miR-125a-5p通過(guò)靶向調(diào)控GAB2抑制乳腺癌細(xì)胞的遷移能力
本文關(guān)鍵詞: 乳腺癌 miR-a-p GRB相關(guān)結(jié)合蛋白 遷移 出處:《中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào)》2017年09期 論文類型:期刊論文
【摘要】:miR-125a-5p可負(fù)性調(diào)節(jié)GAB2表達(dá),抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移。本研究旨在證明miR-125a-5p抑癌作用的普遍性,即miR-125a-5p是否可通過(guò)靶向抑制GAB2抑制乳腺癌細(xì)胞的遷移。熒光素酶實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,miR-125a-5p可特異識(shí)別GAB2的3'-UTR,抑制報(bào)告酶的表達(dá)。熒光定量PCR結(jié)果揭示,與正常乳腺上皮細(xì)胞MCF-10A比較,miR-125a-5p在乳腺癌細(xì)胞MDA231和MCF-7中的表達(dá)明顯降低;與遷移能力相對(duì)較低的MCF-7細(xì)胞比較,miR-125a-5p在遷移能力較高的MDA231細(xì)胞中的表達(dá)量更低。Western印跡結(jié)果證明,與空載體(對(duì)照)和anti-miR125a-5p轉(zhuǎn)染細(xì)胞比較,轉(zhuǎn)染miR-125a-5p明顯抑制GAB2蛋白在乳腺癌細(xì)胞中的表達(dá)。Transwell結(jié)果顯示,與空載體轉(zhuǎn)染的對(duì)照細(xì)胞比較,轉(zhuǎn)染miR-125a-5p的乳腺癌細(xì)胞穿過(guò)基質(zhì)膠的細(xì)胞數(shù)明顯減少;相反,轉(zhuǎn)染anti-miR125a-5p的細(xì)胞穿過(guò)基質(zhì)膠的細(xì)胞數(shù)卻明顯增多。上述結(jié)果提示,miR-125a-5p在正常的乳腺細(xì)胞中高表達(dá),而在乳腺癌細(xì)胞中低表達(dá),其表達(dá)水平與癌細(xì)胞的遷移能力和GAB2表達(dá)呈反向關(guān)系。本研究結(jié)果還提示,miR-125a-5p通過(guò)靶向負(fù)調(diào)控GAB2抑制乳腺癌細(xì)胞的遷移能力?傊,本研究證明,miR-125a-5p在腫瘤中發(fā)揮抑癌作用。
[Abstract]:MiR-125a-5p can negatively regulate the expression of GAB2, inhibit glioma cell invasion and metastasis. The purpose of this study is to prove the universality of the miR-125a-5p tumor suppressor role, namely whether miR-125a-5p can inhibit the migration of breast cancer cells to inhibit GAB2 by luciferase target. Experimental results show that miR-125a-5p can specifically recognize GAB2 3'-UTR, inhibit the expression of report enzymes. Fluorescence quantitative PCR results revealed that compared with normal mammary epithelial cells MCF-10A, expression of miR-125a-5p in MDA231 and MCF-7 in breast cancer cells decreased significantly; and the migration ability of MCF-7 cells is relatively low compared with lower dose.Western blot results prove that the expression of miR-125a-5p in high migration ability in MDA231 cells, and the empty vector (control) compared with anti-miR125a-5p transfected cells, the expression of.Transwell of transfected miR-125a-5p inhibited GAB2 protein in breast cancer cells display, and empty vector Compared with control cells transfected with the number of cells transfected with miR-125a-5p breast cancer cells through Matrigel was significantly reduced; on the contrary, the number of cells transfected with anti-miR125a-5p cells through Matrigel was significantly increased. These results indicated that miR-125a-5p was highly expressed in normal breast cells, while low expression in breast cancer cells, and its expression level cancer cell migration and GAB2 expression is negatively correlated. The results of this study also suggest that miR-125a-5p negatively regulated by GAB2 to target inhibition of breast cancer cell migration. In conclusion, this study demonstrated that miR-125a-5p in tumor suppressor role play.
【作者單位】: 濰坊醫(yī)學(xué)院病理學(xué)教研室;濰坊醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院;濰坊醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)研究實(shí)驗(yàn)中心;濰坊醫(yī)學(xué)院護(hù)理學(xué)院;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金青年基金項(xiàng)目(No.81402389,No.81641111) 山東省自然科學(xué)基金(No.ZR2014HL077,No.ZR2015HL065) 山東省高等學(xué)?萍加(jì)劃(No.J12LK03,No.J13LK03)資助~~
【分類號(hào)】:R737.9
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