本文關(guān)鍵詞： 間充質(zhì)干細胞 肝癌 歸巢 分化　出處：《中國腫瘤生物治療雜志》2017年06期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的:觀察人臍帶來源的間充質(zhì)干細胞(human umbilical cord derived mesenchymal stem cell,HUMSC)向HepG2肝癌細胞原位移植瘤的歸巢及分化。方法:二步法體外誘導(dǎo)HUMSC向肝細胞分化,通過Real-time PCR和Western blotting檢測不同時間點HUMSC中肝細胞特異性基因甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)及白蛋白(albumin,ALB)mRNA和蛋白水平的變化;Transwell實驗觀察HUMSC在HepG2肝癌細胞條件培養(yǎng)基作用下的趨化現(xiàn)象;采用皮下-原位移植的方法建立BALB/c裸鼠的HepG2肝癌細胞原位移植瘤模型,利用慢病毒感染的方法將HUMSC標記CMV或AFP啟動子驅(qū)動的f Luc,制備成MSC.CMVLuc或MSC.AFPLuc,并將其注射入荷瘤肝組織,IVIS成像系統(tǒng)觀察MSC.CMVLuc向腫瘤部位的遷移歸巢及MSC.AFPLuc在肝癌微環(huán)境中向肝細胞分化。結(jié)果:HUMSC在體外誘導(dǎo)培養(yǎng)過程中出現(xiàn)細胞形態(tài)學變化證明其向肝細胞分化,同時誘導(dǎo)培養(yǎng)后AFP、ALB mRNA和蛋白的表達明顯升高(均P0.05);HUMSC向HepG2肝癌細胞的趨化呈瘤細胞密度依賴性(P0.01);MSC.CMVLuc注射后2 d遷移并聚集于肝臟,注射后5 d肝臟內(nèi)發(fā)光信號進一步增強;MSC.AFPLuc肝內(nèi)注射后24 h已向肝細胞分化,注射第7天AFP啟動子活性最強,注射第9天活性消失。結(jié)論:在小鼠體內(nèi)外證明了HUMSC具有向肝臟歸巢及分化的能力,為今后MSC應(yīng)用于肝癌基因靶向治療提供了一種新的策略。
[Abstract]:Objective: to observe the homing and differentiation of human umbilical cord derived mesenchymal stem cells derived from human umbilical cord into orthotopic transplantation of HepG2 hepatoma cells. Methods: two step method was used to induce HUMSC to differentiate into hepatocytes. Real-time PCR and Western blotting were used to detect the changes of the levels of alpha-fetoprotein (alpha-fetoprotein), alpha-fetoprotein (AFP) and albumin albumin (Alb) in HUMSC at different time points. The chemotaxis of HUMSC in the conditioned medium of HepG2 hepatocarcinoma cells was observed by Transwell experiment. The model of orthotopic transplantation of HepG2 hepatoma cells in BALB/c nude mice was established by subcutaneous orthotopic transplantation. Using lentivirus infection, HUMSC labeled CMV or f Luc-driven by AFP promoter was prepared into MSC.CMVLuc or MSC.AFPLuc. and injected into liver tissue of liver bearing tumor to observe the migration and homing of MSC.CMVLuc to tumor site and MSC.AFPLuc orientation in the microenvironment of liver cancer. Results the morphological changes of HUMSC in vitro showed that HUMSC differentiated into hepatocytes. At the same time, the expression of mRNA and protein of AFPG-ALB was significantly increased (both P0.05 and HUMSC were chemotaxis to HepG2 hepatoma cells in a density-dependent manner. P0.01P0.01MC.CMVLuc migrated and gathered in liver 2 days after injection. After 5 days of injection, the luminescence signal in the liver further enhanced the differentiation into hepatocytes 24 hours after injection of MSC.AFP Luc, and the activity of AFP promoter was the highest on the 7th day of injection. Conclusion: HUMSC has the ability to homing and differentiating into the liver in vivo and in vitro, which provides a new strategy for the future application of MSC in gene targeting therapy of liver cancer.
【作者單位】： 中國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)學院血液病醫(yī)院血液學研究所實驗血液學國家重點實驗室;天津醫(yī)科大學基礎(chǔ)醫(yī)學院;
【基金】：國家自然科學基金資助項目(No.81400176,No.81402121) 天津市應(yīng)用基礎(chǔ)與前沿技術(shù)研究計劃基金資助項目(No.14JCYBJC23700)~~
【分類號】：R735.7

【參考文獻】

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