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TCF3對非小細胞肺癌A549細胞株生長和遷移的影響

發(fā)布時間:2018-03-06 05:28

  本文選題:T細胞因子 切入點:A 出處:《重慶醫(yī)科大學學報》2015年03期  論文類型:期刊論文


【摘要】:目的:探討T細胞因子3(T cell factor 3,TCF3)基因沉默對非小細胞肺癌A549細胞株的Wnt通路轉(zhuǎn)錄活性及細胞生長和遷移的影響。方法:采用RNAi技術(shù)將TCF3基因沉默作為實驗組,同時設(shè)立空白對照組和陰性對照組。采用實時熒光定量PCR及Western blot檢測各組細胞中TCF3的m RNA和蛋白表達水平,通過TOPFlash/FOPFlash雙熒光素酶報告基因檢測Wnt通路轉(zhuǎn)錄活性,CCK-8檢測細胞增殖,Transwell檢測細胞遷移能力。結(jié)果:與空白對照組和陰性對照組比較,實驗組TCF3的m RNA和蛋白水平明顯下調(diào);TOPflash/FOPflash報告基因的比值降低(P=0.00,P=0.00);Wnt靶基因C-myc的蛋白表達量下降(P=0.00,P=0.00);細胞的增殖活性降低,細胞凋亡率增加(P=0.00,P=0.00),細胞周期比例發(fā)生變化,G0/G1期細胞增多(P=0.01,P=0.00),S期細胞減少(P=0.01,P=0.00);細胞遷移能力減弱(P=0.00,P=0.00)。結(jié)論:在肺癌細胞中,TCF3可能作為轉(zhuǎn)錄激活因子對細胞的惡性生物學行為起著正向調(diào)控作用。
[Abstract]:Objective: to investigate the effect of T cytokine 3T cell factor 3 (TCF3) gene silencing on the transcriptional activity of Wnt pathway and cell growth and migration in non-small cell lung cancer cell line A549. Methods: TCF3 gene silencing was used as experimental group by RNAi technique. At the same time, blank control group and negative control group were established. The expression of m RNA and protein of TCF3 was detected by real-time fluorescence quantitative PCR and Western blot. TOPFlash/FOPFlash double luciferase reporter gene was used to detect the transcriptional activity of Wnt pathway and CCK-8 was used to detect cell proliferation. The level of m RNA and protein of TCF3 in the experimental group decreased significantly the ratio of topp flash / FOPflash reporter gene. The protein expression of c-myc, the target gene C-myc, was decreased, and the proliferative activity of the cells was decreased. Apoptosis rate increased, cell cycle ratio changed and cell cycle ratio increased in G _ 0 / G _ 1 phase. The number of cells in the G _ 0 / G _ 1 phase increased. The number of cells decreased in the S phase, and the migration ability of the cells decreased. Conclusion: TCF3 may be a transcriptional activator in the malignant biological process of lung cancer cells, and it is possible that TCF3 may act as a transcriptional activator in the malignant biology of lung cancer cells. In order to play a positive regulatory role.
【作者單位】: 重慶醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院呼吸與危重癥學科;
【基金】:國家自然科學基金資助項目(編號:81201841) 國家臨床重點專科建設(shè)經(jīng)費資助項目(編號:衛(wèi)辦醫(yī)改函[2012]649號)
【分類號】:R734.2

【共引文獻】

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本文編號:1573537

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