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siRNA干擾PDLIM1表達(dá)抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞U87遷移與侵襲

發(fā)布時間:2018-04-15 00:04

  本文選題:PDLIM + 膠質(zhì)母細(xì)胞瘤 ; 參考:《廣東醫(yī)學(xué)》2017年04期


【摘要】:目的研究人PDZ和LIM域蛋白1(PDLIM1)特異性siRNA對人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤U87細(xì)胞系遷移、侵襲能力的影響,并對其相關(guān)機(jī)制進(jìn)行初步探討。方法用小RNA干擾技術(shù)下調(diào)U87細(xì)胞PDLIM1,用熒光實時定量Real-time PCR技術(shù)驗證siRNA干擾效率;采用細(xì)胞劃痕實驗檢測細(xì)胞遷移能力,采用Transwell實驗檢測細(xì)胞侵襲能力;用Western blot法檢測細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)相關(guān)蛋白表達(dá)情況,并探討相關(guān)機(jī)制。結(jié)果經(jīng)PDLIM1-siRNA干擾后,膠質(zhì)瘤U87細(xì)胞中PDLIM1在mRNA水平顯著下調(diào)(P0.001);與對照組相比,遷移和侵襲能力被顯著抑制(P0.001);PDLIM1基因表達(dá)下調(diào)后,U87細(xì)胞中EMT相關(guān)蛋白N-cadherin、β-catenin、Slug下調(diào)。結(jié)論 PDLIM1通過EMT相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子Slug調(diào)節(jié)N-cadherin、β-catenin蛋白表達(dá),是其調(diào)節(jié)膠質(zhì)瘤U87細(xì)胞遷移及侵襲能力的可能機(jī)制之一。
[Abstract]:Objective to study the effects of human PDZ and LIM domain protein 1pPDLIM1) specific siRNA on migration and invasion of human glioblastoma cell line U87, and to explore its mechanism.Methods the PDLIM1 of U87 cells was down-regulated by small RNA interference technique, the interference efficiency of siRNA was verified by fluorescence real-time quantitative Real-time PCR, the cell migration ability was detected by cell scratch assay, and the cell invasion ability was detected by Transwell assay.The expression of EMT-related proteins in epithelial mesenchymal transformation was detected by Western blot assay and the related mechanism was discussed.Results the mRNA level of PDLIM1 in U87 cells was significantly down-regulated by PDLIM1-siRNA, and the migration and invasion ability of U87 cells was significantly inhibited after the down-regulation of P0.001pPDLIM1 gene expression and down-regulation of EMT related proteins N-cadherin and 尾 -cateninine Slug in U87 cells.Conclusion PDLIM1 regulates the expression of N-cadherin and 尾 -catenin protein through EMT related transcription factor Slug, which is one of the possible mechanisms of regulating the migration and invasion of U87 glioma cells.
【作者單位】: 南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院神經(jīng)外科;西南醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院神經(jīng)外科;南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院精準(zhǔn)神經(jīng)外科實驗室;
【基金】:國家自然科學(xué)基金資助項目(編號:81372692) 國家臨床重點?平ㄔO(shè)項目(編號:財社〔2011〕170號)
【分類號】:R739.41

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