本文關(guān)鍵詞： 吐根堿 腎癌 PI3K-Akt信號(hào)通路 增殖 凋亡　出處：《南昌大學(xué)》2015年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：目的:本研究觀察吐根堿(emetine)對(duì)人腎癌786-O細(xì)胞株增殖和凋亡的影響,并探討其作用機(jī)制,為吐根堿應(yīng)用于腎癌的臨床研究提供理論依據(jù)。方法:1、體外培養(yǎng)腎癌786-O細(xì)胞株,選取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞,實(shí)驗(yàn)組加入不同濃度梯度的吐根堿分別干預(yù)24h、48h及72h,并設(shè)細(xì)胞對(duì)照組(僅加培養(yǎng)基),溶媒對(duì)照組(加0.16‰DMSO)。用MTT(噻唑藍(lán))檢測(cè)藥物對(duì)細(xì)胞增殖活性的影響。2、采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)786-O細(xì)胞的凋亡率。3、采用RT-PCR檢測(cè)786-O細(xì)胞內(nèi)PI3K和Akt m RN A的相對(duì)表達(dá)量。4、采用Western-blot測(cè)定786-O細(xì)胞內(nèi)總Akt和p-Akt蛋白的相對(duì)表達(dá)量。結(jié)果:1、吐根堿對(duì)腎癌786-O細(xì)胞增殖有顯著的抑制作用,25n M以上隨藥物濃度的增大、作用時(shí)間的延長(zhǎng),抑制作用隨之增強(qiáng),且呈劑量-時(shí)間依賴性(P0.01)。2、實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞的凋亡率與對(duì)照組相比明顯升高,差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),且隨吐根堿劑量的增大而升高。3、實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞內(nèi)PI3K m RNA的表達(dá)水平與對(duì)照組相比明顯減少(P0.01),且隨吐根堿劑量的升高而減少。但Akt m RNA的表達(dá)水平無明顯變化。差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。4、實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞內(nèi)p-Akt蛋白的表達(dá)水平與對(duì)照組相比明顯減少(P0.01),且隨吐根堿劑量的升高而減少。但總Akt蛋白的表達(dá)水平無明顯變化,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:1、吐根堿在體外可以抑制腎癌786-O細(xì)胞的增殖,且呈劑量-時(shí)間依賴性。2、吐根堿在體外可以誘導(dǎo)腎癌786-O細(xì)胞凋亡。3、吐根堿可以下調(diào)PI3K m RNA和p-Akt蛋白的表達(dá)水平,但對(duì)Akt m RNA和總Akt蛋白的表達(dá)水平無明顯影響。4、抑制PI3K-Akt信號(hào)通路活性,可能是吐根堿發(fā)揮抗腎癌作用的重要機(jī)制。
[Abstract]:Objective: to observe the effect of Tucinine on proliferation and apoptosis of 786-O cell line of human renal cell carcinoma (RCC), and to explore its mechanism, and to provide a theoretical basis for the clinical study of RCC. Methods: RCC 786-O cell line was cultured in vitro. Select logarithmic growth cells, The experimental group was treated with different concentration of Tu root alkaloid for 24 h and 72 h, respectively. The cell control group (medium only and solvent control group) was added with 0.16 鈥，

本文編號(hào)：1554544