本文選題：MORC + ALDHA　； 參考：《中國癌癥雜志》2017年03期

【摘要】：背景與目的:染色質(zhì)重塑蛋白MORC家族CW型鋅指結(jié)構(gòu)蛋白2(microrchidia family CW-type zinc finger 2,MORC2)在DNA介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)錄及DNA損傷修復(fù)等基本生物學(xué)過程中發(fā)揮重要作用,但其對(duì)乳腺癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響目前尚無相關(guān)報(bào)道。乙醛脫氫酶(aldehyde dehydrogenase,ALDH)家族成員ALDH1A3(aldehyde dehydrogenase family 1 member A3,ALDH1A3)是一種公認(rèn)的乳腺癌干細(xì)胞的標(biāo)志物,但其在乳腺癌細(xì)胞中的調(diào)控機(jī)制目前尚不清楚。該研究擬探討敲低MORC2基因?qū)LDH1A3表達(dá)以及對(duì)乳腺癌細(xì)胞干性的影響。方法:利用短發(fā)夾RNA(short hairpin RNA,sh RNA)介導(dǎo)的基因沉默方法構(gòu)建穩(wěn)定敲低MORC2基因的乳腺癌細(xì)胞系;利用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)和蛋白[質(zhì)]印跡法(Western blot)分析敲低MORC2基因?qū)LDH1A3表達(dá)的影響;利用微球體形成實(shí)驗(yàn)和流式細(xì)胞熒光分選技術(shù)(fluorescence activated cell sorting,FACS)分析敲低MORC2對(duì)乳腺癌干細(xì)胞亞群的影響。結(jié)果:Western blot和RTFQ-PCR分析結(jié)果顯示,敲低MORC2基因顯著下調(diào)ALDH1A3蛋白及m RNA水平;微球體形成實(shí)驗(yàn)顯示敲低MORC2基因顯著抑制MCF-7細(xì)胞的成球能力;FACS分析顯示敲低MORC2基因顯著下調(diào)ALDH1A3陽性乳腺癌干細(xì)胞亞群,而對(duì)CD44+CD24-乳腺癌干細(xì)胞亞群沒有明顯影響。結(jié)論:MORC2通過調(diào)節(jié)ALDH1A3的表達(dá)促進(jìn)乳腺癌干細(xì)胞表型。
[Abstract]:Background & AIM: the CW zinc finger protein 2(microrchidia family CW-type zinc finger 2 Moc2 of chromatin remodeling protein MORC family plays an important role in DNA mediated gene transcription and DNA damage repair. However, there is no related report on the effect on the biological behavior of breast cancer cells. ALDH1A3(aldehyde dehydrogenase family 1 member A3A3 is a recognized marker of breast cancer stem cells, but its regulatory mechanism in breast cancer cells is still unclear. The aim of this study was to investigate the effects of MORC2 knockout on ALDH1A3 expression and dryness of breast cancer cells. Methods: a breast cancer cell line with stable knockout of MORC2 gene was constructed by short hairpin RNA(short hairpin RNA-mediated gene silencing. Real-time fluorescent quantitative polymerase chain reactionation (RTFQ-PCR) and Western blotting were used to analyze the effect of MORC2 gene knockout on ALDH1A3 expression. Microsphere formation test and flow cytometry (FCM) were used to analyze the effect of low MORC2 on breast cancer stem cell subsets. Results the results of Western blot and RTFQ-PCR analysis showed that knockdown of MORC2 gene significantly down-regulated the level of ALDH1A3 protein and m RNA. Microsphere formation assay showed that knockout MORC2 gene significantly inhibited the spheroidization of MCF-7 cells. FACS analysis showed that knockout MORC2 gene significantly down-regulated ALDH1A3 positive breast cancer stem cell subsets, but had no significant effect on CD44 CD24- breast cancer stem cell subsets. Conclusion the expression of ALDH1A3 in breast cancer stem cells can be promoted by adjusting the expression of ALDH1A3 in the breast cancer stem cell phenotype.
【作者單位】： 復(fù)旦大學(xué)生物醫(yī)學(xué)研究院及腫瘤研究所;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81372847)
【分類號(hào)】：R737.9

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本文編號(hào)：1785066