MGBA負(fù)載臍帶血DC誘導(dǎo)特異性CTL對乳腺癌細(xì)胞的殺傷作用
本文選題:臍帶血 切入點(diǎn):樹突狀細(xì)胞 出處:《中國腫瘤生物治療雜志》2017年12期 論文類型:期刊論文
【摘要】:目的:觀察乳腺珠蛋白(mammaglobin A,MGBA)負(fù)載臍帶血來源樹突狀細(xì)胞(dendritic cell,DC)誘導(dǎo)產(chǎn)生的細(xì)胞毒性T細(xì)胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)對乳腺癌細(xì)胞的體外殺傷效果。方法:采集健康剖宮產(chǎn)女性志愿者的臍帶血,分離臍帶血單個(gè)核細(xì)胞并誘導(dǎo)DC生成,用MGBA致敏DC與自體淋巴細(xì)胞共培養(yǎng)誘導(dǎo)CTL。采用流式細(xì)胞術(shù)測定DC的表型(CD83、CD86、HLADR)變化,ELISA法測定IL-10、IL-12分泌水平,CCK-8法測定CTL對乳腺癌細(xì)胞的殺傷活性。結(jié)果:成功培養(yǎng)出形態(tài)典型、功能成熟的DC,MGBA負(fù)載DC誘導(dǎo)的MGBA特異性CTL對乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-415產(chǎn)生顯著的殺傷效果(P0.05);加入HLA-I抗體可顯著減弱殺傷效果,加入HLA-II抗體細(xì)胞毒活性無顯著變化,加入HLA-I抗體或HLA-II抗體對正常乳腺細(xì)胞的殺傷性均無影響。結(jié)論:MGBA能明顯加強(qiáng)臍帶血DC誘導(dǎo)的CTL對乳腺癌細(xì)胞的殺傷活性,該殺傷活性具有MHC限制性。
[Abstract]:Objective: to observe the cytotoxic T lymphocyte cytotoxic T lymphocyte (CTL) induced by mammaglobin Agna (mammaglobin Agna) loaded dendritic cells (DC) on breast cancer cells in vitro. Methods: umbilical cord blood was collected from healthy caesarean section female volunteers. Isolation of umbilical cord blood mononuclear cells and induction of DC production, MGBA sensitized DC and autologous lymphocytes were co-cultured to induce CTL.The phenotype of DC was determined by flow cytometry. The level of IL-10 IL-12 secretion was determined by Elisa. The cytotoxicity of CTL to breast cancer cells was determined by CCK-8 method. The effect of MGBA specific CTL induced by DC loaded with mature DCGBA on MDA-MB-415 of breast cancer cells was significant (P 0.05), but the cytotoxic activity of HLA-II antibody was not significantly changed by adding HLA-I antibody. Conclusion the addition of HLA-I antibody or HLA-II antibody can significantly enhance the cytotoxicity of CTL to breast cancer cells induced by umbilical cord blood DC, which is MHC restricted.
【作者單位】: 中國醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院腫瘤研究所;
【基金】:遼寧省科技廳社會(huì)發(fā)展攻關(guān)計(jì)劃資助項(xiàng)目(No.2011415052-3)~~
【分類號】:R737.9
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,本文編號:1610614
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