本文選題：膠質瘤　切入點：山姜素　出處：《青島大學》2017年碩士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：目的:膠質瘤是人最常見的顱內惡性腫瘤,它的發(fā)病率在全部的人腦腫瘤中占50%以上。而中低度分化的星形細胞瘤和膠質母細胞瘤的患者1年存活率不到全部患者的十分之一。人腦膠質瘤的快速增殖和低分化程度,較其他腫瘤相比較侵襲性強,僅只靠手術治療仍無法做到完全切除,而手術切除后綜合治療仍是目前推薦的治療方案。山姜素是一種天然的化合物,它可以抑制膠質瘤細胞的增殖和侵襲,并能誘導膠質瘤細胞發(fā)生細胞凋亡作用。本文主要研究山姜素對人腦膠質瘤細胞U87中bax,Bcl-2與Caspase,PARP蛋白的表達差異性和其促進凋亡作用的分子機制。山姜素則有望為人腦膠質瘤的治療帶來新的希望。方法:體外培養(yǎng)人腦膠質瘤細胞U87;通過MTT增殖實驗法來檢測山姜素對于U87細胞的增殖抑制作用;提取山姜素處理前后U87細胞總蛋白,Western blotting檢測bax,Bcl-2與Caspase3,PARP的表達情況;通過流式細胞術來分析經過山姜素處理前后U87細胞的細胞周期變化;細胞劃痕實驗表明經過山姜素處理后的U87細胞遷移能力被明顯抑制。結果:山姜素對U87細胞體外增殖具有顯著的抑制作用并且這種抑制作用呈劑量依賴性,酶標儀測定在490 nm處的光密度即OD值,OD值可以反映出活細胞的數量。山姜素對膠質瘤U87細胞的增殖有顯著的抑制作用,而且隨著濃度的不斷升高,U87細胞的存活率會逐漸下降,呈現出典型的濃度依賴性關系,其IC50為7.122μg/ml。;Westernblotting檢測發(fā)現IC50劑量的山姜素處理U87細胞后,Caspase,bax的表達量明顯高于對照組,而Bcl-2,PARP蛋白的表達量則明顯的低于對照組,這提示山姜素可促進U87細胞凋亡;流式細胞術分析U87細胞在山姜素處理后細胞周期均呈現明顯的差異,并且藥物組細胞表現為G1期阻滯;Annexin V/PI實驗顯示經過山姜素處理后的U87細胞凋亡增加,并呈濃度依賴性。結論:山姜素可以抑制體外培養(yǎng)的人腦膠質瘤U87細胞的增殖作用,誘導其細胞凋亡相關基因的差異性表達,從而具有顯著的促進細胞凋亡的作用,并能抑制U87細胞的遷移。然而,目前對細胞凋亡的認識認為,細胞的凋亡作用是一個非常復雜的,由多個基因調控的過程,山姜素在誘導人膠質瘤U87細胞凋亡的過程中是否有其它基因參與,以什么方式參與,仍有待于進一步的深入研究。
[Abstract]:Objective: glioma is the most common intracranial malignant tumor in human. Its incidence is more than 50% of all human brain tumors. The 1-year survival rate of patients with moderately and poorly differentiated astrocytoma and glioblastoma is less than 1/10 of all patients. More aggressive than other tumors, it is still impossible to completely remove the tumor by surgical treatment alone, and comprehensive treatment after surgical resection is still the recommended treatment. Curcumin is a natural compound. It can inhibit the proliferation and invasion of glioma cells. The effect of curcumin on the expression of baxbu2 and caspase- PARP in human glioma cell U87 and the molecular mechanism of its role in promoting apoptosis were studied in this paper. Methods: human glioma cell U87 was cultured in vitro, and the inhibitory effect of curcumin on U87 cell proliferation was detected by MTT proliferation assay. The expression of bcl-2 and Caspase3PARP in U87 cells was detected by Western blotting before and after treatment with curcumin, and the cell cycle changes of U87 cells were analyzed by flow cytometry. Cell scratch assay showed that the migration ability of U87 cells treated with curcumin was significantly inhibited. Results: the proliferation of U87 cells was significantly inhibited by curcumin in a dose-dependent manner. The optical density at 490 nm, OD value and OD value, can reflect the number of living cells. Curcumin can inhibit the proliferation of U87 cells, and the survival rate of U87 cells decreases with increasing concentration. There was a typical concentration-dependent relationship between the two groups. The IC50 was 7.122 渭 g / ml. Western blotting analysis showed that the expression of CaspaseB Bax in U87 cells treated with IC50 was significantly higher than that in the control group, while the expression of Bcl-2PARP protein was significantly lower than that in the control group. These results suggested that curcumin could promote the apoptosis of U87 cells, and that the cell cycle of U87 cells treated with curcumin was significantly different by flow cytometry. In the drug group, the G1 phase arrest Annexin V/PI assay showed that the apoptosis of U87 cells treated with curcumin increased in a concentration dependent manner. Conclusion: curcumin can inhibit the proliferation of human glioma U87 cells cultured in vitro. The differential expression of apoptosis-related genes induced by U87 cells can significantly promote apoptosis and inhibit the migration of U87 cells. Apoptosis is a complex process regulated by multiple genes. Whether and how other genes are involved in the process of inducing apoptosis of human glioma U87 cells need to be further studied.
【學位授予單位】：青島大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R739.41

【參考文獻】

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本文編號：1645912