本文選題：腦膠質瘤C細胞　切入點：縫隙連接　出處：《中國藥理學通報》2017年07期

【摘要】：目的將p CMV-Cx43c DNA重組質粒轉染入大鼠腦膠質瘤C6細胞,上調C6細胞Cx43表達,進而探討C6細胞Cx43過表達對其增殖能力的影響及機制。方法通過脂質體將p CMV-Cx43c DNA重組質粒轉入C6細胞,使C6細胞過表達Cx43,并用G418篩選出穩(wěn)定過表達Cx43的C6細胞;測定細胞倍增時間和軟瓊脂集落形成實驗,檢測各組細胞的增殖程度;分別用ERK1/2特異性阻斷劑PD98059(30μmol·L~(-1))、p38MAPK特異性阻斷劑SB20219(10μmol·L~(-1))處理各組細胞,Western blot檢測各組細胞Cx43、p-Cx43、pERK1/2和p-p38MAPK的表達;MTT比色法檢測各組細胞活性。結果成功將p CMV-Cx43c DNA重組質粒轉入C6細胞,并篩選出穩(wěn)定轉染Cx43基因的C6細胞;測定細胞倍增時間和軟瓊脂集落形成實驗表明C6-Cx43組比C6組、C6-p CMV組細胞增殖速度減慢,細胞集落數(shù)明顯減少(P0.01);ERK1/2、p38MAPK特異性阻斷劑處理細胞后,Western blot檢測發(fā)現(xiàn)C6-Cx43+PD98059組、C6-Cx43+SB202190組較C6-Cx43組Cx43表達升高(P0.01)、pCx43(P0.05)表達下調。結論阻斷ERK1/2、p38MAPK通路,導致Cx43蛋白表達升高,從而抑制C6細胞的增殖。
[Abstract]:Objective to transfect the recombinant plasmid of p CMV-Cx43c DNA into C6 cells of rat brain glioma and up-regulate the expression of Cx43 in C6 cells, and to investigate the effect and mechanism of Cx43 overexpression on the proliferation of C6 cells. Methods the recombinant plasmid of p CMV-Cx43c DNA was transfected into C6 cells by liposome. C6 cells were overexpressed Cx43, and C6 cells stably expressed Cx43 were screened by G418. The cell doubling time and soft Agar colony forming test were measured to detect the proliferation degree of the cells in each group. ERK1/2 specific blockers, PD98059(30 渭 mol LPERK-1, p38MAPK-specific blocker, SB20219(10 渭 mol Lamp-1a) were used to detect the expression of Cx43, p-Cx43, pERK1 / 2 and p-p38MAPK, respectively. Results the recombinant plasmid p#en6# DNA was successfully transferred into C6 cells, and the expression of pERK1 / 2 and p-p38MAPK were detected by MTT colorimetric assay. The recombinant plasmid p38 MAPK was transfected into C6 cells successfully, and the expression of pERK1 / 2 and pERK1 / 2 were detected by MTT colorimetry. C6 cells stably transfected with Cx43 gene were screened, and cell multiplication time and soft Agar colony formation test showed that the proliferation rate of C6-Cx43 group was slower than that of C6 C6-p CMV group. The number of cell colonies decreased significantly after treatment with P0.01ERK1 / 2p38MAPK specific blocker. Western blot analysis showed that the expression of C6-Cx43 SB202190 in C6-Cx43 PD98059 group was higher than that in C6-Cx43 group. Conclusion blocking ERK1 / 2 p38 MAPK pathway leads to the increase of Cx43 protein expression and inhibits the proliferation of C6 cells.
【作者單位】： 南昌大學藥學院藥理學教研室;
【基金】：國家自然科學基金資助項目(No 81660014,30760286) 江西省自然科學基金資助項目(No 20142BAB205022)
【分類號】：R739.41

【參考文獻】

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本文編號：1662515