下調(diào)miR-210的表達(dá)對(duì)U87細(xì)胞增殖、侵襲及凋亡的影響
本文選題:miR- 切入點(diǎn):膠質(zhì)瘤 出處:《鄭州大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)》2017年02期
【摘要】:目的:探討miR-210在膠質(zhì)瘤組織中的表達(dá)及下調(diào)miR-210對(duì)U87細(xì)胞增殖、侵襲及凋亡的影響。方法:選取64例擇期行手術(shù)治療的膠質(zhì)瘤患者的膠質(zhì)瘤組織和30例因腦外傷行內(nèi)減壓術(shù)患者的正常腦組織。培養(yǎng)人腦膠質(zhì)瘤U87細(xì)胞,根據(jù)轉(zhuǎn)染物不同將細(xì)胞分為反義miR-210組、陰性對(duì)照組和空白對(duì)照組,利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)不同腦組織及細(xì)胞中miR-210及HIF-1α基因表達(dá),MTT比色法檢測(cè)細(xì)胞增殖情況,Transwell法檢測(cè)細(xì)胞遷移及侵襲能力,利用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況,Western blot法檢測(cè)細(xì)胞Bcl-2、Bax、Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9蛋白表達(dá)。結(jié)果:膠質(zhì)瘤組織中miR-210和HIF-1αmRNA的表達(dá)均高于正常腦組織(P0.05);膠質(zhì)瘤組織中miR-210和HIF-1αmRNA相對(duì)表達(dá)量均與腫瘤直徑和病理分級(jí)有關(guān)(P0.05);反義miR-210組細(xì)胞中miR-210和HIF-1αmRNA的表達(dá)均低于陰性對(duì)照組和空白對(duì)照組(P0.05)。與陰性對(duì)照組和空白對(duì)照組相比,反義miR-210組細(xì)胞在48、72和96 h時(shí)光密度值降低,遷移細(xì)胞數(shù)和侵襲細(xì)胞數(shù)減少,細(xì)胞凋亡率升高(P0.05)。反義miR-210組細(xì)胞中Bcl-2蛋白相對(duì)表達(dá)量低于陰性對(duì)照組和空白對(duì)照組,而B(niǎo)ax、Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9蛋白相對(duì)表達(dá)量則升高(P0.05)。結(jié)論:miR-210在膠質(zhì)瘤組織中呈高表達(dá),下調(diào)miR-210表達(dá)可抑制細(xì)胞增殖、遷移及侵襲能力,促進(jìn)細(xì)胞凋亡發(fā)生。
[Abstract]:Objective: to investigate the expression of miR-210 in glioma tissues and down-regulate the proliferation of U87 cells by down-regulating miR-210. Methods: the glioma tissues of 64 glioma patients undergoing elective surgical treatment and the normal brain tissues of 30 patients with internal decompression due to traumatic brain injury were selected to culture human glioma U87 cells. According to the transfection, the cells were divided into antisense miR-210 group, negative control group and blank control group. The expression of miR-210 and HIF-1 偽 gene in different brain tissues and cells were detected by real-time fluorescence quantitative PCR assay. The expression of miR-210 and HIF-1 偽 mRNA in glioma tissue was higher than that in normal brain tissue, and the relative expression levels of miR-210 and HIF-1 偽 mRNA in glioma tissue were higher than those in normal brain tissue, and the relative expression levels of miR-210 and HIF-1 偽 mRNA in glioma tissue were higher than those in normal brain tissue. The expression of miR-210 and HIF-1 偽 mRNA in antisense miR-210 group was lower than that in negative control group and blank control group (P 0.05). In antisense miR-210 group, the cell density decreased, the number of migration cells and invasive cells decreased, and the cell apoptosis rate increased at 48h and 96h. The relative expression of Bcl-2 protein in antisense miR-210 group was lower than that in negative control group and blank control group. The relative expression of Caspase-8 and Caspase-9 protein in Baxia Caspase-3 is higher than that of P0.05.Conclusion: the down-regulation of miR-210 expression can inhibit the proliferation, migration and invasion of glioma cells, and promote apoptosis in glioma tissues. [WT5 "HZ] [WT5" HZ] [WT5 "BZ] [WT5" BZ] [WT5 "BZ]
【作者單位】: 新疆石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院神經(jīng)外科;山東省立醫(yī)院神經(jīng)外科;
【基金】:山東省科技發(fā)展計(jì)劃2013YD18024
【分類(lèi)號(hào)】:R739.41
【參考文獻(xiàn)】
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【共引文獻(xiàn)】
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,本文編號(hào):1682121
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