本文選題：肝癌干細胞 + FOXOa��； 參考：《第三軍醫(yī)大學學報》2017年16期

【摘要】：目的探討FOXO3a對肝癌干細胞(liver cancer stem cells,LCSCs)自我更新能力的調(diào)控作用以及其相關(guān)機制。方法流式細胞儀分選獲取肝癌干細胞,實時熒光定量PCR(real time fluorescent quantitative PCR,qRT-PCR)檢測FOXO3a在肝癌干細胞中的表達情況;利用類胰島素生長因子(insulin-like growth factor,IGF)的抑制劑或激活劑改變IGF活性,Western blot和qRT-PCR檢測FOXO3a表達的改變;包裝、純化表達和干擾FOXO3a的慢病毒并進行細胞的感染,Western blot檢測其過表達和干擾效率;采用細胞克隆形成實驗和細胞成球生長能力實驗檢測過表達或干擾FOXO3a后細胞自我更新能力的改變,以及肝癌細胞中激活IGF信號,同時過表達FOXO3a后細胞自我更新能力的改變。結(jié)果 FOXO3a在肝癌干細胞中的表達明顯低于肝癌細胞(P0.01),并且受到IGF的負向調(diào)控;構(gòu)建了穩(wěn)定過表達和干擾FOXO3a的細胞模型,并發(fā)現(xiàn)過表達FOXO3a后,細胞的克隆形成能力和成球生長能力均降低,而干擾FOXO3a后,細胞的克隆形成能力和成球生長能力均得到了提升;激活IGF信號,同時過表達FOXO3a后,細胞的克隆形成能力和成球生長能力下降。結(jié)論 FOXO3a對肝癌干細胞的自我更新能力具有負向調(diào)控作用,且可受到IGF的負調(diào)節(jié),并介導IGF對肝癌干細胞的自我更新能力的調(diào)控。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of FOXO3a on the self-renewal ability of liver stem cell cancer stem cells and its related mechanism. Methods Hepatocellular carcinoma stem cells were obtained by flow cytometry. The expression of FOXO3a in HCC stem cells was detected by real-time quantitative PCR(real time fluorescent quantitative PCRQRT-PCRR. Using the inhibitor or activator of insulin-like growth factor-like IGF to change the activity of IGF, Western blot and qRT-PCR were used to detect the expression of FOXO3a, and the lentiviruses expressing and interfering with FOXO3a were packaged, purified and infected with Western blot to detect its overexpression and interference efficiency. The changes of cell self-renewal ability after overexpression or interference with FOXO3a and activation of IGF signal in hepatoma cells were detected by cell clone forming assay and cell spheroidization ability test, and the changes of cell self-renewal ability after over-expression of FOXO3a were also detected. Results the expression of FOXO3a in HCC stem cells was significantly lower than that in HCC cells P0.01 and was regulated negatively by IGF. A cell model of stable overexpression and interference with FOXO3a was constructed, and the overexpression of FOXO3a was found. The ability of cell clone formation and spheroidization decreased, but after interfering with FOXO3a, the ability of cell clone formation and spheroidization was improved, and IGF signal was activated and FOXO3a was overexpressed. The ability of cell clone formation and spheroidal growth decreased. Conclusion FOXO3a has a negative regulatory effect on the self-renewal ability of HCC stem cells and can be negatively regulated by IGF and mediated by the regulation of IGF on the self-renewal ability of HCC stem cells.
【作者單位】： 浙江理工大學生命科學學院;第三軍醫(yī)大學西南醫(yī)院生物治療中心;
【基金】：國家自然科學基金面上項目(81472292)~~
【分類號】：R735.7

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