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雷帕霉素聯(lián)合阿霉素對人骨肉瘤MG-63細胞增殖的影響及其機制

發(fā)布時間:2018-04-16 09:09

  本文選題:骨肉瘤 + 細胞增殖; 參考:《山東醫(yī)藥》2017年16期


【摘要】:目的探討雷帕霉素聯(lián)合阿霉素對人骨肉瘤MG-63細胞(以下稱骨肉瘤細胞)增殖的影響及其作用機制。方法取對數(shù)生長期骨肉瘤細胞,分別加入不同濃度的阿霉素(0.125、0.25、0.5、1.0、2.0 mg/L)和雷帕霉素(20、50、100 nmol/L)單獨及聯(lián)合作用,采用MTT法檢測作用48 h的細胞增殖抑制率,并計算兩藥相互作用指數(shù)(CDI),評價兩藥相互作用性質(zhì)。結(jié)果以100 nmol/L雷帕霉素與0.5 mg/L阿霉素聯(lián)合作用后的細胞增殖抑制率最高,此時CDI0.7,兩種藥物表現(xiàn)為顯著協(xié)同作用。將對數(shù)生長期的骨肉瘤細胞分為五組,阿霉素組、雷帕霉素組分別加入0.5 mg/L阿霉素、100 nmol/L雷帕霉素,聯(lián)合用藥組加入0.5 mg/L阿霉素和100 nmol/L雷帕霉素,DMSO溶媒組加入等量DMSO,空白對照組不予處理。采用MTT法檢測各組細胞增殖能力,連續(xù)記錄5天。采用Real-time PCR法檢測各組處理48 h缺氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)、血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)、基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP-2)mRNA相對表達量。結(jié)果各組作用第1、2天細胞增殖能力比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P均0.05)。作用第3~5天,聯(lián)合用藥組細胞增殖能力均明顯低于空白對照組、DMSO溶媒組、阿霉素組及雷帕霉素組(P均0.05)。聯(lián)合用藥組HIF-1α、VEGF、MMP-2 mRNA相對表達量均明顯低于空白對照組、DMSO溶媒組、阿霉素組、雷帕霉素組(P均0.05)。結(jié)論雷帕霉素聯(lián)合阿霉素可以協(xié)同抑制骨肉瘤細胞增殖;降低HIF-1α、VEGF、MMP-2表達可能是其作用機制。
[Abstract]:Objective to investigate the effect and mechanism of rapamycin combined with doxorubicin on proliferation of human osteosarcoma MG-63 cells.Methods Osteosarcoma cells in logarithmic phase were treated with different concentrations of doxorubicin (0.125) 0.25 ~ (0.5) (1.0 mg / L) and rapamycin (2050nmol / L) alone or in combination. The inhibitory rate of proliferation of osteosarcoma cells exposed to different concentrations of doxorubicin (0.125) and rapamycin (2050nmol / L) for 48 h was measured by MTT assay.The interaction index of two drugs was calculated and the interaction properties of two drugs were evaluated.Results the inhibition rate of cell proliferation was the highest after the combination of 100 nmol/L rapamycin and 0.5 mg/L doxorubicin, and CDI0.7The two drugs showed significant synergistic effect.The osteosarcoma cells in logarithmic phase were divided into five groups: adriamycin group and rapamycin group were treated with 0.5 mg/L doxorubicin and 100 nmol/L rapamycin, respectively.In combination group, doxorubicin for 0.5 mg/L and rapamycin for 100 nmol/L were added in the same amount of DMSO.The blank control group was not treated.The proliferative ability of each group was measured by MTT assay and recorded for 5 days.The relative expression of hypoxia inducible factor-1 偽 (HIF-1 偽), vascular endothelial growth factor (VEGF) and matrix metalloproteinase (2(MMP-2)mRNA) were detected by Real-time PCR assay.Results there was no significant difference in proliferative ability between the two groups on the 1st day (P < 0.05).On the 3rd day of treatment, the cell proliferation ability in the combination group was significantly lower than that in the DMSO solvent group, doxorubicin group and rapamycin group (P < 0.05).The relative expression of HIF-1 偽 VEGF MMP-2 mRNA in combination group was significantly lower than that in control group, adriamycin group and rapamycin group (P < 0.05).Conclusion rapamycin combined with doxorubicin can synergistically inhibit the proliferation of osteosarcoma cells, and the decrease of HIF-1 偽 -VEGF- MMP-2 expression may be its mechanism.
【作者單位】: 新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院;廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院;
【基金】:廣西自然科學(xué)基金資助項目(2012GXNSFAA05314;2014GXNSFAA118173) 廣西高?茖W(xué)技術(shù)研究項目(YB2014073)
【分類號】:R738.1

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