發(fā)布時(shí)間：2018-03-25 02:36

  本文選題：胃癌　切入點(diǎn)：腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞　出處：《中華腫瘤防治雜志》2017年13期

【摘要】：目的腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞(cancer associated fibroblasts,CAFs)是腫瘤微環(huán)境中的重要細(xì)胞,它在腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中扮演著重要角色。本研究探討腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞分泌CXC趨化因子配體1(chemokine C-X-C motif ligand 1,CXCL1)對(duì)胃癌細(xì)胞遷移侵襲能力的影響及分子機(jī)制。方法分離和培養(yǎng)胃癌相關(guān)成纖維細(xì)胞和胃正常黏膜成纖維細(xì)胞(normal fibroblasts,NFs);逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)、蛋白質(zhì)印跡法和酶聯(lián)免疫吸附劑試驗(yàn)(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)分別測(cè)定CAFs和NFs中CXCL1mRNA、蛋白水平表達(dá)量和條件培養(yǎng)基中CXCL1的含量;Transwell實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)觀察外源性CXCL1和CXCL1抗體對(duì)胃癌細(xì)胞遷移侵襲能力的影響;蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)不同處理組MMP-3蛋白水平的表達(dá)變化。結(jié)果 CAFs中CXCL1mRNA、蛋白水平表達(dá)量和CAFs-CM分泌的CXCL1含量均顯著高于NFs和NFs-CM組,P0.01。外源性CXCL1組胃癌細(xì)胞穿透膜細(xì)胞數(shù)顯著多于對(duì)照組,t=3.213,P=0.030;劃痕傷口愈合率顯著高于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,t=3.006,P=0.04。而CXCL1抗體組胃癌細(xì)胞穿透膜細(xì)胞數(shù)顯著少于對(duì)照組,t=3.811,P=0.020;劃痕傷口愈合率顯著低于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,t=4.678,P=0.010。外源性CXCL1組胃癌細(xì)胞中基質(zhì)金屬蛋白酶3(matrix metalloproteinase-3,MMP-3)蛋白表達(dá)水平顯著上調(diào),t=4.153,P=0.009;而CXCL1抗體組胃癌細(xì)胞中MMP-3蛋白表達(dá)水平顯著下調(diào),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,t=3.349,P=0.030。結(jié)論胃癌CAFs分泌的CXCL1可能是通過調(diào)節(jié)MMP-3蛋白表達(dá)促進(jìn)胃癌細(xì)胞遷移和侵襲的。
[Abstract]:Objective Cancer associated fibroblast associated fibroblast (associated) is an important cell in tumor microenvironment. It plays an important role in tumorigenesis and development. In this study, we investigated the effect of CXC chemokine ligand 1(chemokine C-X-C motif ligand 1 (CXCL1) on the migration and invasion of gastric cancer cells and its molecular mechanism. Isolation and culture of fibroblasts associated with gastric cancer and normal fibroblasts from normal gastric mucosa fibroblasts; reverse transcription-polymerase chain reactionation of reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR); determination of CXCL1 mRNAs and eggs in CAFs and NFs by Western blotting and enzyme linked immunosorbent assay (Elisa). White level expression and CXCL1 content in conditioned medium Transwell test and cell scratch assay were used to observe the effects of exogenous CXCL1 and CXCL1 antibodies on the migration and invasion of gastric cancer cells. Results the expression of CXCL1 mRNAs and CXCL1 secreted by CAFs-CM in CAFs were significantly higher than those in NFs and NFs-CM groups (P 0.01). The number of penetrating membrane cells in gastric cancer cells in exogenous CXCL1 group was significantly higher than that in NFs and NFs-CM groups. The rate of wound healing was significantly higher in the control group than in the control group, and the rate of wound healing was significantly higher than that in the control group. The difference was statistically significant (P < 0.05). The number of penetrating membrane cells in the CXCL1 antibody group was significantly lower than that in the control group, and the wound healing rate in the CXCL1 antibody group was significantly lower than that in the control group, and the rate of wound healing in the CXCL1 antibody group was significantly lower than that in the control group. The expression level of matrix metalloproteinase-3 (MMP-3) protein in gastric cancer cells of exogenous CXCL1 group was significantly up-regulated, while the expression level of MMP-3 protein in gastric cancer cells of CXCL1 antibody group was significantly down-regulated. Conclusion the CXCL1 secreted by CAFs may promote the migration and invasion of gastric cancer cells by regulating the expression of MMP-3 protein.
【作者單位】： 同濟(jì)大學(xué)附屬第十人民醫(yī)院普外科;徐匯區(qū)大華醫(yī)院病理科;
【基金】：上海市自然科學(xué)基金(15ZR1432900)
【分類號(hào)】：R735.2

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