本文選題：miR-711　切入點：胃癌細胞　出處：《南華大學(xué)》2016年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：目的:探討miR-711對胃癌細胞MGC-803和SGC-7901侵襲轉(zhuǎn)移及上皮間質(zhì)化(epithelial mesenchymal transition,EMT)的影響,為防治胃癌轉(zhuǎn)移尋找有針對性的靶標(biāo)提供理論基礎(chǔ)。方法:采用脂質(zhì)體瞬時轉(zhuǎn)染方法將miR-711過表達、miR-711抑制表達、miRNA空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染胃癌細胞株MGC-803、SGC-7901,設(shè)置mi RNA空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組作為陰性對照、未轉(zhuǎn)染組作為空白對照組,48h后用熒光顯微鏡觀察細胞轉(zhuǎn)染效率,Transwell侵襲小室實驗檢測其侵襲能力、細胞劃痕實驗檢測其遷移能力,Western blot實驗檢測上皮蛋白和間質(zhì)蛋白表達量的變化。結(jié)果:1)熒光顯微鏡下觀察轉(zhuǎn)染效率:胃癌細胞MGC-803和SGC-7901的轉(zhuǎn)染效率均在75%以上;2)MGC-803細胞組Transwell侵襲實驗結(jié)果顯示:與陰性對照組穿膜細胞數(shù)(120.00±4.58)及空白對照組穿膜細胞數(shù)(119.67±5.13)分別比較,miR-711 mimics組穿膜細胞數(shù)(70.67±5.51)明顯下降,(P0.05),miR-711 inhibitors組穿膜細胞數(shù)(213.67±9.07)明顯升高,(P0.05);SGC-7901細胞組Transwell侵襲實驗結(jié)果顯示:與陰性對照組穿膜細胞數(shù)(114.67±7.37)及空白對照組穿膜細胞數(shù)(109.67±5.51)分別比較,mi R-711 mimics組穿膜細胞數(shù)(63.66±5.51)明顯下降,(P0.05),miR-711 inhibitors組穿膜細胞數(shù)(188.33±8.50)明顯升高,(P0.05);3)MGC-803細胞組劃痕實驗顯示:劃痕48h后,與陰性對照組細胞愈合率(32.52±1.73)%及空白對照組細胞愈合率(32.15±1.55)%分別比較,mi R-711 mimics組細胞愈合率(7.08±0.73)%明顯下降,(P0.05),miR-711 inhibitors組細胞愈合率(49.03±1.59)%明顯下降,(P0.05);SGC-7901細胞組劃痕實驗顯示:劃痕48h后,與陰性對照組細胞愈合率(28.74±1.45)%及空白對照組細胞愈合率(28.22±2.49)%分別比較,miR-711mimics組細胞愈合率(4.76±0.40)%明顯下降,(P0.05),miR-711 inhibitors組細胞愈合率(45.79±0.23)%明顯下降,(P0.05);4)Western Blot實驗結(jié)果顯示:MGC-803和SGC-7901細胞組中mi R-711mimics組與陰性對照組及空白對照組分別比較,E-cadherin蛋白的相對蛋白表達量增多,Vimentin蛋白的相對蛋白表達量減少,miR-711inhibitors組與陰性對照組及空白對照組分別比較,E-cadherin蛋白的相對蛋白表達量減少,Vimentin蛋白的相對蛋白表達量增多,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:過表達miR-711可抑制胃癌細胞的侵襲轉(zhuǎn)移及上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的發(fā)生。
[Abstract]:Objective: to investigate the effects of miR-711 on invasion and metastasis of gastric cancer cells MGC-803 and SGC-7901 and epithelial mesenchymal transition. Methods: miR-711 overexpression of miR-711 was transfected into gastric cancer cell line MGC-803 SGC-7901 by liposome transient transfection, and the empty plasmid of mi RNA was used as negative control. After 48 hours, the transfection efficiency of the untransfected cells was observed by fluorescence microscope and the invasion ability of the cells was detected by Transwell invasion chamber experiment. Cell scratching assay and Western blot assay were used to detect the expression of epithelial protein and interstitial protein. Results the transfection efficiency of MGC-803 and SGC-7901 in gastric cancer cells was observed under fluorescence microscope: the transfection efficiency of both MGC-803 and SGC-7901 was more than 75%. The results of Transwell invasion assay showed that compared with the negative control group (120.00 鹵4.58) and the blank control group (119.67 鹵5.13), the number of perforating cells in the miR-711 mimics group was 70.67 鹵5.51, respectively. The number of perforating cells in the P0.05MR-711 inhibitors group was significantly lower than that in the negative control group (120.00 鹵4.58) and in the blank control group (119.67 鹵5.13). The results of Transwell invasion assay showed that compared with the negative control group (114.67 鹵7.37) and the blank control group (109.67 鹵5.51), the number of perforating cells in the R-711 mimics group was significantly decreased (63.66 鹵5.51), and the number of perforating cells in the P0.05MMIR-711 inhibitors group was 188.33 鹵8.50), and the number of perforating cells in the P0.05MGC-803 cell group was significantly higher than that in the negative control group and the blank control group (109.67 鹵5.51). The number of perforating cells in the R-711 mimics group was significantly lower than that in the control group (188.33 鹵8.50). The scar test showed that after 48 hours of scratch, Compared with the negative control group (32.52 鹵1.73g%) and the blank control group (32.15 鹵1.55g%), the cell healing rate of the miR-711 mimics group was 7.08 鹵0.73% significantly lower than that of the control group (49.03 鹵1.59%), and the cell healing rate of the SGC-7901 cell group was significantly lower than that of the control group (49.03 鹵1.59%). The cell healing rate of the miR-711mimics group was significantly lower than that of the negative control group (28.74 鹵1.45%) and the blank control group (28.22 鹵2.49%). The cell healing rate of the miR-711mimics group was significantly lower than that of the control group (4.76 鹵0.40%). The cell healing rate of the miR-711 inhibitors group was significantly decreased by 45.79 鹵0.23%. The results of Western Blot test showed that mi R-711mimics in the MGC-803 and SGC-7901 cells groups were significantly decreased. Compared with negative control group and blank control group, the relative protein expression of E-cadherin protein increased and the relative protein expression of Vimentin protein decreased in the control group, the negative control group and the blank control group, and the relative protein table of E-cadherin protein in the negative control group was compared with that in the blank control group. The relative protein expression of Vimentin protein increased. Conclusion: overexpression of miR-711 can inhibit the invasion and metastasis of gastric cancer cells and the occurrence of epithelial interstitial transformation.
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R735.2

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本文編號：1650314