞系抗凋亡蛋白Bcl-2及Bcl-x L的相應改變;通過Caspase-3/-9活性檢測試劑盒檢測過表達、抑制表達let-7f-5p后細胞系Caspase-3/-9的活性變化。3.5-FU分別處理HCT116和SW480細胞系;過表達、抑制表達let-7f-5p,利用流式細胞術,通過Annexin V-FITC/PI染色檢測細胞凋亡改變情況,通過MitoScreen JC-1檢測上述細胞線粒體膜電位改變情況。4.使用TargetScan和miRanda數(shù)據(jù)庫預測let-7f-5p潛在調(diào)控的靶基因;運用實時定量PCR分析HCT116和SW480細胞系中過表達或抑制表達let-7f-5p對TP53、TP53INP1、TP53INP2和Caspase-3 mRNA表達水平的影響;使用熒光素酶報告系統(tǒng)測定TP53、TP53INP1、TP53INP2和Caspase-3 3'UTR熒光素酶活性變化情況。結(jié)果1.let-7f-5p高表達與人結(jié)直腸癌化療耐藥相關。2.let-7f-5p通過促進抗凋亡相關蛋白表達并抑制凋亡相關蛋白表達從而誘導人結(jié)直腸癌細胞系產(chǎn)生化療耐藥。2.1 let-7f-5p抑制人結(jié)直腸癌細胞系耐藥株的凋亡。2.2 let-7f-5p促進抗凋亡相關蛋白表達。2.3 let-7f-5p抑制凋亡相關蛋白表達。3.let-7f-5p通過直接作用于TP53、TP53INP1、TP53INP2和Caspase-3進而影響人結(jié)直腸癌細胞化療耐受。結(jié)論以上結(jié)果證實,化療耐藥的人結(jié)直腸癌中l(wèi)et-7f-5p表達增高;在HCT116和SW480人結(jié)直腸癌細胞系,經(jīng)5-FU處理后,過表達let-7f-5p可促進抗凋亡蛋白Bcl-2和Bcl-x L的表達,并抑制Caspase-3/-9的活性,進而引起細胞凋亡抑制,誘導腫瘤細胞化療耐藥;而let-7f-5p直接作用于TP53、TP53INP1、TP53INP2和Caspase-3并抑制其表達是可能的機制之一。本研究通過對let-7f-5p誘導人結(jié)直腸癌化療耐藥相關機制深入探討,為臨床治療化療耐藥型結(jié)直腸癌提供了新的靶點。
[Abstract]:Background and objective Colorectal cancer (CRC) is one of the most common malignant tumors that threaten human life and health. There are second male tumors and third female tumors respectively. More than 50% of colorectal cancer has been metastases when found. Surgical excision assisted chemotherapy is an important way to treat CRC. But multidrug resistance (Multidrug resisitance, MDR) seriously affects the clinical efficacy of CRC and the formation of.MDR and the related mechanisms are a hot and frontier problem in colorectal cancer research for a long time,.MicroRNAs (miRNAs) is widely involved in a variety of life activities. In the tumor, the abnormal expression of miRNAs involves the progress and transformation of various types of tumors. Recent studies have found that up or down expression of certain specific miRNAs can directly affect the response of tumor to chemotherapeutic drugs. As a key regulatory factor, it participates in the formation of a variety of tumor MDR, including the.Let-7 family of colorectal cancer, which has been widely used in the development of cancer by regulating a variety of carcinogenic signal transduction pathways. It is also reported that let-7/Lin28 is closely related to chemoresistance of breast cancer cells; in addition, let-7 can regulate the chemotherapeutic resistance of esophageal squamous cell carcinoma through the IL-6/STAT3 pathway, suggesting that the let-7 family is closely related to the formation of tumor resistance, but whether it has a role in the formation of chemotherapeutic drug resistance in colorectal cancer and its phase. The system is not clear. In this study, the effect of let-7f-5p on chemotherapy resistance of colorectal cancer and its molecular mechanism were discussed with chemotherapy resistant human colorectal cancer, and the aim of this study was to provide new targets for the clinical treatment of chemotherapy resistant colorectal cancer. Method 1. the TCGA database was used to analyze and compare the colorectal cancer sensitive and chemotherapy sensitive colorectal cancer. The relationship between the expression of let-7f-5p in cancer tissue and the relationship between high expression and low expression of let-7f-5p and chemotherapy resistance of colorectal cancer.2.Lipofectamine 3000 transfected HCT116 and SW480 cell lines of human colorectal cancer, respectively, to construct overexpression, inhibit the expression of let-7f-5p cell model, and use 5- fluorouracil (5-fluorouracil, 5-FU) to deal with the corresponding cell lines. Western-blot detected over expression, inhibited the corresponding changes in the anti apoptotic protein Bcl-2 and Bcl-x L in the cell lines after the expression of let-7f-5p, and detected the expression by the Caspase-3/-9 activity detection kit and inhibited the activity of Caspase-3/-9 in the cell line after the expression of let-7f-5p, and.3.5-FU treated HCT116 and SW480 cell lines respectively; overexpressed and inhibited the expression let-7f-5p, The changes of apoptosis were detected by flow cytometry and Annexin V-FITC/PI staining. The changes of mitochondrial membrane potential were detected by MitoScreen JC-1..4. was used to predict the potential target genes of let-7f-5p using TargetScan and miRanda databases. The real-time quantitative PCR analysis of HCT116 and SW480 cell lines was used for overexpression or inhibition. The effect of let-7f-5p on the expression of TP53, TP53INP1, TP53INP2 and Caspase-3 mRNA; the changes in the activity of TP53, TP53INP1, TP53INP2 and Caspase-3 3'UTR luciferase by the luciferase reporter system. Inhibition of apoptosis related proteins to induce the expression of apoptosis related proteins in human colorectal cancer cell lines to induce chemotherapeutic drug resistance.2.1 let-7f-5p to inhibit apoptosis of.2.2 let-7f-5p in human colorectal cancer cell lines and promote anti apoptosis related protein expression of.2.3 let-7f-5p to inhibit apoptosis related protein expression.3.let-7f-5p by direct action on TP53, TP53INP1, TP53INP2. And Caspase-3 further affect the chemotherapy tolerance of human colorectal cancer cells. Conclusion the above results confirm that the expression of let-7f-5p in colorectal cancer is higher in chemoresistant human colorectal cancer; in HCT116 and SW480 human colorectal cancer cell lines, after 5-FU treatment, overexpression of let-7f-5p can promote the expression of anti apoptotic protein Bcl-2 and Bcl-x L, and inhibit the activity of Caspase-3/-9. The effect of let-7f-5p on TP53, TP53INP1, TP53INP2, Caspase-3 and inhibition of its expression is one of the possible mechanisms. This study provides an in-depth study of the mechanism of chemotherapeutic drug resistance in human colon cancer induced by let-7f-5p and provides a clinical treatment for the clinical treatment of chemotherapy resistant colorectal cancer. New targets.

【學位授予單位】：蘭州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R735.34

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 陸漢明,邵正才;青年人結(jié)直腸癌83例臨床分析[J];中國胃腸外科雜志;2000年04期

2 王漢濤 ,Kraemer M.;隨訪危險因素分析:復發(fā)和非復發(fā)結(jié)直腸癌的比較[J];中國實用外科雜志;2001年12期

3 蘇森;患結(jié)直腸癌婦女后代癌癥的危險性增加[J];中國腫瘤;2001年06期

4 汪一虹;在確定的法國人群中年齡<45歲結(jié)直腸癌病人與≥45歲結(jié)直腸癌病人的比較[J];國外醫(yī)學(消化系疾病分冊);2002年01期

5 李會晨;結(jié)直腸癌解剖位置的連續(xù)性右向遷移[J];國外醫(yī)學.外科學分冊;2003年03期

6 李志霞;結(jié)直腸癌復發(fā)及轉(zhuǎn)移的綜合治療[J];中華胃腸外科雜志;2003年06期

7 何建苗,蒲永東,曹志宇,劉衛(wèi)平;老年人結(jié)直腸癌186例的外科治療[J];中華胃腸外科雜志;2003年05期

8 保紅平,方登華,高瑞崗,李奎,張雪松,劉天錫;青年人結(jié)直腸癌臨床病理分析[J];中國普外基礎與臨床雜志;2004年01期

9 章江;;監(jiān)測結(jié)直腸癌非常必要[J];國外醫(yī)學情報;2004年04期

10 郜文秀,楊艷芳,梁小波,李耀平,李佩珍;細胞粘附分子變異體在結(jié)直腸癌中的表達及預后[J];中國公共衛(wèi)生;2005年07期

相關會議論文 前10條

1 鄭樹;;結(jié)直腸癌預后與轉(zhuǎn)移相關因素分析[A];2005年浙江省腫瘤學術會議全國大腸癌轉(zhuǎn)移與復發(fā)的診治研討會學術論文集[C];2005年

2 鄒一峰;吳小劍;蘭平;;結(jié)直腸癌免疫治療新進展[A];第十一次全國中西醫(yī)結(jié)合大腸肛門病學術會議論文匯編[C];2006年

3 郁寶銘;;結(jié)直腸癌治療的進展及其新理念[A];2006年浙江省肛腸外科學術年會論文匯編[C];2006年

4 王錫山;;結(jié)直腸癌治療的困惑之我見[A];第九屆全國腫瘤轉(zhuǎn)移學術大會暨2011年黑龍江省醫(yī)學會腫瘤學年會報告集[C];2011年

5 秦建平;;未病思想中的結(jié)直腸癌預防[A];貴州省中西醫(yī)結(jié)合學會肛腸學會第五屆學術交流會暨新技術新進展學習班論文匯編[C];2012年

6 高文慶;陳會林;童蕾;陸松春;;老年梗阻性結(jié)直腸癌診療體會(附42例報告)[A];首屆“之江中醫(yī)藥論壇”暨浙江省中醫(yī)藥學會2011年學術年會論文集[C];2011年

7 王啟遠;周長江;高云飛;徐巖;李坤;;血管內(nèi)皮生長因子與結(jié)直腸癌[A];《中華急診醫(yī)學雜志》第八屆組稿會暨急診醫(yī)學首屆青年論壇論文匯編[C];2009年

8 巴一;;結(jié)直腸癌靶向治療進展[A];第三屆中國腫瘤內(nèi)科大會教育集暨論文集[C];2009年

9 何超;朱洪波;;結(jié)直腸癌的生物治療[A];2009年浙江省腫瘤外科學術年會暨腫瘤外科規(guī)范化診治學習班論文匯編[C];2009年

10 萬德森;;進一步提高結(jié)直腸癌療效的思考[A];2009年浙江省腫瘤學術年會暨腫瘤診治新進展學習班論文匯編[C];2009年

相關重要報紙文章 前10條

1 中華醫(yī)學會腫瘤學分會主任委員 顧晉;分期不精確 致結(jié)直腸癌過度治療[N];健康報;2012年

2 本報記者 賈巖;跨線治療成結(jié)直腸癌最后防線[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2012年

3 本報記者 賈巖;跨線治療構(gòu)筑結(jié)直腸癌最后防線[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2012年

4 本報記者 林琳;結(jié)直腸癌：可以治愈的癌癥[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2013年

5 記者 張妍　通訊員 熊靜帆 朱品磊;深圳結(jié)直腸癌發(fā)病高于全國[N];深圳商報;2013年

6 本報記者 孫剛;預防結(jié)直腸癌：請管住嘴[N];解放日報;2013年

7 上海市中醫(yī)醫(yī)院腫瘤科 侯鳳剛 副主任醫(yī)師;中醫(yī)藥在結(jié)直腸癌治療中的作用和特色[N];上海中醫(yī)藥報;2014年

8 李華虹 孫瑜淼 記者 李麗云 實習生 陰浩;專家呼吁：結(jié)直腸癌應多學科規(guī)范化診療[N];科技日報;2014年

9 ;降低結(jié)直腸癌復發(fā)有新療法[N];人民日報;2003年

10 韓自力;新化療方案可高效治療結(jié)直腸癌[N];健康報;2007年

相關博士學位論文 前10條

1 陳濤;MicroRNA-31/FIH-1調(diào)控關系在結(jié)直腸癌發(fā)生發(fā)展中的作用及其機制研究[D];復旦大學;2014年

2 任翡;MYBL2基因在結(jié)直腸癌的表達及機制的初步探討[D];復旦大學;2014年

3 吳朋;結(jié)直腸癌中microRNA-615基因甲基化及其生物學特性探究[D];復旦大學;2014年

4 李澤武;MicroRNA-203靶向ZNF217基因調(diào)控結(jié)直腸癌生物學行為的研究[D];山東大學;2015年

5 徐興遠;低分子肝素對結(jié)直腸癌患者預后的影響及相關機制的研究[D];復旦大學;2014年

6 梁洪亮;miR-454在結(jié)直腸癌中的功能及其作用機制[D];山東大學;2015年

7 金鵬;MMR蛋白在雌激素致結(jié)腸癌細胞凋亡中的作用及SEPT9檢測結(jié)直腸癌的研究[D];第三軍醫(yī)大學;2015年

8 珠珠;云南省Lynch綜合征候選基因標志物研究[D];昆明醫(yī)科大學;2014年

9 周智航;SEMA3F通過下調(diào)ASCL2-CXCR4軸而抑制結(jié)直腸癌轉(zhuǎn)移的分子機制[D];第三軍醫(yī)大學;2015年

10 王林;MiRNA-300對結(jié)直腸癌腫瘤侵襲和增殖的影響及其調(diào)控機制的初步研究[D];第三軍醫(yī)大學;2015年

相關碩士學位論文 前10條

1 鐵婭滕;let-7f-5p通過促抗凋亡蛋白表達及抑制凋亡蛋白誘導結(jié)直腸癌化療耐藥[D];蘭州大學;2017年

2 顏斐斐;術后結(jié)直腸癌患者癌因性疲乏與影響因素的研究[D];南方醫(yī)科大學;2009年

3 李斌;結(jié)直腸癌患者就診延遲分析[D];中南大學;2009年

4 葉建杰;慈溪市結(jié)直腸癌危險因素病例對照研究[D];浙江大學;2008年

5 趙波;結(jié)直腸癌危險因素及臨床流行病學特征的調(diào)查與分析[D];廣西醫(yī)科大學;2013年

6 宋艷敏;PAQR3基因甲基化水平與結(jié)直腸癌關系的研究[D];河北大學;2015年

7 黎江;Oct4B1在結(jié)直腸癌干細胞中的表達及其與Twist的相關性研究[D];遵義醫(yī)學院;2015年

8 楊文婷;PD-L1、SIRT1在結(jié)直腸癌組織中的表達及意義[D];福建醫(yī)科大學;2015年

9 羅佳;二代測序分析散發(fā)性結(jié)直腸癌和息肉的基因突變[D];福建醫(yī)科大學;2015年

10 崔慧鵬;精氨酸琥珀酸合成酶（ASS1）高表達與結(jié)直腸癌惡性進展的相關性研究[D];中國人民解放軍醫(yī)學院;2015年

，

本文編號：1822370